Universidade Paulista - UNIP Sorocaba

Curso : Farmcia e Bioqumica

Disciplina: Fundamentos de Controle de Qualidade de Produtos Farmacuticos e Cosmticos

Professora : Mnica Prestes Silva Ano: 2010

Controle de Qualidade Fsico - Qumico

Objetivo: Avaliar as caractersticas fsico qumicas de materiais (matria-prima, material de embalagem , produto semi-acabado e produto acabado).
Mtodos de identificao: Ensaios organolpticos : Avaliar caractersticas de um produto Ex.: cor, odor , sabor ( ind. de alimentos), tato, etc. Ensaios Fsicos: Detectar uma ou mais caractersticas de um produto Ex.: pH, umidade, dureza, teste de dissoluo, etc

Controle de Qualidade Fsico - Qumico

Mtodos instrumentais: cromatgrafo (Mtodos qualificao) espectrofotmetro de quantificao e e

Ensaios Qumicos: utilizados para Qualificar ou Quantificar uma substncia ou componentes de uma mistura Ex .: Reaes colorimtricas e de precipitao

Segurana no laboratrio Fsico-Qumico:

- Jamais pipetar com a boca solventes ou reagentes volteis, txicos ou que apresentem qualquer risco para a segurana. Usar sempre um pipetador. - Utilizar sempre uma capela ou fluxo para manusear estes materiais.
- Lavar as mos ao final dos procedimentos de laboratrio e remover todo o equipamento de proteo incluindo luvas e aventais. - Nunca consumir laboratrio. alimentos e bebidas no

- Utilizao de Equipamentos de proteo individual (Jaleco, culos de proteo, sapato de segurana). -Armazenagem de produtos /incompatibilidade de produtos Rotulagem e simbologias de risco. qumicos qumicos.

-Todos os frascos contendo solues ou reagentes devem ser rotulados com : nome do produto, a data de preparao, validade e responsvel pela soluo. Quando necessrio adicionar informaes sobre o risco, perigo e condies de segurana em seu manuseio.

- Diamante de Hommel :
Amarelo - Reatividade (Reactivity) Branco - Informao de um perigo especial Vermelho: Inflamvel Azul: risco a sade Nmeros altos: Alto risco Nmeros baixos: Baixo risco W cortado: Pode explodir em contato com gua

- Um lava-olhos e um chuveiro de emergncia devem estar acessveis nos laboratrios onde reagentes perigosos para a pele e os olhos so usados.

Controle de Qualidade Microbiolgico

O monitoramento microbiolgico um requisito de BPF e fundamental para a manuteno da qualidade do produto e do processo. - Nos ltimos anos, a Agncia de Vigilncia Sanitria (ANVISA), tem atuado mais prxima s empresas produtoras, incluindo indstrias e farmcias de manipulao, e exigido o cumprimento s regulamentaes tcnicas estabelecidas e procedimentos documentados do processo de fabricao garantindo a qualidade final do produto.

Controle de Qualidade Microbiolgico

-A qualidade microbiolgica de medicamentos, cosmticos e fitoterpicos definida por padres microbianos descritos em compndios oficiais e normas regulamentadoras.
Conceitos Produtos No estreis: Slidos: Comprimidos, Drgeas, Cpsulas, Granulados, Ps,... Semi-Slidos: Cremes, Pomadas, Gels, Unguentos Lquidos: Xaropes, Solues, Suspenses

Produtos estreis: ausncia total de microrganismos ou partculas slidas. Por isso, eles requerem procedimentos mais rigorosos. Os estreis mais comuns so os injetveis e os colrios

Esterilizao: processo de destruio ou remoo de todas as formas de vida microscpica de um objeto. Um objeto estril, no sentido microbiolgico, est completamente livre de microrganismos vivos. Este termo refere-se ausncia total ou destruio de todos os microrganismos. Desinfetante: um agente, normalmente qumico, que mata as formas vegetativas, mas no necessariamente, as formas esporuladas, de microrganismos patognicos. O termo normalmente refere-se s substncias utilizadas em objetos inanimados.

Anti-sptico: uma substncia que previne o crescimento ou ao de microrganismos, pela destruio dos mesmos ou pela inibio de seu crescimento ou atividade. Usualmente est associado com substncias aplicadas ao corpo do homem.
- Lista de principais sanitizantes - livro

-O laboratrio de Microbiologia deve possuir: -rea adequada para ensaios microbiolgicos e para lavagem / esterilizao / desinfeco de materiais -Documentos / POP para os ensaios microbiolgicos e registros :
- Procedimentos para a coleta e manuseio de amostras - Programa de limpeza do laboratrio de microbiologia - Monitoramento ambiental - Procedimentos para preparao dos meios de cultura Registros - Meio de cultura identificado com nome, nmero de lote e data de validade.

Controle de Qualidade Microbiolgico

-Procedimento para realizao das anlises microbiolgicas / Metodologias analticas - Para identificao de reagentes, meios de cultura e diluentes Nome, concentrao, validade, armazenamento recomendados, data de preparao, nome do responsvel pela preparao -Fontes reconhecidas na aquisio das culturas de referncia com certificados. - Estoques de referncia para testes de avaliao das cepas.

Acondicionamento de materiais no laboratrio Microbiolgico: Aps serem lavados e secos, os utenslios do laboratrio microbiolgico devem ser embalados em papel Kraft para depois serem esterilizados. Ex.: pipeta, placas de petri, esptulas, basto de vidro Os bales volumtricos devem ser tampados com bucha ( boneca) e cobertos com papel Kraft

Esterilizao: - Materiais como placas, pipetas ponteiras, tubos de ensaio, frascos devero ser esterilizados antes do uso. - Mtodos utilizados:- por calor seco em estufa (170C/2h) ou calor mido em autoclave (121C/30 minutos); Principais Ensaios laboratoriais:
- Contagem total de microrganismos aerbios - Contagem total de fungos e leveduras - Pesquisa de microorganismos patognicos - Teste de eficcia de conservantes ou teste de desafio (challenge test) avalia a eficcia do sistema conservante necessria para a proteo satisfatria do produto. - Endotoxina bacteriana Pirognio ( produtos estreis)

Contaminao Microbiolgica
A contaminao microbiana de produtos farmacuticos, cosmticos e fitoterpicos pode ser proveniente de vrias origens devido complexidade dos processos de produo. Principais fatores de contaminao em produtos farmacuticos e cosmticos: 1) Pessoal - Os indivduos, carregam consigo uma grande variedade de microrganismos - Estes mantm contato direto com as matrias primas, produtos intermedirios e acabado,havendo o risco de contaminao.

Mas como esses microrganismos conseguem chegar at os produtos farmacuticos ???

Tudo comea quando a gente pega a conduo para chegar ao trabalho.....

LOTAO

Quando chegamos ao trabalho ns:

E SUAS MOS COMO ESTO AGORA???

Caso no exista um rigoroso controle, estes microrganismos podem chegar at a rea produtiva e causar contaminao microbiolgica nos produtos

Como PREVENIR a contaminao atravs do PESSOAL /OPERADORES ??

Existem vrias maneiras de prevenir ou reduzir a populao microbiana existente em reas produtivas , tais como: -Treinamento em BPF

-Uso correto de uniforme e EPIs;

-Higiene e assepsia das mos de maneira correta

COMO LAVAR AS MOS ?

LAVE SUAS MOS COM SABONETE AT OS COTOVELOS , EM SEGUIDA PASSAR ALCOOL-GEL NAS MOS . AQUELES QUE UTILIZAM LUVAS, SOMENTE NAS LUVAS

USO CORRETO DE UNIFORME E EPI

TOUCA LIMPA E COLOCADA ADEQUADAMENTE

UNIFORME BRANCO, LIMPO Material que no libere fibras

BARBEADO

Cobrindo as orelhas

PROTETOR AURICULAR
E MSCARA

SAPATO LIMPO

ANTES E APS ALGUMA TAREFA E APS USAR O BANHEIRO, LAVAR AS MOS COM SABO AT O COTOVELO

MANTENHA SEMPRE AS UNHAS APARADAS, LIMPAS E SEM ESMALTE. PROTEJA SEMPRE OS FERIMENTOS, PRINCIPALMENTE OS DAS MOS.

NO USE JIAS/ BIJOUTERIAS E PRINCIPALMENTE MAQUIAGEM AO ENTRAR NA FBRICA

A contaminao derivada dos operadores normalmente significante. Durante atividades normais a perda da pele da ordem de 104 por minuto. Os contaminantes por elas transportados micrococos no patognicos e estafilococos. so

Salmonella e Escherichia coli podem estar associados dependendo dos hbitos de higiene dos operadores .

Contaminao Microbiolgica 2) Instalaes / Equipamentos -Instalaes com umidade elevada apresentam maior crescimento de fungos e bactrias. -Instalaes empoeiradas podem crescimento de microorganismos propiciar

- Material de construo : revestimento de paredes, pisos, forros e outros componentes no podem ser porosos nem gerar partculas, devendo apresentar superfcies lisas, isentas de salincias e reentrncias -Equipamentos / Limpeza das reas; Almoxarifado: Condies adequadas de estocagem ( T e U , pallets, recipientes com tampas, reas segregadas)

Onde encontr-los?
MQUINA SUJA CHO SUJO
MOS SUJAS

UNIFORME SUJO

BARBA E UNHA

Limites de aceitao -Os limites de aceitao de contaminantes de ambientes, so estabelecidos conforme o grau de risco e da suscetibilidade a contaminao de cada produto e por cada empresa. -Preveno de contaminao das Instalaes /Equipamentos A reduo de contaminao pode ser obtida por meio de: paredes, tetos, cantos arredondados entre os pisos (facilidade de limpeza), lavveis e impermeveis, resistentes a eroso e aos agentes de limpeza e desinfeco. -Prticas de limpeza e sanitizao validadas e estabelecidas em POP.

GUA gua geralmente utilizada como matria prima, sendo o maior componente nas preparaes farmacuticas e, portanto, tambm pode vir a ser uma importante fonte de contaminao. -Deve ser tratada para diminuir a chance de contaminao dos produtos -Os parmetros microbiolgicos da gua devem ser mais rgidos do que os parmetros estabelecidos para os produtos.

Limites de aceitao: gua de processo - Monografias farmacopeicas preconizam como limite mximo 100 UFC/ml para microrganismos totais aerbios e ausncia de patgenos como P. aeroginosa, coliformes totais e fecais em 100 mL de amostra ( Farmacopeia Brasileira 1988)
-Preveno de contaminao -A qualidade da gua na Indstria deve ser assegurada atravs de protocolos de validao, instalao, operao e desempenho .

- O sistema deve ser sanitizado para prevenir a formao de biofilmes (estrutura complexa que consiste de diversas microcolnias, aderidos em superfcies diversas), estabelecidos em procedimentos validados

Matrias-primas (Insumos) e Material de embalagem Condies favorveis de crescimento ( Insumos) a) Nutrientes: Os produtos com composio complexa como medicamentos e cosmticos constituem fonte rica em nutrientes para o crescimento de microrganismos. b) Atividade de gua c) MP com baixo teor de gua, assim como leos, ceras e parafinas apresentam baixo risco de contaminao microbiana.

Matrias-primas de origem natural, como gomas, acares, gelatina, hormnios, talco, slica e protenas apresentam alta susceptibilidade de apresentarem problemas de contaminao - Manipulao de matrias primas a) Matrias - primas so fracionadas pelas empresas fornecedoras para atender pedidos com quantidades especficas.

b) Deficincia durante o processo de amostragem

Material de embalagem Podem ser importante fonte de contaminao - Frascos de vidro: previamente esterilizados - Plsticos : empregados nos colrios e parenterais de grande volume. Processo de moldagem a elevadas temperaturas, deve conduzir a sua obteno j estreis. Preveno de contaminao -A utilizao de insumos e embalagens de fornecedores qualificados, que comprovem documentalmente a realizao do controle microbiolgico dos seus produtos, desde a produo, acondicionamento, transporte e entrega, atravs de anlises microbiolgicas para controle dos pontos crticos e do insumo entregue;

AR -Sistemas HEPA - Utilizao de filtros para diminuir o nmero de partculas viveis na rea de fabricao. Preveno de contaminao
Toda as reas produtivas, contemplando o ar ambiente, as mos dos profissionais e as superfcies de equipamentos e utenslios podem e devem ser monitoradas atravs de amostragens e anlises peridicas. - Com uma matria-prima confivel, rea produtiva adequada, pessoal competente e dedicado, processo validado e a qualidade da gua de assegurada, as chances de se ter contaminao sob controle se conclui no controle microbiolgico dos lotes do produto acabado.

Toda as reas produtivas, contemplando o ar ambiente, as mos dos profissionais e as superfcies de equipamentos e utenslios podem e devem ser monitoradas atravs de amostragens e anlises peridicas. - Com uma matria-prima confivel, rea produtiva adequada, pessoal competente e dedicado, processo validado e a qualidade da gua de assegurada, as chances de se ter contaminao sob controle se conclui no controle microbiolgico dos lotes do produto acabado.

Segurana no laboratrio Microbiolgico:

-Culturas de mo devem ser manuseadas cuidadosamente por meio de tcnicas asspticas ( Bico de bunsen ou fluxo laminar). -Usar pipetadores ou peras de borracha Jamais pipetar com a boca. -Analistas: lavar as mos antes e aps realizao das anlises - Culturas e materiais contaminados devem ser autoclavados por , no mn, 30 minutos a 121 graus Celsius.

- Em caso de quebra de tubos ou placas contendo microrganismos vivos, aplicar soluo germicida e remover os vidros com luvas de proteo. - Manter frascos com lcool longe de Bico de Bunsen - Utilizao de EPI - Todos os instrumentos de trabalho devem ter sido esterilizados ( placas, pipetas, bales volumtricos, tubos) -Alas de inoculao devem ser flambadas at o rubro antes de cada uso - Ao terminar o trabalho, desinfetar a superfcie utilizada - No fumar, comer ou beber dentro do laboratrio

Limites Microbiolgicos recomendados

a) Produtos de higiene pessoal, cosmticos e perfume
Subgrupo Tipo I rea de aplicao Produto acabado - Produtos para uso infantil - Produtos para rea dos olhos - Produtos que entram em contato com mucosas Demais produtos susceptveis contaminao microbiolgica

Tipo II

Subgrupos dos produtos cosmticos e local de aplicao, de acordo com a Resoluo 481/ 99 - ANVISA

Grupo I
Contagem de microorganismos mesfilos totais aerbios, no mais que 102 UFC/g ou ml Limite mximo: 5 x 102 UFC/g ou ml Ausncia de Pseudomonas aeruginosa em 1g ou 1mL; Ausncia de Staphylococcus aureus em 1g ou 1mL; Ausncia de Coliformes totais e fecais em 1g ou 1mL; Ausncia de Clostrdios sulfito redutores em 1g (exclusivamente para talcos).

Grupo II
Contagem de microorganismos mesfilos totais aerbios, no mais que 103 UFC/g ou ml; Limite mximo: 5 x 103 UFC/g ou mL Ausncia de Pseudomonas aeruginosa em 1g ou 1mL; Ausncia de Staphylococcus aureus em 1g ou 1mL; Ausncia de Coliformes totais e fecais em 1g ou 1mL; Ausncia de Clostrdios sulfito redutores em 1g (exclusivamente para talcos).

Limites microbiolgicos recomendados para matria - prima Origem Natural ( vegetal, mineral, animal)
Mximo 500 UFC/g ou mL para mo mesfilos aerbios totais Origem sinttica Mximo 500 UFC/g ou mL para mo mesfilos aerbios totais Ausncia de patgenos em 1g ou mL de amostra ( Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Salmonella sp , coliformes totais e fecais, Clostrideos sp (ps) )

b) Medicamentos
Farmacopia Brasileira 4 Edio ( 1988)

Legislaes Vigentes
Resoluo n 481 de 23/09/99. Estabelece os parmetros de controle microbiolgico para os produtos de higiene pessoal, cosmticos e perfumes.

Portaria n 518, do Ministrio da Sade, que dita as normas para o tratamento e controle da qualidade da gua potvel RDC n 214 de 12 de dezembro de 2006, que estabelece a exigncia de se controlar a gua usada na produo farmacutica.

Legislaes Vigentes
A Portaria n 123, 19/10/94 da Secretaria de Vigilncia Sanitria do Ministrio da Sade, estabelece normas para o registro de fitoterpicos em que estabelece limites microbianos mximos para matrias-primas vegetais, sendo por grama ou mililitro, de at 105 microorganismos viveis.

Reviso: Metodologias Analticas utilizadas para determinao de microrganismos em matria-prima, semi-acabado e produto acabado.
A Farmacopia (1988) sugere para contagem de microrganismos viveis totais diferentes mtodos, entre eles:

Mtodo de filtrao por membrana / Mtodo de contagem em placas /Tubos mltiplos (NMP)

Pesquisa e identificao de microrganismos patognicos so usados meios seletivos para crescimento dos principais patgenos.
Pseudomonas aeruginosa (gar cetrimida) estrias por esgotamento Staphylococcus aureus (gar manitol ou Vogel-Johnson ou Baird Parker): estrias por esgotamento Salmonella (gar verde brilhante ou XLD ): estrias por esgotamento Escherichia coli (gar Mac Conkey) : estrias por esgotamento

* Conforme a via de administrao do produto, alm dos m.o.

citados , outros m.o tambm so pesquisados ( FB IV 1988)

Metodologia Analtica para controle ambiental

Amostragem do ar
-Exposio de Placas de Petri - Utilizao de equipamento capazes de aspirar uma quantidade conhecida de ar

Amostragem de superfcies
- Utilizao de swabs previamente umedecidos em salina - Realizar o esfregao sobre a superfcie - Colocar novamente em tubo contendo soluo tampo fosfato pH 7,2 ou TSB - Realizar a tcnica de semeadura em profundidade. (Meio Casena soja / Sabouraud-dextrose)

Lavagem de superfcies

-Avalia condies microbiolgicas de embalagem e superfcies, preferencialmente tratada por sanitizantes. - Salina estril
- Realizar tcnica de semeadura em profundidade

Mtodo de filtrao por membrana filtrante Mtodo para contagem de microrganismos aerbios mesfilos, permitindo variao do meio de cultura, de acordo com o objetivo da pesquisa - Capela de fluxo laminar - Conjunto de porta-filtro esterilizado - Meio de cultura requerido para o teste - Bomba de vcuo - Membrana filtrante quadriculada com porosidade de 0,45 m e dimetro aprox. de 47mm

O procedimento envolve:
1) Filtrao, sob vcuo, de um volume adequado da amostra a analisar atravs de uma membrana filtrante (com porosidade controlada de 0,45m), onde ficaro retidas clulas de possveis bactrias contaminantes; 2) Colocao da membrana sobre um meio de cultura seletivo para a deteco do grupo especfico de microrganismos indicadores, contido em placa de Petri; 3) Incubao da placa de Petri (s) temperatura(s) adequada(s) ao desenvolvimento do(s) microrganismo(s).

(4) Observao e contagem das colnias formadas sobre a membrana. O material utilizado deve ser previamente esterilizado. O sistema de filtrao de inox esterilizado diretamente chama do bico de Bunsen. O restante material de plstico ou vidro previamente esterilizado na autoclave. As membranas filtrantes vm esterilizadas de origem. Meios de cultura utilizados: Plate count agar ( PCA) ou gar casena-soja ou Agar nutritivo

Mtodo de contagem em placas

(Produto acabado, semi-acabado, matria-prima, gua) Objetivo: Determinar a populao microbiana em geral , na faixa mesoflica.

Obs: A sensibilidade dos ensaios refere-se contagem de m.o. viveis. As clulas que tenham algum comprometimento em seu sistema reprodutivo ( efeito bacteriosttico ou injria no formam colnias perceptveis dentro do prazo estabelecido para contagem.

Tcnica de semeadura em profundidade (Pour Plate)

- Contagem de bactrias mesfilas aerbias ( gar casena soja) - Contagem de fungos e leveduras ( gar sabouraud dextrose)

Transferir 1 mL de cada diluio da amostra na regio central da placa de Petri esterilizada e identificada. Realizar anlise em duplicada
Obs.: Adicionar c.tartrico no meio para fungos para no ocorrer cresc. de bactrias.

Adicionar a cada placa 15 mL do meio de cultura, previamente fundido e resfriado. Homogeneizar as alquotas ( meio de cultura e amostra) com suaves movimentos circulares ou em oito.
Incubar as placas em posio invertida Fungos e leveduras: Incubar por 5-7 dias a 30-35 C. Contagem de bactrias: Incubar por 48h a 30-35 C.

Tcnica dos tubos Mltiplos

Mtodo estimativo recomendado para amostras que apresentam baixa contaminao, empregando diluies decimais seriadas, com interpretao baseado em clculos estatsticos. Mtodo estimativo recomendado para amostras que apresentam baixa contaminao, empregando diluies decimais seriadas, com interpretao baseado em clculos estatsticos.

Para a anlise, as amostras so homogeneizadas, diludas e semeadas em meios de cultura que so empregados para a recuperao de possveis clulas injuriadas.

Procedimento : - Preparar os tubos com meio de cultura e tubo de Durhan invertido. - Sero 3 sries de tubos, ou seja 9 tubos ( meio CLS) -Para a primeira srie, adicionar 10 mL da amostra. Para a segunda srie 1 mL e para a terceira 0,1 mL. ( Dessa forma estamos diluindo a amostra) -Homogeneizar com cuidado e incubar a 30 - 35C por 24h. -Tubos com turvao e gs indicam a presena de microorganismos viveis gram negativos -Os tubos com crescimento e produo de gs so semeados em
caldos seletivos para a realizao do teste confirmatrio para coliformes totais ( caldos lactosado bile verde brilhante (CLBVB) e caldo EC (confirmao de coliformes fecais )

Caldo Lauril

Caldo Verde Brilhante Lactose

Formao de Gs

Formao de Gs

Tubos positivos: Meio turvo e formao de gs Presena de microrganismos

Tubos positivos: Meio turvo e formao de gs Presena de coliformes totais Confirmao: Fermentao com Caldo Verde Brilhante Lactose

Caldo EC ( Caldo Escherichia coli)

- Incubar a 44-45C - Presena de gs e meio turvo: positivo

Formao de Gs

Presena de coliformes fecais ( coliformes termoresistentes ou a 45C )

gar Cetrimida P. aeruginosa

gar Mc Conkey E.coli

gar XLD Salmonella

gar Manitol Staphilococcus aureus