CRECIMIENTO

BACTERIANO
DANTE MAMANI SAIRITUPAC
Magster en Biotecnologa
INTRODUCCIN
DIVISIN CELULAR
DIVISIN CELULAR
DIVISIN CELULAR
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO
CULTIVO CONTINUO
CULTIVO CONTINUO
DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO (MTODOS DIRECTOS)
DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO (MTODOS DIRECTOS)
DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO (MTODOS DIRECTOS)
DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO (MTODOS DIRECTOS)
DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO (MTODOS DIRECTOS)
DETERMINACIN DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO TCNICA DEL NMERO MAS
PROBABLE (MTODOS DIRECTOS)
TCNICA DE FILTRACIN (MTODOS
DIRECTOS)
TCNICA DE FILTRACIN (MTODOS
DIRECTOS)
RECUENTO EN CMARA (MTODOS
DIRECTOS)
RECUENTO EN CMARA (MTODOS
DIRECTOS)
CITMETRO DE FLUJO (MTODOS
DIRECTOS)
MTODOS INDIRECTOS
MTODOS INDIRECTOS
MTODOS INDIRECTOS
MTODOS INDIRECTOS
MTODOS INDIRECTOS
FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO
BACTERIANO
TEMPERATURA
TEMPERATURA
TEMPERATURA
pH
pH
SUSTRATO
SUSTRATO
OXGENO
OXGENO
OXGENO
POTENCIAL DE AGUA
MEDIOS DE
CULTIVO
GENERALIDADES
El crecimiento de
microorganismos en
sustancias alimenticias
artificiales es una de
las tcnicas ms
importantes usadas en
el laboratorio.

GENERALIDADES
Permite reconocer
las caractersticas
culturales de las
bacterias.
A partir de estas se
puede obtener
cultivos puros
GENERALIDADES
MEDIO DE CULTIVO
Conjunto de nutrientes,
factores de crecimiento y
otros componentes.
Se crean condiciones
adecuadas de desarrollo y
reproduccin de manera
artificial.
No existe un medio
universal comn.
Para su ptimo crecimiento es necesario dar condiciones
ambientales adecuadas para su desarrollo en medios
artificiales.
Estas son: temperatura, pH, humedad, presin de
oxgeno, grado de acidez o alcalinidad del medio
Las caractersticas ms importantes de los microorganismos
a ser consideradas al momento de preparar un medio de
cultivo son:
Tipo trfico: auttrofos, hetertrofos, quimiotrofos, fottrofos.
Tipo respiratorio: aerobios, anaerobios, anaerobios
facultativos, microaerfilos.
Temperatura: psicrfilos, mesfilos y termfilos.
pH: acidfilos, neutrfilos, basfilos.

COMPOSICIN QUMICA -
MACROELEMENTOS
FUENTE DE CARBONO:
Pueden ser CO
2
o compuestos carbonados orgnicos.
Se utilizan en la construccin de innumerables molculas
necesarias para la clula.
Los hidratos de carbono se consideran fuente de carbono y
energa.
COMPOSICIN QUMICA -
MACROELEMENTOS
FUENTE DE NITRGENO
Es metabolizado para proveer protenas, cidos nucleicos y
polmeros de pared.
Algunos microorganismos pueden incorporar nitrgeno en
forma de aminocidos, bases purnicas o pirimidnicas.
En ciertos medios de cultivo, el aporte de nitrgeno es
realizado por las peptonas

COMPOSICIN QUMICA -
MACROELEMENTOS
FUENTE DE FSFORO
Se agrega fosfatos de
sodio o potasio.
El fsforo se incorpora a
cidos nucleicos,
fosfolpidos, polmeros de
membrana, ATP, y
sustancias de reserva.

FUENTE DE AZUFRE
Se adiciona como SO
4
,
cistena o metionina.
En la clula se
incorpora a aminocidos
y diferentes coenzimas.

COMPOSICIN QUMICA -
MACROELEMENTOS
FUENTE DE K
+
, Mg
2+
,
Ca
2+
.
Son cationes que estabilizan
macromolculas aninicas.
K
+
acta como coenzima y
estabilizador de RNA.
Mg
2+
se integra a la clorofila
en organismos fotosintticos.
Ca
2+
abunda en esporas
como dipicolinato de calcio.
FUENTE DE Na
Contribuye a equilibrar la
presin osmtica del medio
extracelular.
Se suele suministrar como
NaCl.

COMPOSICIN QUMICA FACTORES
DE CRECIMIENTO
Son compuestos orgnicos requeridos en muy bajas
concentraciones.
No pueden ser sintetizados por la propia clula.
Deben ser agregados al medio de cultivo
Pueden ser aportados en forma de:
Extracto de carne
Extracto de levadura
Extracto de malta

COMPOSICIN QUMICA AGENTES
SOLIDIFICANTES
Su uso es opcional y el ms usado
es el agar.
Se le adiciona en diferentes
concentraciones.
1.5 2 % en medios slidos
0.2 0.3% en medios semislidos
5% en medios de consistencia
firme.
COMPOSICIN QUMICA AGUA
Representa del 80-90% del peso total
de una clula.
Es fundamental para la realizacin de
todos los procesos metablicos,
funciones enzimticas .
Los medios de cultivo se preparan en el
laboratorio con agua destilada.

TEMPERATURA
pH
HUMEDAD
PRESIN
OSMTICA
LUZ
CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO
Composicin
Finalidad
POR SU COMPOSICIN
MEDIOS LQUIDOS
Llamado tambin caldo.
USO:
diluciones
homogenizar mezclas
enriquecer cultivos
rehidratar cepas
liofilizadas.
POR SU COMPOSICIN
MEDIOS SLIDOS
Llamado tambin agar.
Se le aade 2% de agar.
En cajas petri o en tubos
USO:
Para separar
microorganismos
Para favorecer el
desarrollo de colonias
aisladas
POR SU COMPOSICIN
MEDIOS SEMISLIDOS
Consistencia leve o
gelatinosa.
Medio lquido al que se
adiciona agar (0.4 a 0.8%).
USO:
Para determinar la
movilidad de los
microorganismos
microaerfilos.

POR SU FINALIDAD:
MEDIO COMN
Contiene los nutrientes
mnimos necesarios para
el desarrollo de bacterias
poco exigentes: caldo
comn, caldo carne, etc.
POR SU FINALIDAD
MEDIO DE
ENRIQUECIMIENTO
Son medios lquidos
que favorecen el
crecimiento de un tipo
de microorganismo en
particular.
Permite aumentar el
nmero de
microorganismos de
ese tipo.
POR SU FINALIDAD
MEDIO
ENRIQUECIDO
Se le agrega una
sustancia que
aumenta el poder
nutritivo.
Aporta algn factor de
crecimiento necesario
para el
microorganismo que el
medio no lo posea.
POR SU FINALIDAD
MEDIO SELECTIVO
Favorece el crecimiento de
un grupo de
microorganismos e inhiben
el crecimiento de otros.
tiles en muestras mixtas.
Al medio se le adiciona
sustancias inhibitorias
como antibiticos o ciertos
colorantes.
POR SU FINALIDAD
MEDIO
DIFERENCIAL
Permite diferenciar
bioqumicamente a
las bacterias por su
actividad metablica.
Revela
caractersticas
fisiolgicas de los
microorganismos.
POR SU FINALIDAD
MEDIO
SELECTIVO
DIFERENCIAL
Contiene sustancias
inhibidoras y
sustancias
diferenciales.
El medio Sal Manitol
para
Staphylococcus
POR SU FINALIDAD
MEDIO DE
TRANSPORTE
Medio lquido o
semislido.
Permite el
mantenimiento de
muestras clnicas
Contiene agua y
amortiguadores del
pH.
PREPARACIN MEDIO DE CULTIVO
Pesar Aadir agua Someter a
bao mara
Colocar en
cajas petri o
tubos
SIEMBRA Y
AISLAMIENTO
INTRODUCCIN
SIEMBRA
Es la incorporacin a un medio
de cultivo de una muestra
(inculo), con propsitos
cuantitativos o cualitativos.
Siembra en placa:
Por estra
Por inclusin
Por extensin
Siembra en tubos:
Con agar inclinado
Con medio slido horizontal
Con medio semislido
Con medio lquido


SIEMBRA POR ESTRIA
Se inocula la muestra sobre un extremo de la placa con un ansa y se
extiende formando estras sobre la superficie en varios sentidos, cada
clula aislada se multiplicar formando una colonia independiente, cada
colonia representa un cultivo puro.

SIEMBRA POR EXTENSIN
Se extiende el inculo
uniformemente con una
varilla acodada estril
por la superficie del
medio de cultivo.
Las clulas
diseminadas sobre la
superficie formarn
colonias aisladas.

SIEMBRA POR INCLUSIN
Se extiende el inculo uniformemente con una varilla acodada
estril por la superficie del medio de cultivo.
Las clulas diseminadas sobre la superficie formarn colonias
aisladas.

SIEMBRA EN TUBOS
AISLAMIENTO
Obtener un cultivo puro de un microorganismo a partir de un cultivo
mixto.
Obtencin de colonias aisladas que pueden ser de forma y tamao
variable dependiendo del organismo, las condiciones de cultivo,
suministro de nutrientes y otros parmetros fisiolgicos.

REPIQUES
Hacer crecer el microorganismo en un medio de cultivo dado para conocer
su metabolismo, su produccin de pigmentos o simplemente conservarlo.
Transferencia de cultivos microbianos de medio slido a slido, de medio
slido a medio lquido, de medio lquido a lquido y de medio lquido a
medio slido.

SE PUEDE AISLAR CUALQUIER
MICROORGANISMO?
ECOLOGA
BUCAL
ECOLOGA MICROBIANA
La salud y la enfermedad son
determinadas por interacciones
complejas entre muchos y diversos
factores:
Microbianos, del hospedero y ambientales
Entender estas interacciones puede
facilitar la comprensin de la salud y la
enfermedad: educacin dental y
diagnstico, prevencin y tratamiento
de enfermedades bucales

ECOLOGA MICROBIANA
Avances en tcnicas moleculares han
permitido apreciarla diversidad de la
microbiota humana, la extensin de sus
interacciones con el hospedero humano, y
cmo se relaciona con las variaciones
entre individuos.
Intervencin del clnico en la prevencin
de enfermedades endgenas: slo cuando
se reconozca que la ecologa es la clave
de las relaciones hospedero-simbionte
(comensalismo mutualismo
parasitismo).
ECOLOGA MICROBIANA
Necesitamos saber cmo contribuir seleccionar los
microbios cuya interaccin resulte en salud ms que en
enfermedad: mirarla anfibiosis desde una perspectiva
ecolgica.
La saludo la enfermedad bucal, es un estado que resulta
de la adaptacin microbiana a las condiciones que
prevalecen en un momento dado, en un individuo o sitio
dado.
El desarrollo de la placa bacteriana no debe ser pensado
como un proceso gnerico, sino como un proceso
altamente individualizado, lo cual tiene consecuencias
para el tratamiento de las enfermedades que causa.
ECOLOGA MICROBIANA
Comprender el proceso de cambio que
resulta en caries en la niez temprana,
en EP crnica, en candidiasis o
infeccin pulpar, capacitar para
desarrollar estrategias holsticas para
su prevencin.