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Qu es un biorreactor? Partes fundamentales de un biorreactor Materiales empleados en su construccin Criterios para el diseo de biorreactores Control de variables en biorreactores Tipos de biorreactores Eleccin de un biorreactor tipo Cambios de escala
Qu es un biorreactor?
Recipiente donde se realiza el proceso de fermentacin
Esquema de un biorreactor
Materiales de construccin
Caractersticas generales:
a) soportar ciclos de limpieza y esterilizacin sin deteriorarse b) no deben ser reactivos ni absorbentes Tipos: hormign, acero inoxidable, vidrio y plstico Vidrio: no tiene rugosidad, no es txico, resiste a la corrosin y es transparente Acero inoxidable: buenas propiedades mecnicas pero alto coste
Funcionamiento asptico Proporcionar un sistema adecuado de aireacin y agitacin Consumo de energa mnimo Entradas para la adicin de nutrientes y control de pH Debe facilitar la transferencia de calor Mantener estable la temperatura deseada Mantener las clulas uniformemente distribuidas Suministrar oxgeno a una velocidad adecuada Se debe mantener el cultivo puro
Reaccin biolgica
Procesos lentos frente a las reacciones qumicas Procesos de fermentacin tiene carcter autocataltico La actividad especfica de los biocatalizadores es baja en
Reaccin biolgica
La naturaleza notablemente del biocatalizador puede modificarse
La distribucin de producto depender de las condiciones operativas Temperatura y presin de operacin son moderadas
Temperatura
pH Humedad relativa
Espuma
Aireacin
Operacin importante en procesos aerobios
Oxigeno debe ser aportado continuamente al cultivo Debe ser transferido desde la fase gas a la lquida
No2 : densidad de flujo de oxgeno entre fases CL : concentracin de oxgeno en la fase lquida Ci: concentracin de oxgeno en la interfase KL: coeficiente individual de transferencia de materia entre fases NO2: velocidad de transferencia de oxgeno por unidad de volumen de reactor C*: concentracin de oxgeno en la fase lquida correspondiente a la saturacin a: relacin rea interfacial / volumen de reactor
No2=KL(CL-Ci)
Aireacin
Partes mecnicas de un sistema de aireacin:
b) Soplador regenerativo
Aireacin
Partes de control:
1. Control de flujo aire 2. Control de presin de aire 3. Control de difusin de oxgeno disuelto a) Mediante la cantidad de oxgeno disuelto b) Mediante la demanda bioqumica de oxgeno
Aireacin
Tipos:
Agitacin
Tiene la funcin de generar la potencia necesaria para
producir una mezcla perfecta para el sistema de cultivo y producir un rgimen de agitacin adecuado Relacin que hay entre la potencia consumida por el sistema y las variables de operacin: Np=P/*N3D5 P=potencia; =densidad del liquido; N= velocidad de agitacin;D=dimetro del impulsor. Relacin con el reynolds: Np=b*Rex
Agitacin
Agitacin mecnica: Partes: 1. Motor impulsor 2. Eje transmisor de la potencia 3. Sello mecnico a) Cartucho rgido b) Cartucho sensible 4. Impulsores a) Agitadores b) Turbinas
Agitacin
Vibracin :
- Es debida al imn que mueve los discos perforados -Su funcin principal es conseguir una mezcla eficaz -Su mayor ventaja es el trato suave con las clulas y la no formacin de espumas
Esterilizacin
Si la fermentacin es invadida por un microorganismo
extrao al proceso, podemos tener resultados no esperados: a) la disminucin de la productividad b) degradar el producto de inters o incluso provocar lisis celular La esterilizacin consiste en la eliminacin de todos los microorganismos presentes capaces de competir con el organismo deseado en las condiciones de cultivo. (desinfeccin)
Esterilizacin
Dos mtodos:
Temperatura
Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada que controlamos mediante un sistema que consta de: 1. Dos sistemas de control: Intercambiador de calor y serpentn
Temperatura
2. Un sistema de control: Controlador de temperaturas
Temperatura
4. Un servo control: Servo controlador de temperatura
5. Un sistema regulador de paso de flujo: Vlvula solenoide
Temperatura
6. Un sistema de conduccin de fluido: Tuberas de
conduccin de agua
Temperatura
Otro factor ambiental importante de la temperatura sera encontrar la temperatura ptima ya que sta afecta a los microorganismos de 2 formas: 1. Conforme aumenta la temperatura
2. Por encima de un mximo de temperatura -Muerte celular
Temperatura
Temperatura
Clasificacin de los microorganismos de acuerdo a su temperatura: Psicrfilos (T ptima 15C)
Temperatura
Mesfilos (mayoritarios) (T ptima 20-40C)
Temperatura
Termfilos (T ptima >45C)
Temperatura
Temperatura ptima de Crecimiento
Se determina con la Ley de Arrehnius
Temperatura
pH
Controlamos la acidez generada por los productos de
desecho y el metabolismo propio del cultivo celular o microorganismos Ms habituales pH 6 Inusuales a pH < 2 y > 10 Variacin del pH a lo largo del proceso de fermentacin Uso de tampones y control automtico del pH Rango interno : 6-8
pH
Clasificacin:
pH
pH
El control del pH lo realizamos mediante un sistema de control de acidez que consta: 1. Dos subsistemas dispensadores servo controlados 2. Un sistema de control del pH
pH
Sistema de medicin del pH y optimizacin del mismo
Humedad relativa
Disponibilidad de agua y concentracin de solutos
disueltos en ella
Humedad relativa
aW = PS/PW
donde PS = presin de vapor del agua en una soluci
Presin
Solubilidad de gases y sustancias volatiles
Contribuye a las esterilizacin Avisos de problemas
Presin
Espuma
La presencia de oxgeno en el medio interno ocasiona que
los productos de desecho del metabolismo se oxiden La presencia de esta espuma puede ser regulada mediante dos subsistemas que funcionan en conjunto: 1. Subsistema anti espuma 2. Subsistema de bombeo peristltico
mercurio y termistores
diafragma
Tipos de biorreactores
Biorreactores de tanque agitado (B.T.A.)
-discontinuo -discontinuo alimentado -continuo Biorreactor de flujo en pistn Biorreactor de lecho fijo Biorreactores agitados por fluidos Fermentadores de membranas Fotobiorreactores
B.T.A. discontinuo
Ms usado a nivel industrial, ms tradicional Inculo y medio de cultivo al principio de la
operacin.Entrada y salida de gases Adicin de antiespumantes y reguladores de ph Ventajas: a) condiciones aspticas en periodos cortos b) reactor perfectamente mezclado Desventajas: a) perdida de eficacia (parada/arranque) b) ultima parte de la fermentacin lenta c) gran variacin de concentracin celular
B.T.A. discontinuo
B.T.A. discontinuo
a) manipulacin externa de la concentracin de nutrientes b) crecimiento celular sensible a una determinada sustancia limitante c) mejora rendimiento
B.T.A. continuo
Equipo cilndrico con sistema de homegenizacin
(mecnico); composicin es la misma en cualquier punto (QUIMIOSTATO) Entrada y salida de medio lquido (V=cte) Ventajas: a) reduccin de costes de capital b) reduccin costes de operacin c) mejor control del proceso
B.T.A. continuo
B.T.A. continuo
Conectado en serie:
B.T.A. continuo
Reactor continuo de tanque agitado con recirculacin
Bajas velocidades en la pared Cada uno de los elementos diferenciales, tiene igual comportamiento que un reactor agitado en discontinuo
Tiempo medio de residencia del lquido no controlable rea de transferencia del O2 del gas al lquido no modificable
Inconvenientes:
Difcil control condiciones ambientales Costes de fabricacin altos No aptos para lquidos con partculas o muy viscosos: bloqueo flujo
Inconvenientes:
Alto gasto energtico Dificultad de prediccin de prestaciones a gran escala
Camas de esponja
Entrada de aire
Fermentadores de membrana
Biorreactor de membrana Reactor biolgico: Responsable de la degradacin de los compuestos presentes en el agua residual. Mdulo de membranas: Encargado de llevar a cabo la separacin fsica del licor mezcla.
Fermentadores de membrana
Membranas tiles para: retencin o inmovilizacin
celular; suministro de oxigeno al medio de cultivo; separacin de productos. Inconvenientes: a) Baja eficacia b) Clulas quedan adheridas a las fibras c) Purga del gas
Fermentadores de membrana
Mejoras:
a) Membrana semipermeable -Elimina restricciones difusionales y la perdida de actividad -Limitacin de velocidad b) Rotofermentacin c) Mayor oxigenacin uso de fibras huecas
Fermentadores de membrana
Fotobiorreactores
Los organismos fotosintticos pueden transformar el CO2 en materia constitutiva de biomasa, mediante la utilizacin de una fuente de energa luminosa y un compuesto dador de electrones (H2O, H2S)
Fotobiorreactores
Se agrupan en funcin de su aplicacin en: a) Produccin de biomasa b) Produccin de metabolitos de alto valor aadido c) Aplicaciones medioambientales El biorreactor debe tener una elevada superficie especifica para la transferencia de energa luminosa La concentracin de biomasa debe ser lo suficientemente elevada como para absorber la totalidad de la radiacin luminosa
a) materias primas: Su aprovisionamiento y acondicionamiento supone un 50% b) costes de capital: se busca aumentar productividades c) servicios y suministros: energia de agitacin, aeracin y esterilizacin Aspectos tcnicos: a) alto rendimiento b) elevada productividad c) obtencin del producto en concentraciones elevadas
a) baja productividad debida a un proceso discontinuo b) problemas de inhibicin de sustrato o producto c) baja concentracin enzimtica o celular en el biorreactor d) limitaciones por transferencia de materia
a) mantener concentraciones elvadas mezcla completa b) minimizar efectos pr inhibicin producto -eliminar producto mientras se forma -modelo de flujo prximo al flujo pistn c) aumentar concentracin enzimtica -inmovilizacin -recirculacin d) problemas con oxgeno - aumentar rea interfacial - modificar la agitacin
Cambio de escala
Instalacin y operacin de un equipo a nivel industrial,
cuyo diseo y condiciones de operacin se basan en parte en la experimentacin y demostracin a una menor escala Anticipar los efectos del cambio de escala e introducir las variaciones requeridas en el diseo de los equipos cuando varia su tamao.
Cambio de escala
Proceso complicado: -las ecuaciones del proceso no pueden resolverse a menudo -los parmetros quimicos, fisicos y biolgicos estan interconectados -las soluciones de laboratorio o planta piloto pueden no ser validas -en teora la reaccin qumica independiente de la geometra y tamaao del reactor. Pero depende: -transporte cantidad de movimiento, transporte y energa
Cambio de escala
-influye indirectamente en tiempo de esterilizacin calidad del medio peor Teora de la similitud: geomtrica; dinmica; trmica; msica (concentracin); (bio)qumica -dos sistemas descritos por las mismas ecuaciones diferenciales,mismas condiciones de contorno se comportan de igual forma
Cambio de escala
Mtodos mas usados: -potencia por unidad de volumen constante -Coeficiente volumtrico de transferencia de oxigeno constante -limitaciones: fluidos no newtonianos las correlaciones dependen de la escala de trabajo propiedades fsicas cambian con la fermentacin tensin superficial depende de la escala
Cambio de escala
Comprobar:
-tiempo de mezcla -esfuerzo cortante -transferencia de oxigeno Scale down: simula fermentador industrial con dos a escala laboratorio (uno aerado y el otro con burbujeo de N2 ) los microorganismos pasan por dos microambientes distintos estudio de la sensibilidad