El laboratorio nos ayuda a conocer el

agente etiolgico.
Las enfermedades por bacterias son
frecuentes por lo tanto sus estudios son
los ms usados.
Metodologa de la toma de la muestra.
Se usa desde la tincin hasta la
genotipificacin.
Kumate- Gtz, Infectologa clnica, 17ma edicin, Mndez Editores, Mxico, DF (2008) Cap. 8 Laboratorio en el diagnstico de
enfermedades infecciosas
La ms utilizada es la tincin de Gram
Ziehl- Neelsen y Kinyoun (carbol fucsina)
Carbol glicerol, permanganato de potasio se necesita
microscopio de luz ultravioleta.
Tinta china hongos (Cryptococcus neoformans)
Hidrxido de potasio hongos en uas y cabello.
Blanco de Calcoflor polisacridos de la pared de
hongos filamentosos y levaduriformes.
Kumate- Gtz, Infectologa clnica, 17ma edicin, Mndez Editores, Mxico, DF (2008) Cap. 8 Laboratorio en el diagnstico de
enfermedades infecciosas
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enfermedades infecciosas

Histopatologa. Esfrula con endosporas. Tincin calcofluor. De: Mercy Hosp Toledo OH/Brian J. Harrington
Histopatologa. Esfrula con endosporas. Tincin calcofluor. De:
Mercy Hosp Toledo OH/Brian J. Harrington
Dermatofitos, tincin de hidrxido de
potasio
Mycobacterias, Tincin de Ziehl- Neelsen
criptosporidiosis, Tincin de Kinyoun
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enfermedades infecciosas
Fundamento
Inmunoensayo
Ag - Ac
Mtodos ms usados
Contrainmunoelectroforesis
Inmunofluorescencia
Prueba de aglutinacin con ltex
Coaglutinacin
Ensayo inmunoenzimtico (ELISA)
Kumate-Gutirrez. El laboratorio en el diagnstico de enfermedades infecciosas. Infectologa clnica 17 edicin, 2008.
Kumate-Gutirrez. El laboratorio en el diagnstico de enfermedades infecciosas. Infectologa clnica 17 edicin, 2008.
LCR, esputo, orina, suero, lquido sinovial
Detecta nanogramos
Requiere cantidades pequeas
del especmen clnico
Capa delgada de gel de agarosa 1%.
Se realizan dos pozos paralelos a una
distancia de 3-4mm.
En un pozo se coloca la muestra y en otro
el anticuerpo vs el antgeno que se desea
detectar.
Se pasa una corriente a travs del gel.
Voltaje constante por 30-60 min.
Las cargas del Ag ctodo, el Ac
nodo.
Si hay reaccin Ag-Ac: Se visualiza una
banda de precipitacin entre ambos pozos.
Tcnica
Kumate-Gutirrez. El laboratorio en el diagnstico de enfermedades infecciosas. Infectologa clnica 17 edicin, 2008.

Se utilizan partculas de ltex
cubiertas con Acs
especficos.
La muestra se coloca en laminillas y se le
agrega la suspensin de ltex.
Se realizan movimientos rotatorios por 3-10
minutos.
Si hay reaccin Ag- Ac, se observar
aglutinacin macroscpica: prueba positiva.
COAGLUTINACIN. Se utiliza una sepa de S.
aureus productor de protena A (cepa Cowan)
que son cubiertos por Acs especficos.
Tcnica
Kumate-Gutirrez. El laboratorio en el diagnstico de enfermedades infecciosas. Infectologa clnica 17 edicin, 2008.
Identificacin de complejos Ag-Ac mediante el
empleo de enzimas.
Enzyme-Linked
Immunosorbent Assay
Sobre una fase slida (nitrocelulosa,
poliestireno, perlas de plstico o microtubos)
son fijados los anticuerpos.
Se agrega la muestra pretratada y se
incuba.
Se agrega un segundo anticuerpo con una
enzima (peroxidasa) dirgido vs el antgeno, se
incuba y se lava otra vez.
Se agrega el sustrato de la enzima y se
produce un cambio de color macroscpico o
puede medirse con espectrofotmetro.
Principios bsicos
Kumate-Gutirrez. El laboratorio en el diagnstico de enfermedades infecciosas. Infectologa clnica 17 edicin, 2008.
La inmunofluorescencia es una tcnica de inmunomarcacin que hace uso de
anticuerpos unidos qumicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la
presencia de una determinada molcula, en un microorganismo o tejido.
Kumate- Gtz, Infectologa clnica, 17ma edicin, Mndez Editores, Mxico, DF (2008) Cap. 8 Laboratorio en el diagnstico de
enfermedades infecciosas, www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/inmunoquimica.pdf

El anticuerpo
marcado se hace
reaccionar contra un
preparado biolgico
Exposicin de la
muestra a una
fuente de luz de
onda corta
(ultravioleta o azul)
seleccionada.
La luz emitida puede ser
cuantificada con facilidad por
microscopia de fluorescencia
en preparados histolgicos
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enfermedades infecciosas.
www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/inmunoquimica.pdf
Unin Molcula
fluorescente a un
anticuerpo.
Isotiocianato de
fluorescena.
REACCIN DE
POSITIVA:
Acoplamiento de
Ag-Ac produciendo
una fluorescencia.
UTILIDADES:
CLNICA:
ETS, influenza, dengue,
etc.
INVESTIGACIN
VENTAJAS
- Se pueden obtener resultados
rpidos.
-No es necesario realizar cultivos.
-Se puede identificar microorganismos
especficos en un grupo mixto.
-Determina la identidad de un
organismo muerto.
DESVENTAJAS
-Costos en reactivo y equipo
-Debe ser realizado por
personal muy especializado.

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enfermedades infecciosas, www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/inmunoquimica.pdf

puede ser utilizada en cortes de tejidos,
lneas celulares cultivadas, clulas
individuales y secreciones con la
finalidad de analizar la presencia y
distribucin de protenas, glcidos y
molculas sobre el tejido.
INMUNOFLUORESCENCIA
DIRECTA:
Esta se vale de un Ac
primario marcado con un
fluorocromo( flurescena),
que reacciona con el
antgeno dentro de la
muestra.
Kumate- Gtz, Infectologa clnica, 17ma edicin, Mndez Editores, Mxico, DF (2008) Cap. 8 Laboratorio en el diagnstico de
enfermedades infecciosas
El anticuerpo reconoce la
molcula diana y se une a ella
directamente.

Ventajas:
Es rpida.
Poca sensibilidad.
Kumate- Gtz, Infectologa clnica, 17ma edicin, Mndez Editores, Mxico, DF (2008) Cap. 8 Laboratorio en el diagnstico de
enfermedades infecciosas
Kumate- Gtz, Infectologa clnica, 17ma edicin, Mndez Editores, Mxico, DF (2008) Cap. 8 Laboratorio en el diagnstico de
enfermedades infecciosas
INMUNOFLUORESCENCIA
INDIRECTA:
Hace uso de dos
anticuerpos; el anticuerpo
primario es el que reconoce
y se une a al molcula diana,
mientras que el secundario
que es el que se encuentra
marcado con el fluorforo,
reconoce al primario y se
une a l.

Kumate- Gtz, Infectologa clnica, 17ma edicin, Mndez Editores, Mxico, DF (2008) Cap. 8 Laboratorio en el diagnstico de
enfermedades infecciosas
Es un examen de laboratorio solicitado con mucha frecuencia al que el clnico se
enfrenta desde la valoracin de un sujeto hasta el seguimiento de enfermedades
hematolgicas y no hematolgicas
Hemograma o citometra hemtica (CH).
Serie roja
Serie blanca
Serie tromboctica
Estudio de tres lneas celulares
Fisiolgicos. Edad, embarazo, actividad fsica, clima y localizacin geogrfica.
Patolgicos. Procesos inflamatorios, metablicos, neoplsicos, infecciosos.
Valores alterados
RUZ ARGELLES G RUIZ REYES G. INTERPRETACIN DE LA CITOMETRA HEMTICA. NDICES Y PARMETROS. FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA 3 e.
EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Depender de factores como: edad, peso, hbito
tabquico, etc.
Leucocitosis > 12 000 y Leucopenia < 4 000 L
Etiologa
Errores bajo citometra de flujo: fragilidad leucocitaria
(frmacos inmunosupresores o citotxicos), formacin
de agregados.
Leucocitos totales 4000 12 000 /L

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EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Clula (%) Lmites absolutos
Leucocitos totales
Neutrfilos
Eosinfilos
Basfilos
Monocitos
Linfocito

40 -85
0 -7
0 -3
1 -13
12 - 46
4 000 12 000 L
1 500 7 000
<100 200
< 10 20
100 800
1 000 4 200
Leucocitos Leucocitosis > 12 000/L

RUZ ARGELLES G RUIZ REYES G. INTERPRETACIN DE LA CITOMETRA HEMTICA. NDICES Y PARMETROS. FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA 3 e.
EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Causas de leucocitosis
Infecciones agudas



Intoxicaciones
Hemorragia aguda
Hemlisis
Padecimientos mielo o linfoproliferativos
Necrosis tisular
Condiciones fisiolgicos
Localizadas: Neumonas, meningitis, abscesos,
amigdalitis, apendicitis.
Generalizadas: Fiebre reumtica aguda,
septicemia, clera, endocarditis infecciosa.
Metablicas: uremia, etc. Otras: veneno de
arcnidos,etc


Leucemias crnicas, policitemia vera
IAM, quemaduras
Ejercicio, trabajo de parto, menstruacin.
Causas de leucopenia
Infecciones agudas




Frmacos
Radiacin
Otros
Bacterianas: Septicemia, TB miliar, tifoidea,
brucelosis, rickettsias (tifo).
Paludismo
Virales: Mononucleosis infecciosa, hepatitis,
influenza, parotiditis.
Sulfonamidas, analgsicos, mielosupresores.

LES, AR, Insuficiencia renal, shock anafilctico.
Leucocitos Leucopenia > 4 000/L

Neutropenia: < 1 500 L
Neutrofilia > 7 000 L. Relacionada a incremento de
bandas
Bandemia: > 800 L
Causas iguales a las sealadas para leucocitosis.
Leucoblastosis. Leucocitosis + Bandas
Leucoeritroblastosis: Leucistosis + Bandas + Blastos
SR.
Neutrfilos 1 500 7 000 /L

RUZ ARGELLES G RUIZ REYES G. INTERPRETACIN DE LA CITOMETRA HEMTICA. NDICES Y PARMETROS. FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA 3 e.
EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Causas de leucoblastosis /leucoeritroblastosis
Infecciosas


Quemaduras
Eclampsia
Envenenamientos
Hemlisis aguda
Hemorragia aguda
Ca metastsico a MO
Endocarditis infecciosa
Neumona
Leptospirosis

Causas de neutropenia
Infecciosas


Bacterianas: Septicemia, TB miliar,
tifoidea, brucelosis, rickettsias (tifo).
Paludismo
Virales: Mononucleosis infecciosa,
hepatitis, influenza, parotiditis.
Sulfonamidas, analgsicos,
mielosupresores.

Causas de neutrofilia
Infecciosas


Localizadas: Neumonas,
meningitis, abscesos, amigdalitis,
apendicitis.
Generalizadas: Fiebre reumtica
aguda, septicemia, clera,
endocarditis infecciosa.

Lo ms comn es encontrar Eosinofilia: >0.5 x 10^9/L
Eosinopenia, trmino poco usado porque se acepta
que no haya eosinfilos en una cuenta normal de
leucocitos.
Eosinfilos <100 200 /L
RUZ ARGELLES G RUIZ REYES G. INTERPRETACIN DE LA CITOMETRA HEMTICA. NDICES Y PARMETROS. FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA 3 e.
EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Causas de eosinofilia
Parasitosis

Otras enfermedades infecciosas
Enfermedades alrgicas
Gastrointestinales
Hematolgicas
Triquinosis, ascaridiasis, toxocariasis, oxiuros
(raro)
Escarlatina
Asma, fiebre del heno, urticaria
Gastroenteritis eosinoflica, CUCI
Sndrome hipereosinoflico, leucemia mieloide
crnica, policitemia vera, Hodgkin
Basofilia
Basfilos < 10 20 /L
RUZ ARGELLES G RUIZ REYES G. INTERPRETACIN DE LA CITOMETRA HEMTICA. NDICES Y PARMETROS. FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA 3 e.
EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Causas de basofilia
Infecciosas
Otras
Rara (varicela, sarampin)
Leucemia mieloide crnica, policitemia vera,
metaplasia mieloide, Hodgkin, anemia
hemoltica, sinusitis crnica, esplenectoma,
etc.
Monocitosis >500 - 800 /L
Monocitos 100 - 800 /L
RUZ ARGELLES G RUIZ REYES G. INTERPRETACIN DE LA CITOMETRA HEMTICA. NDICES Y PARMETROS. FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA 3 e.
EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Causas de monocitosis
Infecciosas


Otras
TB, paludismo, endocarditis infecciosa,
brucelosis, tripanosomiasis, rickettsiasis
Virales: VVZ, CMV
Leucemias, Hodgkin, linfomas, recuperacin
de dao medular por radiaciones o
medicamentos,kala azar, CUCI.
Linfopenia < 1 500 /L
Linfocitosis > 4 000 /L
Linfocitos 1 000 4 200 /L

RUZ ARGELLES G RUIZ REYES G. INTERPRETACIN DE LA CITOMETRA HEMTICA. NDICES Y PARMETROS. FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGA 3 e.
EDITORIAL PANAMERICANA, 2004.
Causas de linfocitosis
Infecciosas



Otras

Virales: Varicela, tos ferina,
mononucleosis infecciosa,
hepatitis, parotiditis, rubela,
CMV.
Otros agentes: TB, brucelosis,
sfilies, toxoplasmosis.
Leucemia linftica, tirotoxicosis,
linfomas.
{
Es el proceso de
crecimiento de m.o.
mediante la toma de
bacterias de un sitio de
infeccin por mtodo de
recoleccin de muestra y
crecimiento en un medio
ambiente artificial.

Facilitar el aislamiento y crecimiento.

Determinar cuales de las bacterias que se desarrollan es ms
probable que sean la causa de infeccin

Desarrollo suficiente para su identificacin y caracterizacin

Debe ser de material del sitio real de
infeccin , con el mnimo de
contaminacin
Establecer los momentos ptimos para la
toma de muestras
Cantidad de muestra suficiente
Utilizacin adecuada de dispositivos de
recuperacin envases para muestras y
medio de cultivo
< INICIO DE ANTIBIOTICOS
2-3 MUESTRAS (85-90%)
BACTEREMIAS
Vol. Requerido:
Adultos 5-10 ml.
Nios 1-2 ml.
RN mantener la proporcin 1:10
MUESTRA
Enriquecidos y suplementados junto con
un anticoagulante (polianetol de sodio)
CULTIVO
CULTIVO DE LQUIDO
CEFALORRAQUDEO
Paciente en decbito lateral o sentado,
con flexin de la cabeza y los muslos
A nivel de L4-L5
3-5 ml. , fraccionado en varis tubos
Citoqumico y citolgico
Aglutinacin con latex
Cultivo
UROCULTIVO
Muestra de chorro medio,
sonda transuretral,
puncin suprapbica y con
bolsa colectora
Realizar aseo amplio con
agua y jabn la zona
periuretral
La muestra debe ser
procesada en 30 minutos
24-48 hr.
CULTIVO DE EXUDADO
FARINGEO
CON SIGNIFICADO CLNICO
S. Pyogenes Haemophilus influenzae
Corynebacterium
diphtheriae
S. Pneumoniae
N. Meningitidis M. Catarrhalis
N. gonorrhoeae S. agalactiae
Muestra tomada con
hisopos estriles e
inocularse en medios de
transporte semislidos
(Stuart)
MEDIO STUART DE TRANSPORTE
Cloruro de sodio 3 g.
Cloruro de potasio 0.2 g.
Fosfato disdico 1.25 g.
Trioglicato de sodio 1 g.
Cloruro de calcio 10 g.
Agar 4 g.
Agua destilada 1 L
Mantener la muestra tan prxima a su estado original como sea posible,
con deterior mnimo, y minimizando el riesgo que afrontan quienes
transportan la muestra, mediante el uso de recipientes hermticamente
cerrados.
Esterilizacin de los medios
Condiciones ptimas de incubacin
Evaluacin de la morfologa de la colonia
Coloracin de Gram y subcultivos
De acuerdo con su funcin y uso. Hay 3 categoras generales de medios:
MEDIOS NO SELECTIVOS:
Crecimiento con gran variedad de m.o., en corto tiempo
Agar sangre, Agar chocolate, Agar Mller-Hinton
MEDIOS SELECTIVOS:
Contienen substancias que buscan inh. la mayora de los m.o.
Agar sal-manitol, Agar MacConkey, Agar sabouraud
MEDIOS DIFERENCIALES:
Agar sangre (efecto hemoltico),Agar salmanitol, Agar
MacConkey (fermentacin lactosa), Agar TSI (Produccin c.
Sulfdrico), MIO
MEDIO COMPONENTES OBJETIVO PRINCIPAL

Agar chocolate
Base de peptona, enriquecida con
una solucin de Hb al 2%
Cultivos de especies de
Haemophilus y especies
patgenas de Neisseria

Agar MacConkey
Gram (+) son inhibidos por el cristal
violeta y sales biliares. Rojo neutro
como indicador
Bacilos entricos gram (-)
fermentadores y no
fermentadores

Agar sangre
Infusin de carne y corazn con 5%
de sangre de carnero
Requerimientos especiales,
reacciones hemolticas

Agar XLD
El desoxicolato de sodio inh. Los
m.o. gram (+); rojo fenol indicador
Especies de Salmonella y
Shigella, de otros bacilos
entrico gram (-) (amarillo)

Agar salmanitol
Base de peptona, manitol y rojo
fenol indicador, sal al 7.5%
Selectivo para estafilococos

Agar SS
Base de peptona con lactosa, rojo
neutro indicador
Salmonella y Shigella
S. aureus
S.
epidermidis
S.
haemolyticus
S.
saprophyticus
Especies de Micrococcus

MEDIOS DE CULTIVOS DE ELECCIN.-
Agar sangre o Agar chocolate
Cultico selectivo: Agar manitol (halo amarillo)
Incubacin a 35 C x 24-48 hr.

COLONIAS
S AUREUS: Medianas-grandes, elevadas, traslucidas;
con pigmento amarillo, la mayora betahemolticas

S. Betahemoltico (pyogenes)
S. Pneumoniae
S. Viridans
Enterococos
( faecalis y fecium

MEDIOS DE CULTIVO.-
Agar sangre de oveja al 5% y agar chocolate
Betahemolisis, es mejor en condiciones anaerbicas

Perodo de incubacin 48 hr

ASPECTO COLONIAS.-
Translucida a opacas; planas, brillantes, ancho estrecho de
betahemlisis
Moraxella catarrhalis
N. gonorrhoeae
N meningitides

MEDIO DE ELECCIN
Agar sangre de carnero al 5%
Agar chocolate
Medios selectivos: Thayer Martin (agar chocolate
+ suplemento y antimicrobianos colistina, nistatina
y vancomicina)

Incubacin a 35-37 C x 72 horas
En una atmosfera hmeda enriquecida en CO2

ASPECTO DE LAS COLONIAS
MC: Grande, no pigmentada o gris, opaca, lisa;
consistencia friable
NG: Pequeas, blanco-grisaceas, convexas,
translcidas, brillantes.
BACILOS GRAMPOSITIVOS
Corynebaterium:
Amycolatum
Auris
diphteriae
Listeria monocytogenes
MEDIOS DE CULTIVO

Agar sangre de carnero al 5%
Agar chocolate
NO agar MacConkey

Incubacin a 35C en 48 hr.-3 das
Color negro gris
Burkholderia pseudomallei
Burkholderia cepacia
Pseudomona aeruginosa
P. alcaligenes
P. fluorescens
P. luteola


MEDIOS DE CULTIVO

Agar sangre de oveja al 5%
Agar chocolate
Agar MacConkey, caldos de los sistemas de hemocultivo

Incubacin a 35 C en CO2 o aire atmosfrico x 24-48 horas >siembra

COLONIAS.- Esparcidas, planas y con bordes dentados , brillo metlico,
colonias betahemolticas, pigmentacin verde azulada
Brucella abortus
Brcella meltensis
B. canis
B. suis

Bacilos cortos o cocobacilos gramnegativos, inmviles y
aerobios; requieren CO2


MEDIOS DE CULTIVO
Sistemas comerciales para hemocultivo (BACTEC, lisis-
centrifugacin)
Incubacin prolongada x 30 das
Atmosfera humidificada con CO2 al 5-10%

ASPECTO COLONIAS.-
Pequeas, convexas, lisas, traslcidas no hemolticas,
amarillo plido
M. tuberculosis
M. tuberculosis
M. Bovis BCG
M. Bovis
M. africanus
M. No tuberculosas
Complejo M. avium
M. Simiae
M. Celatum
M. fortuitum
Bacilos inmviles muy delgados
cido-alcohol resistentes

MEDIO DE CULTIVO.-
Se requiere la combinacin de medios de cultivo slidos
lquidos
SOLIDOS: Lowenstein-Jensen. 35 C en la obscuridad con una
atmosfera con 5-10% de CO2 y humedad elevada x 3-6 semanas
Agar chocolate

LQUIDOS: BACTEC. Atmosfera 5-10% de CO2 x 1 das
Costoso
Mucho tiempo
No siempre se
pueden aislar los
microorganismos
Genotipo
Dx microoganismos de difcil
cultivo
Mycobacterias y Legionella
ID secuencias de DNA
Anlisis de DAN o RNA
Deteccin de segmentos dentro de otros
no especficos
Enzimas de restriccin
DNA varios millones fragmentos
RNA 1/1000
Electroforesis en gel
Hibridacin con sonda para ID mol. inters
ID gen especifico
del
microorganismo
Segmentos
cortos
Iniciadores para
amplificacin
PCR
Hibridacin de
segmentos
complementarios
Segmentos
largos
Sondas
ADN o ARN
Muestras clnicas o Cultivos
In situ en cls. En laminillas en el
microscopio
Comn fijados en formalina y embebidos
en parafina
Southern blot
Ed southern aos 70
Analisis fragmentos de DNA generados
por enzimas de restriccin
Enzima Organismo Sitio de rotura 5 3
Bam HI Bacillus
amyloliquefaciens H
G * GATCC
Eco RI E. Coli RY 13 G * AATTC
HaeIII H aegyptus GG * CC
Hind III H. Influenzae Rd A * AGCTT
Hpa I H. Parainfluenzae GTT * AAC
Pst I Providencia stuartii CTGCA * G
Sma I Serratia marcescens CCC * GGG
Sal I Strptomices albus G G * TCGAC
Enzima de
restriccin
Separacin por
electroforesis
Gel de agarosa Desnaturalizacin
Filtro
nitrocelulosa
(transparencia y
capilaridad)
Incubacin del
filtro
Hibridacin
Exposicin a
rayos X o a
pelcula sensible
a la luz
Aplicacin Organismo
Deteccin directa de muestras clnicas Chlamydia trachomatis
Streptococcus del grupo A
Papilomavirus
Neisseria gonorrhoeae
Confirmacin de cultivos Coccidioides immitis
Haemophilus influenzae
Histoplasma capsulatum
Mycobacterium tuberculosis complex
Listeria monocitogenes
Determinar tamao y abundancia de
mRNA derivado de un determinado gen
No enzimas de restriccin
Longitud por exones
PCR
Alternativa a la clonacin
Miles de millones de copias en pocas horas
Iniciadores especficos de genes cuya
secuencia es conocida
Alta sensibilidad
Reaccin cruzada
1 trepano-inmediato CMV 23S E. Coli
Inhibidores de la polimerasa
PCR
Amplificacin enzimtica de un fragmento
de DNA diana
Desnaturalizacin con calor
Cebadores cadenas complementarias
DNA polimerasa 2 nuevas cadenas
Repetidos ciclos
Desnaturalizacin
de las cadenas de
ADN
Hibridacin de los
iniciadores
Extensin de la
secuencia
amplificada
Termociclado
r
PCR-RT
PCR - multiplex LCR (Ligasa Chain
Reaction)
Hibridacin con sondas
especificas
Amplificacin de las sondas
Ligamiento
Producir cadenas
duplicadas

Cantidad de DNA concreta existente en
una muestra
Se duplica x cada ciclo
Seguimiento fases iniciales
Umbral arbitrario
PCR tiempo real
Enzimtica
Radioactiva
Quimioluminiscente
Fluorescente
Cualitativa
Cuantitativa
Multiplicacin de la
seal
Reaccin
Secuencia blanco
Sondas
Seal
Organismo Nombre de la
prueba
Mtodo Limite de
deteccin
Aplicacin
HIV 1 Amplicor PCR <100 copias/ml Prueba
confirmatoria
HIV 1 Monitor PCR cuantitativo 400 750,000
copias/ml
Cuantificacin
durante terapia
HCV Monitor PCR cuantitativo 200 10,000,000
copias/ml
Cuantificacin
durante terapia
M. Tuberculosis Amplicor PCR >20
organismo/RXN
Pacientes no
tratados y
baciloscopia +
C. Trachomatis Amplicor PCR 10-20 cuerpos
elementales/RXN
Confirmacin y
monitoreo
Enterovirus Amplicor PCR No reportado Confirmacin y
monitoreo
VHC Quantiplex DNA ramificado 200,000 -120x106
copias/ml
Cuantificacin
durante terapia
VHB Quantiplex DNA ramificado .7x106-5000x106
copias/ml
Confirmacin y
monitoreo
N. gonorrhoeae LCX LCR No reportado Confirmacin y
monitoreo