Dra.

Eliete Aguiar de Miranda Frigatto

Laboratrio Central - Hospital So Paulo
UNIFESP - EPM
Teste de Sensibilidade em Bactrias
Gram-Negativas

O
Anel -lactmico
Stio de ao da -lactamase
GRUPOS:
Penicilina
Cefalosporinas
Monobactmicos:
aztreonam
Carbapenmicos:
imipenem, meropenem,
ertapenem
1a. Gerao
Cefazolina (ancef, kefzol)
Cefalotina
2a. Gerao
Cefamandol (mandol)
Cefonicid (monocid)
Cefotetan (cefotan)
Cefoxitina (mefoxin)
Cefuroxima (zinacef)
3a. Gerao
Cefoperazon(cefobid)
Cefotaxima (claforan)
Ceftazidima (fortaz, tazicef)
Ceftizoxima (cefizox)
Ceftriaxona (rocephin)
4a. Gerao
Cefepima (maxipim)
MONOBACTMICOS:
AZTREONAM (+ Cilastatina sdica) : Azactam
Sinergismo: Aminoglicosdeos, clindamicina, metronidazol.
CARBAPENMICOS:
IMIPENEM (+ Cilastatina sdica) Primaxin (i.v)
Tienam
MEROPENEM: Meronem
- Atividade comparvel com clindamicina e metronidazol
ERTAPENEM:
AMINOGLICOSDEOS:
Gentamicina, Amicacina, Tobramicina, Netilmicina, Kanamicina
e Estreptomicina.
TETRACICLINAS:
Tetraciclina, Doxaciclina e Minociclina.
FLUOQUINOLONAS:
Ciprofloxacina, Levofloxacina, Gatifloxacina,
Lomefloxacina, Norfloxacina, Ofloxacina,
cido Nalidxico.

NITROFURANTONAS:
Nitrofurantona.
CLORANFENICOL:
Cloranfenicol.
SULFAS:
Sulfonamidas, Sulfametoxazol/Trimetoprim
Penicilinas/Inibidores de
Beta-lactamases
Unasyn Zosyn Timentin
Piperacilina/Tazobactam
Ampicilina/Sulbactam
Ticarcilina/c. clavulnico
RESISTNCIA BACTERIANA AOS ANTIMICROBIANOS
Natural ou intrnseca
Aerbios
Anaerbios
aminoglicosdeos
Adquirida
Cromossmica Mutao de genes
Resistncia
transmitida da
clula-me para
clula-filha
Plasmidial
Transmissvel Resistncia mltipla
Produo: -lactamases,
fosfotransferases,
hidrolases, redutases.
Metronidazol
Quinolonas
RESISTNCIA NATURAL
ORGANISMOS RESISTNCIAS

Enterobacteriaceae Penicilina G, glicopeptdeos,
macroldeos,
clindamicina, linezolida, estreptograminas
e mupirocin.
Enterobacter spp., Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina +
c
C. freundii clavulnico, 1 gerao de cefalosporinas,
cefoxitina, cefotetan e cefuroxima.
Klebsiella spp ., Ampicilina, amoxacilina, carbenicilina e
Citrobacter diversus ticarcilina

Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
RESISTNCIA NATURAL
ORGANISMOS RESISTNCIAS

M. morganii Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina + c
clavulnico, 1 gerao de cefalosporinas,
cefuroxima, polimixina, colistina e
nitrofurantona.
Providencia spp Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina +
c
clavulnico, 1 gerao de cefalosporinas,
netilmicina, tobramicina, nitrofurantona,
cefuroxima, gentamicina, polimixina e
colistina.

Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
RESISTNCIA NATURAL
ORGANISMOS RESISTNCIAS

Proteus mirabilis Colistina, polimixina,
nitrofurantona
e tetraciclina.

Proteus vulgaris Ampicilina, amoxacilina,
cefuroxima,
colistina, polimixina e nitrofurantona,
1 gerao de cefalosporinas e
tetraciclinas.



Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
RESISTNCIA NATURAL
ORGANISMOS RESISTNCIAS

Serratia marcescens Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina +
clavulnico, 1 gerao de
cefalosporinas, cefuroxima, colistina
polimixina, cefoxitina e nitrofurantona.


Serratia spp Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina +
c.clavulnico, cefuroxima, colistina,
1 gerao de cefalosporinas e
polimixinas.




Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
RESISTNCIA NATURAL
ORGANISMOS RESISTNCIAS

A. baumannii Ampicilina, amoxacilina, 1 gerao de
cefalosporinas.

P. aeruginosa Ampicilina, amoxacilina, amoxacilina + c
clavulnico, 1 e 2 geraes de cefalosporinas
cefotaxima, cido nalidxico,
cido pipemdico, tetraciclina, kanamicina,
cloranfenicol e sulfametoxazol/trimetoprim.


Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
RESISTNCIA NATURAL

ORGANISMOS RESISTNCIAS

S. malthophilia Todos os -lactmicos (exceto ticarcilina com
c. Clavulnico), aminoglicosdeos e
carbapenens.

B. cepacia Ampicilina, amoxacilina, 1 e 2 gerao
cefalosporinas, colistina, polimixina,
aminoglicosdeos, quinolonas.



Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
RESISTNCIA INTRNSECA
CEFALOTINA
Enterobacteriaceae

Citrobacter freundii
Enterobacter spp.
Providncia spp.
M. morganii
P. penneri
Serratia spp.
Yersinia enterocoltica

RESISTNCIA INTRNSECA
CEFOXITINA
Enterobacteriaceae
Serratia marcescens
Citrobacter freundii
Enterobacter cloacae
Enterobacter aerogenes



RESISTNCIA INTRNSECA
Amoxacilina / .clavulnico
Enterobacteriaceae
Citrobacter freundii
Enterobacter spp.
Providncia spp.
Serratia spp.
M. morganii
RESISTNCIA NATURAL
RESISTNCIA BACTERIANA AOS ANTIMICROBIANOS
Natural ou intrnseca
Aerbios
Anaerbios aminoglicosdeos
Adquirida
Cromossmica
Mutao de genes
Resistncia
transmitida da
clula-me para
clula-filha
Plasmidial
Transmissvel Resistncia mltipla
Produo: -lactamases,
fosfotransferases,
hidrolases, redutases.
Metronidazol
Quinolonas
Gentica da Resistncia Bacteriana

Opal et al. In Mandell, 2000

Resistncia Bacteriana a
Antimicrobianos
Mecanismo normal:
memb. externa
Porina
peptideoglicano
membrana citoplasmtica
espao periplsmico
B-lactmico
PBP
Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996
Mecanismos de Resistncia
a Antimicrobianos
Alterao do stio de ao
Beta-lactmicos
Glicopeptdeos
Quinolonas
Macroldeos, aminoglicosdeos (alto grau)
Degradao da droga
Beta-lactmicos
Aminoglicosdeos, cloranfenicol
Diminuio da concentrao intra-celular do antimicrobiano
Resistncia a beta-lactmicos de amplo espectro em Gram-
negativos
Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002
Mecanismos de Resistncia a
Antimicrobianos
Alterao do stio de ao
Alto grau de resistncia - altos MICs
Resistncia cruzada a outras drogas da mesma classe

Degradao da droga
Diminuio da concentrao intra-celular do
antimicrobiano
Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002
Alterao do Alvo:
memb. externa
Porina
peptideoglicano
membrana citoplasmtica
espao periplsmico
B-lactmico
PBP
Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996
Mecanismos de Resistncia
a Antimicrobianos
Alterao do stio de ao
Degradao da droga
A bactria produz enzimas que degradam o antimicrobiano
Nveis variados de resistncia: depende da quantidade e
potncia da enzima produzida
Maior variao do perfil de sensibilidade a drogas de uma
mesma classe: Sensibilidade a um -lactmico e resistncia a
outro .
Diminuio da concentrao intra-celular do antimicrobiano
Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002
Produo de enzimas inativadoras:
memb. externa
Porina
peptideoglicano
membrana citoplasmtica
espao periplsmico
B-lactmico
PBP
B-lactamase
Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996
Mecanismos de Resistncia
a Antimicrobianos
Degradao da droga
Alterao do stio de ao
Diminuio da concentrao intra-celular do antimicrobiano
Diminuio da permeabilidade - perda de porinas
Efluxo ativo - Eliminao da droga por bombas dependentes de
energia
Baixo grau de resistncia
No respeita classe de antimicrobianos
Normalmente associado a outros mecanismos
Responsvel pela menor sensibilidade intrnseca de
algumas espcies (BGN-NF)
Lewis et al. Bacterial Resistance to Antimicrobials, 2002
Impermeabilidade da membrana:
memb. externa
Porina
peptideoglicano
membrana citoplasmtica
espao periplsmico
B-lactmico
PBP
Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996
Efluxo ativo
Scand J Infect Dis Suppl 101:33-43, 1996
Resistncia mediada por efluxo ativo
Eliminao da droga por bombas dependentes de energia
Baixo grau de resistncia
Normalmente associado a outros mecanismos
No respeita classe de antimicrobiano: resistncia cruzada
aleatria
Resistncia intrnseca
CLINICAL LABORATORY STANDARDS INSTITUTE
(CLSI ANTIGO NCCLS)
Organizao internacional,
interdisciplinar e educacional
que promove o desenvolvimento
e a ampla utilizao de normas e
procedimentos laboratoriais
padronizados.
A subcomisso do CLSI
composta de representantes de
profisses, do governo e
indstria, incluindo laboratrios
de microbiologia, educadores,
farmacuticos, etc.










Recomendaes na escolha dos antimicrobianos
Padronizao das tcnicas
Critrios para a interpretao dos resultados
Parmetros para o controle qualidade do teste.
CLINICAL LABORATORY STANDARDS
INSTITUTE (CLSI)
Avaliao da Sensibilidade
Enterobactrias
gar Meller-Hinton
Inculo mtodo de crescimento e suspenso direta
Incubao 35 2
o
C em atm. ambiente
Leitura 16 a 18h
Controle de qualidade E.coli ATTC* 25922
E.coli ATTC* 35218

CLSI , M100-S15 tabela 2A, 2005
Enterobactrias
AMICACINA
AMPICILINA
AMPICILINA/Sulbactam
AZTREONAM
CEFALOTINA
CEFEPIMA
CEFTAZIDIME
CEFOXITINA
CEFTRIAXONA
CIPROFLOXACINA
GENTAMICINA
IMIPENEM
PIPERACILINA/Tazobactam
SULFA/TRIMET
TICARCILINA/c.clavulnico
Cefotaxima
Meropenem
Levofloxacina
Amoxacilina
Amoxacilina/c.clavulnico
CLSI, M100-S15 Tabela 2A, 2005
6
2
30 mm
7 8
9
25-30 mm
1
3
4
1- AMPICILINA
2- AMOXACILINA/C. Clav.
3- PIPERACILINA/TAZ.
4- CEFALOTINA
5- CEFOXITINA
6- CEFOTAXIMA/CEFTRIAXONA
7- CEFTAZIDIMA
8- CEFEPIMA
9- IMIPENEM
10- CIPROFLOXACINA
11- SMX/TMP
12- AMICACINA
Enterobactrias
Sugesto para o antibiograma
5
10
12
11
AMPC / ESBL
CESP
Cromossmica
Induzvel
Cefoxitina R
Hidrolizam: aztreonam,
cefalosporinas ( 1,2, 3),
e penicilinas;
No so inibidas por
inibidores -lactamases ;
Carbapenens e cefepima.
E. coli, K pneumoniae, K.
oxytoca e P. mirabilis
Plasmidial
Cefoxitina S
Hidrolizam: aztreonam,
cefalosporinas ( 1, 3 e 4)
e penicilinas;
Inibidas por inibidores de -
lactamases;
Carbapenens.
Teste de induo de-lactamases
do Grupo 1 (AmpC)


DETECO DE AMOSTRAS
PRODUTORAS DE ESBL
Disco -aproximao
Helio Sader - LEMC
Avaliao da Sensibilidade
P. aeruginosa, Acinetobacter spp.,
S. maltophilia B. cepacia
gar Meller-Hinton
Inculo mtodo do crescimento ou suspenso direta
Incubao 35 2
o
C em atm. ambiente
Leitura 16 a 18h / 20 a 24h
Controle de qualidade Ps. aeruginosa ATTC* 27853
E.coli ATTC* 35218
E.coli ATTC*25922

CLSI , M100 - S15 tabela 2B, 2005
Pseudomonas aeruginosa /
Acinetobacter spp.
Sugesto para o antibiograma
1- AMPICILINA/SULBACTAM
2- PIPERACILINA/TAZOBACTAM
3- AZTREONAM
4- CEFTAZIDIMA
5- CEFEPIMA
6- IMIPENEM
7- MEROPENEM
8- POLIMIXINA
9- AMICACINA
10- CIPROFLOXACINA
11- MINOCICLINA
12- SULFAMETOXAZOL/TRIMETOPRIM
Pode ser reportado quando a
cepa for resistente.
Utilizado somente para
Acinetobacter spp
Avaliao da Sensibilidade
Stenotrophomonas maltophilia
Sulfametoxazol Trimetoprim
Levofloxacina
Minociclina

CLSI - M100-S15 Tabela 2B, 2005
Disco-Difuso
Avaliao da Sensibilidade
Burkholderia cepacia
Disco-Difuso
Ceftazidima
Meropenem
Minociclina
Sulfametoxazol Trimetoprim
NCCLS 2005 - M100-S15 Tabela 2B
Surgimento de Resistncia
Combinaes Antibiticos / Organismos

ORGANISMOS ANTIBITICOS

P. aeruginosa

Terapia antimicrobiana prolongada
com qualquer antimicrobiano.

B. cepacia





Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
NCCLS 2005 - M100-S15 Tabela 2B



ORGANISMOS ANTIBITICOS

Enterobacter, Citrobacter, Todas as cefalosporinas de
Serratia,Morganella 3 gerao.


Serratia marcescens Netilmicina, tobramicina,
amicacina e kanamicina.


E. coli, K. pneumoniae ESBL + Cefamicinas





Livermore J Antimicrob Chemother 48(Suppl S1) 87-102, 2001.
Surgimento de Resistncia
Combinaes Antibiticos / Organismos
SUGESTES PARA VERIFICAO DO
TESTE DE SENSIBILIDADE E
IDENTIFICAO DO MICRORGANISMO
ORGANISMOS FENTIPO INCOMUM

Enterobacteriaceae Carbapenem R ou I
C. freundii Ampicilina, Cefalotina S
Enterobacter spp Ampicilina, Cefalotina S
Serratia marcescens Ampicilina, Cefalotina S
Klebsiella spp Ampicilina S
Proteus vulgaris Ampicilina S
Providencia spp Ampicilina S
S. maltophilia Carbapenem S e SMX/TMP R
P. aeruginosa e Polimixinas R
Acinetobacter spp.



MUITO OBRIGADA
efrigatto@ig.com.brl.com