UNIVERSIDAD NORBERT WIENER METABOLISMO MICROBIANO AUTTROFOS Y HETERTROFOS Dependiendo de la naturaleza de las sustancias que deben obtener de sus alrededores para satisfacer sus necesidades metablicas se clasifican en :Auttrofos y Hetertrofos.
Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 118 Figura 1: El metabolismo en las bacterias comprende dos grandes tipos de reacciones:
ANABOLISMO (Biosntesis): Proceso en el que se usa la energa y el poder reductor procedente de las reacciones de mantenimiento ( catabolismo ) para formar macromolculas y constituyentes celulares a partir de compuestos simples.
CATABOLISMO: Reacciones de mantenimiento que suministran: Energa, Poder reductor y Precursores metablicos, transformando sustancias complejas en simples.
Las bacterias requieren aporte continuo y acceso inmediato a la energa que ser usada en : - Biosntesis - Transporte activo - Translocacin de protenas a travs de la membrana citoplasmtica - Movimiento flagelar. METABOLISMO MICROBIANO ANABOLISMO Y CATABOLISMO
Brock, T., Madigan, M., Martinko, J and Parker, J., Biology of Microorganisms, 7 th ed., Prentice Hall, Englewood Cliffs, 1994, p. 90 METABOLISMO MICROBIANO ANABOLISMO Y CATABOLISMO METABOLISMO MICROBIANO ANABOLISMO Y CATABOLISMO Para llevar a cabo las reacciones qumicas necesarias para la vida y transformar los nutrientes la clula produce una serie de catalizadores biolgicos de naturaleza proteica ENZIMAS quienes actan especficamente sobre los sustratos formando el complejo Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 120 METABOLISMO MICROBIANO ENZIMAS Enzima sustrato.
En su ausencia estas reacciones serian insignificantes o se produciran a velocidades mucho menores. Figura 2:
a) Naturaleza qumica: Son protenas. La accin enzimtica requiere la presencia de sustancias no proteicas: Los cofactores - Los cofactores pueden ser inorgnicos como Fe ++. Mg++, Mn++. Zn++ - Los cofactores pueden ser molculas. orgnicas y se denominan Coenzima. - Grupos prostticos.- Unin de cofactores y coenzimas covalentemente a la enzima - Haloenzima.- Enzima unida a su grupo prosttico - Apoenzima.- Es la parte proteica de una haloenzima.
b) Especificidad: Cataliza un slo tipo de reaccin
c) Concentracin.- En concentraciones muy bajas y no se consumen en las reacciones bioqumicas.
d) Condiciones que afectan la funcin enzimtica.- Son pH, temperatura, e inhibidores. METABOLISMO MICROBIANO ENZIMAS: PROPIEDADES ENZIMAS ALOSTRICAS.- Cuando un inhibidor se une en el sitio alostrico la estructura de la enzima cambia de tal manera que el sustrato ya no se une eficientemente en el sitio activo.
METABOLISMO MICROBIANO ENZIMAS: REGULACIN a) Regulacin de la actividad de la E sintetizada (E. alostricas). b) Regulacin de la expresin gnica (cantidad de E. sintetizada).
INHIBICION POR EL PRODUCTO FINAL O RETROINHIBICION El producto terminal en la va biosinttica. (Inhibidor alostrico) inhibe la actividad de la primera enzima, en esta va lo que disminuye es el flujo de metabolitos a lo largo de la ruta. Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 123 Figura 3: METABOLISMO MICROBIANO MECANISMOS DE OBTENCIN DEL ATP 1.- Fosforilacin a nivel de sustrato.- El ATP se forma a partir de ADP por transferencia de un grupo fosfato de alta energa de un intermediario de una ruta catablica.
2.- Fosforilacin oxidativa.- ( Transporte de electrones ) La sntesis de ATP esta catalizada por una enzima la ATP fosfohidrolasa ( ATP asa ) que cataliza la conversin del ADP a ATP a travs de procesos qumicos a nivel de membrana plasmtica.
Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 133 METABOLISMO MICROBIANO MECANISMOS DE OBTENCIN DEL ATP Figura 4: Los procesos metablicos fermentativo, respiratorio, y autotrfico son las formas principales de produccin de energa de una bacteria
A. Fosforilacin a nivel de sustrato: Metabolismo fermentativo Las fermentaciones se dan en determinados m.o anaerobios obligados o facultativos
En este metabolismo los compuestos orgnicos sirven como donadores y aceptores de electrones, la gluclisis rinde 2 moles de ATP por cada mol de glucosa fermentada frente a los 38 moles de ATP por mol de glucosa en la respiracin aerbica. Esto significa que para que crezca el m.o. anaerobio, este debe degradar gran cantidad de sustrato fermentable.
Hay gran variedad de fermentaciones microbianas as tenemos: A.1. Fermentacin lctica (lactato) A.2. Fermentacin alcohlica (Etanol, CO 2 ) A.3. Fermentacin butilenglicolica (Butilenglicol, CO 2 ) A.4. Fermentacin cido mixta (etanol, succinato, acetato, formiato, CH4 ,lactato, CO 2 ) METABOLISMO MICROBIANO METABOLISMO ENERGTICO DE LAS BACTERIAS (MEB): MECANISMOS DE TRANSMISIN DE ENERGIA Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 127 METABOLISMO MICROBIANO METABOLISMO ENERGTICO DE LAS BACTERIAS (MEB) Figura 5: A.2 Fermentacin cido homolctica Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 127 METABOLISMO MICROBIANO METABOLISMO ENERGTICO DE LAS BACTERIAS A.1 Fermentacin alcohlica Figura 6a: Figura 6b:
B. Fosforilacin oxidativa.-
B.1 Metabolismo respiratorio
Respiracin es la obtencin de energa por oxidacin de sustratos orgnicos o inorgnicos las coenzimas reducidas transfieren los electrones a un aceptor final oxidado, no directo sino a travs de una cadena transportadora de electrones.
1.-Si el aceptor final es el O 2 hablamos de respiracin aerbica Estas bacterias necesitan O 2 para crecer ya que lo usan como aceptor final de electrones, estos aceptores se ubican dentro de la membrana bacteriana Los elementos principales del sistema de transporte de e- son los citocromos (hemoprotenas ) flavoprotenas y ubiquinonas ( Coenzima Q)
2.- Si el aceptor final es distinto al O 2 tenemos respiracin anaerbica Crecen en ausencia de O 2 y usan aceptores finales distintos al oxigeno o tienen metabolismo estrictamente fermentable y pueden ser:
-Anaerobios estrictos .- El O 2 les resulta txico,carecen de catalasa o peroxidasa por lo que no pueden eliminar los productos txicos resultantes. -Anaerobios aerotolerantes.- Soportan el O 2 debido a que tienen enzimas destoxificadoras. -Anaerobios facultativos,.- Pueden realizar metabolismo energtico aerobio o anaerobio.
METABOLISMO MICROBIANO MECANISMOS DE TRANSMISIN DE ENERGA (M.E.B)
B.2 Metabolismo autotrfico
- Las bacterias utilizan una variedad de fuentes inorgnicas alternativas para obtener energa y fuerza reductora.
- En la fotosntesis las bacterias utilizan la luz como energa y convierten el CO 2 en triosa fosfato y otros componentes celulares.
- En la respiracin anaerbica las bacterias utilizan sustratos inorgnicos en lugar de O 2 como receptores terminales de electrones.
METABOLISMO MICROBIANO MECANISMOS DE TRANSMISIN DE ENERGA (M.E.B) METABOLISMO MICROBIANO RUTAS BIOQUMICAS CATABLICAS (R.B.C) CATABOLISMO DE HIDRATOS DE CARBONO
El catabolismo de la glucosa (Gluclisis) puede darse por cuatro vas diferentes: la ruta de Embden-Meyerhof (EM), la ruta de las pentosas Fosfato (PF), la ruta de Etner-Doudoroff (ED) y la ruta de la Fosfocetolasa o de Warburg-Dickens (WD).
CATABOLISMO DE LIPIDOS.- Beta-oxidacin de cidos grasos.
CATABOLISMO DE PROTEINAS.- Desaminacin.
Ruta de Embden Meyerhoff (EM): Comn en todo tipo de organismos incluyendo hongos, levaduras y varios tipos de bacterias. A) Se usan 2 ATP para fosforilar una molcula de glucosa,y romperla en dos compuestos. B) Las dos molculas resultantes de 3C se oxidan y dan lugar a dos molculas de ac.pirvico. C) Dan lugar tambin a dos mol. de NADH (+), H (-) y 4 ATP por fosforilacin a nivel de sustrato. D) Se observa que hay una ganancia de 2 ATP por cada molcula de glucosa.
Ruta de la pentosa fosfato (PF):Presente en muchas bacterias y en los eucariotes. A) Comienza con un intermediario de la gluclisis: glucosa 6 fosfato. B )Se producen 3 CO 2 y gliceroaldehido 3-P el cual puede volver a la gluclisis. C) Los precursores formados sirven para la sntesis de aminocidos( Phe, Tir, Trp) y nucletidos. D) Se producen 2NADPH que se pueden usar para sintetizar 4 ATP. E) No se produce ATP.
Ruta de Etner-Doudoroff (ED): Utilizada por un grupos reducido de microorganismos carentes de la ruta EM (bacterias Gram-negativas como Pseudomonas, Rhizobium, Xhantomonas, Azotobacter)
Ruta de la Fosfocetolasa o Warburg-Dickens (WD): Ruta de bacterias lcticas (Lactobacillus y Leuconostoc)
METABOLISMO MICROBIANO R.B.C: CATABOLISMO DE HIDATOS DE CARBONO GLUCLISIS Figura 7: Berg, J; Tymoczko, J and Stryer, L., Biochemistry, 5 th ed., W. H. Freeman, New York, 2002, p. 395 CATABOLISMO DE ACIDOS GRASOS
Los m.o. producen enzimas denominadas Lipasas que descomponen las grasas en glicerol y ac.grasos.
Triglicridos + Agua------> Glicerol + c. grasos
Muchos m.o. convierten el glicerol en dihidroxiacetona que va al ciclo de Krebs.
Los ac,grasos se catabolizan mediante la beta-oxidacin esta cadena se escinde de 2 en 2 y se transforma en acetil Co-A y entra al ciclo de Krebs. METABOLISMO MICROBIANO RUTAS BIOQUMICAS CATABLICAS Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 136 Cadenas de cidos Grasos 3 H 2 O A la gluclisis Beta- Oxidacin Beta-Oxidaciones sucesivas Al ciclo de Krebs + G l i c e r o l
G l i c e r o l
Figura 8 :CATABOLISMO DE ACIDOS GRASOS.- Los triglicridos son hidrolizados en glicerol y cidos grasos. El glicerol es separado va la gliclisis. Los cidos grasos son a su vez separados en unidades conteniendo 2 carbonos y dirigidos al ciclo de Krebs, donde sern metabolizados para producir energa adicional.
CATABOLISMO DE PROTENAS
El proceso se llama proteolisis. Se realiza mediante enzimas proteoliticas ,exocelulares, proteosas y peptidasas. Las proteasas escinden las molculas de protenas en molculas ms sencillas.
Proteasas Peptidasas Protenas + H 2 O------->Pptidos-----------> H 2 O + A.A.
*Para ir al ciclo de Krebs estos a.a. deben estar des-aminados y convertidos en NH 4 .
METABOLISMO MICROBIANO RUTAS BIOQUMICAS CATABLICAS Black, J., Microbiology, 7 th ed., J. Wiley and Sons, Hoboken, 2008, p. 136 Figura 9: CATABOLISMO DE PROTENAS.- Los polipptidos son hidrolizados a aminocidos, los cuales a su vez son desaminados y las molculas resultantes son dirigidas al ciclo de Krebs.
-Ruta presente en m.o. aerobios. -Facilita el consumo de O 2 . -Suministra intermediarios para la biosntesis de aminoac., ac, grasos, y bases nitrogenadas. -Dos molculas de cido pirvico se transforma en citrato (6 molculas de C) ( 3 por cada ciclo). -Genera energa en forma de ATP y Coenzimas reducidas como NADH+H y FADH 2 . -Estas coenzimas pueden convertirse en ATP por quimismosis .
METABOLISMO MICROBIANO RUTAS BIOQUMICAS CATABLICAS: CICLO DE KREBS METABOLISMO MICROBIANO R.B.C: CICLO DE KREBS Berg, J; Tymoczko, J and Stryer, L., Biochemistry, 5 th ed., W. H. Freeman, New York, 2002, p. 478 METABOLISMO MICROBIANO CICLO DE KREBS: REACCIONES Berg, J; Tymoczko, J and Stryer, L., Biochemistry, 5 th ed., W. H. Freeman, New York, 2002, p. 479
BIOSNTESIS DE POLISACARIDOS - Glucgeno, peptidoglicano
BIOSNTESIS DE LPIDOS - Lpidos simples
BIOSNTESIS DE AMINOCIDOS -Aminocidos -Transaminaciones