Shigella spp

Escherichia 1-A coli

Mdulo: RUTA METABOLICAS

Natalia Elisa Aldana Tatiana Margarita Serrano Mantilla Harold Jos Hernndez

Microbiologa y Bioanlisis

Universidad Industrial de Santander

PRUEBA

OBJETIVO
Evaluar la utilizacin de azcares por parte de Shigella spp y Escherichia coli mediante el uso del medio Caldo rojo fenol y la produccin de gases por medio de la Campana de Durham.

MEDIO Con rojo fenol como indicador de pH pH 7,40,2 Ingredientes Peptona 10g Extracto de carne 1g Cloruro de sodio, NaCl 5g Rojo fenol 0.018g Agua desionizada 1.000mL Carbohidrato(excepto tubo base) 1% LECTURA cido: Color amarillo (+): pH 6.8 Alcalino: Color rosado rojo (-): pH 8.4 Medio sin inocular: Color naranja

FUNDAMENTO
La prueba de fermentacin de Carbohidratos puede utilizarse para determinar qu productos finales se han formado pero no las vas metablicas utilizadas. El indicador de pH utilizado es el rojo fenol, ya que la mayora de los productos finales del metabolismo de carbohidratos son cidos orgnicos. Con el rojo fenol, el cambio de color ocurre cerca del pH original del medio (pH cido 6.8; pH del medio 7.4)

REACCIN
Indicador de pH + CHO orgnicos + Cambio de color CO2, H2, cidos

Gluclisis, etc

Bacter ia

RESULTADOS
Microorganismo Shigella spp
ESPERA DOS OBTENI DOS

E.coli
ESPERA DOS OBTEN IDOS

Carbohidrato Glucosa Lactosa Sacarosa

x * Fermenta No fermenta Produce gas

* x x

* x x

* * /x

* * x

DISCUSIN
El crecimiento en el tubo base se vio evidenciado por la turbidez garantizando la validez de la prueba, en los dos casos el tubo base se torn rojo por el uso de las peptonas del medio, lo que alcaliniz el medio por la produccin de aminas que viraron el indicador a rojo.

Shigella spp evidenci la fermentacin de glucosa con produccin escasa de gas en la campana de Durham mediante pequeas burbujas en su interior. El color amarillo indica una disminucin de pH obteniendo un medio cido y por tanto un resultado positivo. El color rojo-naranja obtenido en la Lactosa se report como negativo, esto puede indicar que el microorganismo est formando productos metablicos que no necesariamente son por fermentacin y por ello no se mantiene el color rojo inicial, de igual manera sucedi con la sacarosa evidenciando la no fermentacin de este carbohidrato.
E. Coli ferment la glucosa y la lactosa haciendo virar el indicador a amarillo por la produccin de cidos; la produccin de

CONCLUSIONES
La fermentacin es un proceso metablico anaerobio de oxidacinreduccin, en el cual un sustrato orgnico acta como aceptor final de electrones en lugar de oxgeno. Las pruebas de fermentacin de carbohidratos pueden usarse para para determinar qu productos finales se han formado pero no las vas metablicas se han usado. El cido producido por la fermentacin de un carbohidrato se observa por un cambio de pH slo cuando se produce ms cido por la degradacin del carbohidrato que sustancias alcalinas provenientes de la degradacin de las peptonas, que es componente del medio. Shigella spp fermenta glucosa pero no lactosa ni sacarosa; produce poco gas en medio con glucosa.

E. coli fermenta glucosa, lactosa pero no sacarosa totalmente; produce gran cantidad de gas en medio con glucosa y lactosa.

BIBLIOGRAFIA
MAC FADDIN, Jean. Pruebas Bioqumicas para la Identificacin de Importancia Clnica. 3 ed. Editorial Mdica Panamericana. 2003. 850 p. KONEMAN, Elmer. ALLEN, Stephen. Diagnstico Microbiolgico. 6 ed. Editorial Mdica Panamericana. 2008. 1691 p. TORTORA, Gerard. FUNKE, B. CASE, C. Introduccin a la Microbiologa. 9 ed. Editorial Mdica Panamericana. 2007. 959 p. FORBES, Betty. Diagnstico Microbiolgico. 12 ed. Editorial Mdica Panamericana. 2009. 1026 p. ROJAS, Norman. Bacteriologa Diagnstica. 1 ed. Universidad de Costa Rica. 2006. 151 p.