PIGMENII FOTOSINTETICI Sunt reprezentai de:

Pigmenii verzi - clorofilieni : - clorofila a - clorofila b Pigmenii galbeni carotenoizi: - carotina - xantofila

Clorofila este pigmentul care:

- d culoarea verde plantelor - are proprietatea unic de a capta lumina solar Clorofila -"adevratul Prometeu care fur focul din ceruri Pigmenii plasai la nivelul tilacoidelor granale - dispui n lamelele fosfolipoproteice

Organizarea lamelelor cloroplastelor: a schema a dou lamele; b schema mrit a poriunii ncadrate n schema a; c schema mrit a poriunii ncadrate din schema b

Molecula de clorofil - dipol cu:

pol hidrofil - (capul) pol hidrofob - (coada)

Polul hidrofil - plasat n stratul proteic , cu o nclinare de 450 Polul hidrofob situat n stratul fosfolipidic
Pigmenii carotenoizi plasai n stratul fosfolipidic

Pigmenii fotosintetici + membranele fosfolipoproteice cuantozomi diametrul 90

Park i Biggins - 1964 - 1 cuantozom conine: 160 molecule clorofila a 70 molecule clorofila b 48 molecule pigmeni galbeni fosfolipide sulfolipide digliceride

Structura spaial a moleculei de clorofila a

COMPOZIIA CHIMIC A PIGMENILOR

Formula chimic a clorofilelor:

Clorofila a C55 H72 O5 N4 Mg Clorofila b C55 H70 O6 N4 Mg

D.P.D.V. chimic - clorofila are o structur porfirinic Nucleu porfirinic - n centrul cruia se afl Mg2+ Nucleul porfirinic prezint: - 2 funcii acide - COOH - esterificate cu doi alcooli : metanol i fitolul

Molecula de clorofil a - conine acid clorofilinic a Molecula de clorofil b conine acid clorofilinic b Clorofila b difer de clorofila a prin aceea c: - n locul gruprii metilice (-CH3) de la atomul C3 din al 2 nucleu pirolic - exist o grupare aldehidic (-CHO) aprut prin procese de oxidare

Pigmenii fotosintetici

Cap hidrofil, cu atom central de magneziu

Atomul de magneziu, legat de nucleii pirolici

Coad hidrofob

Cu numeroase legturi duble

Skript, p. 28

Pigmenii galbeni - carotenoizi

Carotinele - hidrocarburi nesaturate ce conin

11 legturi duble conjugate i dou legturi metilice

Carotina C40 H56

Cele mai importante carotine - alfa i beta carotenul

Formula chimic a carotinei

Pigmenii galbeni - carotenoizi

Cele mai importante xantofile: - luteina - C40 H56 O2 - violaxantina - zeaxantina - neoxantina

Extragerea i separarea pigmenilor asimilatori

Extragerea pigmenilor asimilatori se face cu solveni organici: alcool etilic, alcool metilic, eter, cloroform, aceton , etc.
Separarea pigmenilor asimilatori : - metode care se bazeaz pe gradul diferit de solubilitate n diferii solveni - metode care se bazeaz pe gradul diferit de adsorbie pe medii inerte (hrtie, pulberi etc).

Metode care se bazeaz pe gradul diferit de solubilitate n diferii solveni

Metoda

Sorby Krauss

I. Tratarea extractului alcoolic de pigmeni cu benzin II. Dup agitare amestecul se separ n dou zone: 1. partea superioar - pigmenii verzi i carotina 2. partea inferioar - xantofila

n solveni organici Metoda Sorby-Krauss Metoda Timireazev Metoda cromatografiei (pe hrtie, pe coloan, n strat subire)

carotina
xantofila clorofila a clorofila b

Metode care se bazeaz pe gradul diferit de solubilitate n diferii solveni

Metoda

Timiriazev const n:

Saponificarea clorofilelor cu NaOH sau Ba(OH)2

Separarea clorofilelor saponificate prin filtrare

Separarea pigmenilor galbeni prin solubilizare difereniat - n benzin i alcool Benzina conine carotin Alcoolul conine xantofil

Metode bazate pe gradul diferit de adsorbie pe medii inerte

cromatografiei const n: antrenarea pigmenilor sub aciunea unui solvent separarea pe baza adsoriei diferite pe medii inerte ca:
Metoda

- hrtia cromatografic - cromatografia pe hrtie - zaharoza, CaCO3, Al2O3, MgO, amidon cromatografia pe coloan - pulberi cu siliciu - cromatografia n strat subire

PROPRIETILE FIZICE I CHIMICE ALE PIGMENILOR FOTOSINTETICI

A.

Proprieti fizice

Culoarea
-

clorofila a- verde-albstrui clorofila b - verde-glbui

carotina - galben portocaliu

xantofila - galben-verzui

Solubilitatea - pigmenii fotosintetici sunt

solubili n solveni organici, dar insolubili n ap

Fluorescena - proprietatea soluiei de

pigmeni de a avea culoare verde privit n lumina direct, prin transparen i culoarea roie privit prin reflexie

 Absorbia

selectiv a radiaiilor din spectrul vizibil

Clorofila a - absorbie maxim n 672, 683, 700 i

435 nm

Clorofila b - absorbie maxim n 644 i 453 nm

Pigmenii carotenoizi - absorbie maxim n

400-480 nm

4. Absorbia selectiv a radiaiilor din spectrul vizibil

Radiaiile solare sunt unde electromagnetice cu diferite lungimi de und. numai radiaiile vizibile sunt active fotosintetic, reprezentnd 45% din totalul radiaiilor ce ajung pe scoara terestr, restul sunt inactive. Lungimea de und (m)
Radiaia cosmic
"PAR" = photosynthetically active radiation Radiaii uv infraroii microunde Roentgen

unde radio

lumina vizibil
(400-700 nm)

lungimea de und in nm

Spectre de absorbie ale clorofilei

a examinare la spectroscop b examinare la spectrofotometru

Lumina incident

Lumina reflectat Din cantitatea de lumin ajuns pe suprafaa frunzei: 2-5% este utilizat n fotosintez

- 15% este reflectat de suprafaa frunzelor; - 10% traverseaz frunzele, fr a fi absorbit; - 70% este absorbit de frunze, dar este transformat n cldur, fiind consumat n procesul de transpiraie i eliberat n mediu.

B. Proprietile chimice
Formarea
- reacia

feofitinei rezult din:

clorofilei cu acizi organici sau minerali

n reacie cu HCl - atomul de Mg2+ din molecula clorofilei este nlocuit cu doi atomi de H+ feofitina
COOCH 3 C32H30ON4Mg COOC 20H39 MgCl 2 2HCl C32H32ON4 COOC 20H39 COOCH 3

Saponificarea clorofilei - prin reacia cu

hidroxizii

Tratarea soluiei de clorofil cu NaOH desfacerea moleculei de clorofil n: acizi clorofilinici a i b, alcool fitilic, metanol
saponificare

Acizii clorofilinici + Na+

sruri

Clorofila saponificat - schimb solubilitatea n solveni organici, fiind solubil n alcool etilic

METODE DE STUDIERE A FOTOSINTEZEI Metode tradiionale

Fotosinteza - apreciat prin determinarea intensitii fotosintezei Intensitatea fotosintezei poate fi exprimat prin:
- cantitatea de CO2 absorbit (cm3) - cantitatea de O2 degajat - cantitatea de substan organic asimilat (mg, g) pe unitatea de suprafa foliar (cm2, dm2 , m2), n unitatea de timp (ora, ziua, anul)

METODE DE STUDIERE A FOTOSINTEZEI

A. Metode bazate pe determinarea CO2 absorbit

Metoda manometric Warburg

Metode titrimetrice
Metoda Boussingault - determinarea CO2 dintr-un curent de aer Metoda Ivanov-Kossovici - determinarea CO2 dintr-un spaiu limitat

B. Metode bazate pe determinarea O2 degajat

Metode calitative
- Metoda numrrii bulelor de O2 degajat aplicat la plantele acvatice Helodea i Myriophyllum

- Metoda Beijerinck - Metoda Engelmann

Metode cantitative
Metoda manometric Warburg

C. Metode bazate pe determinarea substanei

organice acumulate

Metode cantitative
Metoda jumtilor de frunz - Sachs determinarea prin cntrire a substanei organice acumulate

Metoda rondelelor - Sachs modificat

Metoda izotopilor radioactivi - determinarea

ncorporrii C14O2 n diferite substane organice

Metode calitative

Metoda autoradiografiei - determinarea calitativ a ncorporrii C14O2 n substane organice n diferite organe ale plantei

Metoda histo-autoradiografiei - determinarea calitativ a ncorporrii C14O2 n substanele organice din diferite celule i esuturi

 Metodele

moderne de studiere a fotosintezei

vizeaz:
determinarea schimbului de gaze prin sisteme electronice multicanal analiza coninutului de clorofil

Determinarea schimbului de gaze prin sisteme electronice multicanal

Analizor de CO2 n infrarou - camere de reacie ce conin un curent de aer de la frunze Analizor de O2 - conine un sistem special de electrozi ce creeaz un curent electric proporional cu concentraia O2 din camera de reacie

Analiza coninutului de clorofil

Metodele
- apreciaz coninutul de clorofil a pe baza capacitii de absorbie a luminii de ctre extractul acetonic, n lungimea de und 663 nm

spectrofotometrice

Spectrofotometrele permit analize n: zona UV zona vizibil UV-Vis

Metodele fluorometrice - determin fluorescena

clorofilei a, ca o msur a activitii fotosintetice a frunzelor

Fluorescena clorofilei msoar:

absorbia

luminii cantitatea de conversie energetic intensitatea reaciilor fotochimice din faza de lumin a fotosintezei

Fluorometrele

Permit msurarea fluorescenei n condiii de cmp

Folosete lmpi speciale albastre i un filtru de emisie ( 470 nm) pentru a excita clorofila a Lumina fluorescent - trece printr-un filtru de emisie rou ( 685 nm) - detectat de o fotodiod de silicon