ndice

Qu es un biorreactor? Partes fundamentales de un biorreactor Materiales empleados en su construccin Criterios para el diseo de biorreactores Control de variables en biorreactores Tipos de biorreactores Eleccin de un biorreactor tipo Cambios de escala

Qu es un biorreactor?
Recipiente donde se realiza el proceso de fermentacin

Su diseo debe ser tal que asegure

Homogeneidad entre los componentes del sistema Condiciones ptimas

Para el crecimiento microbiano Obtencin del producto deseado

Partes fundamentales de un biorreactor

Recipiente
Entrada/salida de aires y gases Entrada del medio de cultivo y salida del producto

Alimentacin del inculo

Lneas de muestreo Sistemas de agitacin mecnica

Esquema de un biorreactor

Materiales de construccin
Caractersticas generales:

a) soportar ciclos de limpieza y esterilizacin sin deteriorarse b) no deben ser reactivos ni absorbentes Tipos: hormign, acero inoxidable, vidrio y plstico Vidrio: no tiene rugosidad, no es txico, resiste a la corrosin y es transparente Acero inoxidable: buenas propiedades mecnicas pero alto coste

Clasificacin principal de biorreactores

No agitados, sin aireacin No agitados, con aireacin Agitados con aireacin

Criterios para el diseo de un biorreactor

Funcionamiento asptico Proporcionar un sistema adecuado de aireacin y agitacin Consumo de energa mnimo Entradas para la adicin de nutrientes y control de pH Debe facilitar la transferencia de calor Mantener estable la temperatura deseada Mantener las clulas uniformemente distribuidas Suministrar oxgeno a una velocidad adecuada Se debe mantener el cultivo puro

Reaccin biolgica
Procesos lentos frente a las reacciones qumicas Procesos de fermentacin tiene carcter autocataltico La actividad especfica de los biocatalizadores es baja en

comparacin con los catalizadores qumicos

Procesos muy dependientes de las condiciones ambientales

Pueden presentar problemas de inhibicin del medio o de

producto dependiendo de las condiciones de operacin y de las concentraciones de trabajo

Reaccin biolgica
La naturaleza notablemente del biocatalizador puede modificarse

La distribucin de producto depender de las condiciones operativas Temperatura y presin de operacin son moderadas

Aspectos a tener en cuenta en el diseo de biorreactores

Aireacin
Agitacin Esterilizacin

Temperatura
pH Humedad relativa

Espuma

Aireacin
Operacin importante en procesos aerobios
Oxigeno debe ser aportado continuamente al cultivo Debe ser transferido desde la fase gas a la lquida
No2 : densidad de flujo de oxgeno entre fases CL : concentracin de oxgeno en la fase lquida Ci: concentracin de oxgeno en la interfase KL: coeficiente individual de transferencia de materia entre fases NO2: velocidad de transferencia de oxgeno por unidad de volumen de reactor C*: concentracin de oxgeno en la fase lquida correspondiente a la saturacin a: relacin rea interfacial / volumen de reactor

No2=KL(CL-Ci)

No2=KL a(C L C*)

Aireacin
Partes mecnicas de un sistema de aireacin:

1. Fuente de aire a) Compresor de aire

b) Soplador regenerativo

2. Tubera y filtros de entrada 3. Boquilla y difusor de aire 4. Tubera y filtros de salida

Aireacin
Partes de control:

1. Control de flujo aire 2. Control de presin de aire 3. Control de difusin de oxgeno disuelto a) Mediante la cantidad de oxgeno disuelto b) Mediante la demanda bioqumica de oxgeno

Aireacin
Tipos:

-Tanque agitado -Air lift

Agitacin
Tiene la funcin de generar la potencia necesaria para

producir una mezcla perfecta para el sistema de cultivo y producir un rgimen de agitacin adecuado Relacin que hay entre la potencia consumida por el sistema y las variables de operacin: Np=P/*N3D5 P=potencia; =densidad del liquido; N= velocidad de agitacin;D=dimetro del impulsor. Relacin con el reynolds: Np=b*Rex

Agitacin
Agitacin mecnica: Partes: 1. Motor impulsor 2. Eje transmisor de la potencia 3. Sello mecnico a) Cartucho rgido b) Cartucho sensible 4. Impulsores a) Agitadores b) Turbinas

Agitacin
Vibracin :

- Es debida al imn que mueve los discos perforados -Su funcin principal es conseguir una mezcla eficaz -Su mayor ventaja es el trato suave con las clulas y la no formacin de espumas

Esterilizacin
Si la fermentacin es invadida por un microorganismo

extrao al proceso, podemos tener resultados no esperados: a) la disminucin de la productividad b) degradar el producto de inters o incluso provocar lisis celular La esterilizacin consiste en la eliminacin de todos los microorganismos presentes capaces de competir con el organismo deseado en las condiciones de cultivo. (desinfeccin)

Esterilizacin
Dos mtodos:

a) tratamiento por calor hmedo (vapor)

b) esterilizacin por filtracin

Temperatura
Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada que controlamos mediante un sistema que consta de: 1. Dos sistemas de control: Intercambiador de calor y serpentn

Temperatura
2. Un sistema de control: Controlador de temperaturas

3. Un sistema de medicin: Sensor de temperatura

Temperatura
4. Un servo control: Servo controlador de temperatura
5. Un sistema regulador de paso de flujo: Vlvula solenoide

Temperatura
6. Un sistema de conduccin de fluido: Tuberas de
conduccin de agua

Temperatura
Otro factor ambiental importante de la temperatura sera encontrar la temperatura ptima ya que sta afecta a los microorganismos de 2 formas: 1. Conforme aumenta la temperatura
2. Por encima de un mximo de temperatura -Muerte celular

Temperatura

Temperatura
Clasificacin de los microorganismos de acuerdo a su temperatura: Psicrfilos (T ptima 15C)

Psicrotolerantes (T ptima 20-40C)

Temperatura
Mesfilos (mayoritarios) (T ptima 20-40C)

Temperatura
Termfilos (T ptima >45C)

Hipertermfilos (T ptima >80C)

Temperatura
Temperatura ptima de Crecimiento
Se determina con la Ley de Arrehnius

dln (k)/dt = Ea/RT^2

Temperatura

pH
Controlamos la acidez generada por los productos de

desecho y el metabolismo propio del cultivo celular o microorganismos Ms habituales pH 6 Inusuales a pH < 2 y > 10 Variacin del pH a lo largo del proceso de fermentacin Uso de tampones y control automtico del pH Rango interno : 6-8

pH
Clasificacin:

Acidfilos Neutrfilos Alcalfilos

pH

pH
El control del pH lo realizamos mediante un sistema de control de acidez que consta: 1. Dos subsistemas dispensadores servo controlados 2. Un sistema de control del pH

pH
Sistema de medicin del pH y optimizacin del mismo

Humedad relativa
Disponibilidad de agua y concentracin de solutos

disueltos en ella

Humedad relativa
aW = PS/PW
donde PS = presin de vapor del agua en una soluci

PW = presin de vapor del agua pura

0<aW<1

Presin
Solubilidad de gases y sustancias volatiles
Contribuye a las esterilizacin Avisos de problemas

Presin

Espuma
La presencia de oxgeno en el medio interno ocasiona que

los productos de desecho del metabolismo se oxiden La presencia de esta espuma puede ser regulada mediante dos subsistemas que funcionan en conjunto: 1. Subsistema anti espuma 2. Subsistema de bombeo peristltico

Control de variables en biorreactores

Temperatura: mercurio; termopares, resistencias de

mercurio y termistores

diafragma

Presin: tipo bourdon transductores de presin

protegidos por diafragmas

Control de variables en biorreactores

Agitacin:
Detectores de espuma:

-sistemas mecnicos -agentes qumicos Medidores del caudal:

Control de variables en biorreactores

pH:
Sondas de oxigeno disuelto Sondas para el CO2 disuelto

Tipos de biorreactores
Biorreactores de tanque agitado (B.T.A.)

-discontinuo -discontinuo alimentado -continuo Biorreactor de flujo en pistn Biorreactor de lecho fijo Biorreactores agitados por fluidos Fermentadores de membranas Fotobiorreactores

B.T.A. discontinuo
Ms usado a nivel industrial, ms tradicional Inculo y medio de cultivo al principio de la

operacin.Entrada y salida de gases Adicin de antiespumantes y reguladores de ph Ventajas: a) condiciones aspticas en periodos cortos b) reactor perfectamente mezclado Desventajas: a) perdida de eficacia (parada/arranque) b) ultima parte de la fermentacin lenta c) gran variacin de concentracin celular

B.T.A. discontinuo

B.T.A. discontinuo

B.T.A. discontinuo alimentado

Substrato se alimenta en cargas sucesivas
Ventajas:

a) manipulacin externa de la concentracin de nutrientes b) crecimiento celular sensible a una determinada sustancia limitante c) mejora rendimiento

B.T.A. discontinuo alimentado

B.T.A. continuo
Equipo cilndrico con sistema de homegenizacin

(mecnico); composicin es la misma en cualquier punto (QUIMIOSTATO) Entrada y salida de medio lquido (V=cte) Ventajas: a) reduccin de costes de capital b) reduccin costes de operacin c) mejor control del proceso

B.T.A. continuo

B.T.A. continuo
Conectado en serie:

a) buen comportamiento b) mejor aireacin del proceso

B.T.A. continuo
Reactor continuo de tanque agitado con recirculacin

recirculacin parcial de biomasa

Biorreactor de flujo en pistn

Fluido que se desplaza a lo largo del reactor Altas conversiones Bajos costes econmicos Soluciones viscosas

Bajas velocidades en la pared Cada uno de los elementos diferenciales, tiene igual comportamiento que un reactor agitado en discontinuo

Biorreactor de lecho fijo

Fciles de operar Biopelcula fijada sobre partculas inmviles Dos formas de operar:
De lecho fijo de riego por percolacin
Flujo de lquido distribuido irregularmente

Tiempo medio de residencia del lquido no controlable rea de transferencia del O2 del gas al lquido no modificable

De lecho fijo inundado

El tiempo medio de residencia es mayor por unidad de volumen de reactor y es controlable rea de transferencia gas-lquido depende de las condiciones de inyeccin del gas

Biorreactor de lecho fijo

Caractersticas:
Pequeo tamao Elevada productividad Pequeo volumen vaco Facilidad de automatizacin

Inconvenientes:
Difcil control condiciones ambientales Costes de fabricacin altos No aptos para lquidos con partculas o muy viscosos: bloqueo flujo

Biorreactor de lecho fluidizado

Caractersticas:
Chorro de solucin de sustrato en base del reactor No formacin de canales

Inconvenientes:
Alto gasto energtico Dificultad de prediccin de prestaciones a gran escala

Biorreactor de lecho fluidizado

Medio de cultivo Salida de agua

Camas de esponja

Difusor de aire Entrada de agua

Entrada de aire

Biorreactores agitados por fluidos

Alternativa al uso de biorreactores de lecho fijo; mantener bioparticulas en suspensin Ventajas: a) flujo en pistn homogneo b) menor rozamiento c) facilidad para eliminar gas d) trabaja con bioparticulas pequeas e) evita taponamiento por crecimiento biomasa

Fermentadores de membrana
Biorreactor de membrana Reactor biolgico: Responsable de la degradacin de los compuestos presentes en el agua residual. Mdulo de membranas: Encargado de llevar a cabo la separacin fsica del licor mezcla.

Fermentadores de membrana
Membranas tiles para: retencin o inmovilizacin

celular; suministro de oxigeno al medio de cultivo; separacin de productos. Inconvenientes: a) Baja eficacia b) Clulas quedan adheridas a las fibras c) Purga del gas

Fermentadores de membrana
Mejoras:

a) Membrana semipermeable -Elimina restricciones difusionales y la perdida de actividad -Limitacin de velocidad b) Rotofermentacin c) Mayor oxigenacin uso de fibras huecas

Fermentadores de membrana

Fotobiorreactores

Los organismos fotosintticos pueden transformar el CO2 en materia constitutiva de biomasa, mediante la utilizacin de una fuente de energa luminosa y un compuesto dador de electrones (H2O, H2S)

Fotobiorreactores

Se agrupan en funcin de su aplicacin en: a) Produccin de biomasa b) Produccin de metabolitos de alto valor aadido c) Aplicaciones medioambientales El biorreactor debe tener una elevada superficie especifica para la transferencia de energa luminosa La concentracin de biomasa debe ser lo suficientemente elevada como para absorber la totalidad de la radiacin luminosa

Eleccin del biorreator

Aspectos econmicos:

a) materias primas: Su aprovisionamiento y acondicionamiento supone un 50% b) costes de capital: se busca aumentar productividades c) servicios y suministros: energia de agitacin, aeracin y esterilizacin Aspectos tcnicos: a) alto rendimiento b) elevada productividad c) obtencin del producto en concentraciones elevadas

Eleccin del biorreactor

Eficacia en procesos fermentativos limitada:

a) baja productividad debida a un proceso discontinuo b) problemas de inhibicin de sustrato o producto c) baja concentracin enzimtica o celular en el biorreactor d) limitaciones por transferencia de materia

Eleccin del biorreactor

Dependiendo de las necesidades:

a) mantener concentraciones elvadas mezcla completa b) minimizar efectos pr inhibicin producto -eliminar producto mientras se forma -modelo de flujo prximo al flujo pistn c) aumentar concentracin enzimtica -inmovilizacin -recirculacin d) problemas con oxgeno - aumentar rea interfacial - modificar la agitacin

Cambio de escala
Instalacin y operacin de un equipo a nivel industrial,

cuyo diseo y condiciones de operacin se basan en parte en la experimentacin y demostracin a una menor escala Anticipar los efectos del cambio de escala e introducir las variaciones requeridas en el diseo de los equipos cuando varia su tamao.

Cambio de escala
Proceso complicado: -las ecuaciones del proceso no pueden resolverse a menudo -los parmetros quimicos, fisicos y biolgicos estan interconectados -las soluciones de laboratorio o planta piloto pueden no ser validas -en teora la reaccin qumica independiente de la geometra y tamaao del reactor. Pero depende: -transporte cantidad de movimiento, transporte y energa

Cambio de escala
-influye indirectamente en tiempo de esterilizacin calidad del medio peor Teora de la similitud: geomtrica; dinmica; trmica; msica (concentracin); (bio)qumica -dos sistemas descritos por las mismas ecuaciones diferenciales,mismas condiciones de contorno se comportan de igual forma

Cambio de escala
Mtodos mas usados: -potencia por unidad de volumen constante -Coeficiente volumtrico de transferencia de oxigeno constante -limitaciones: fluidos no newtonianos las correlaciones dependen de la escala de trabajo propiedades fsicas cambian con la fermentacin tensin superficial depende de la escala

Cambio de escala
Comprobar:

-tiempo de mezcla -esfuerzo cortante -transferencia de oxigeno Scale down: simula fermentador industrial con dos a escala laboratorio (uno aerado y el otro con burbujeo de N2 ) los microorganismos pasan por dos microambientes distintos estudio de la sensibilidad