Docente:

Msc. Anabel Gonzlez Siccha

TEMA N 10
Fosforilacin oxidativa a nivel de sustrato y de la cadena respiratoria.
Relacin Fsforo/Oxgeno. Teora quimiosmtica. Mecanismo de los
desacopladores y los ionforos. Respiracin celular. Transferencia de
equivalentes reductores.

Universidad Nacional de Trujillo
Facultad de Ciencias Agropecuaria Dpto. Bioqumica
Asignatura Bioqumica General

Trujillo, 25 de Abril de 2014

FOSFORILACIN OXIDATIVA
Los equivalentes reductores provenientes de la
oxidacin del sustrato se utilizan para la formacin de
ATP.
Tipos de Fosforilacin oxidativa:
1. Fosforilacin a nivel
de sustrato: En la
gluclisis (citosol) y
en el C. Krebs
(matriz
mitocondrial), slo
se forma 1 ATP por
oxidacin del SH2.
2. Fosforilacin a nivel
de la cadena
respiratoria
(mitocondria), se
forma 2 o 3 moles
de ATP por mol de
SH2.

FOSFORILACIN A NIVEL DE
SUSTRATO
La hiptesis qumica postula que:
El acoplamiento qumico directo en todas las
etapas del proceso, como las reacciones que
generan el ATP en la gluclisis.
Sosteniendo que para la sntesis de ATP debe
existir un intermediario macroenergtico.
Ejemplo: Fosforilacin oxidativa a nivel de
sustrato ( Citosol, matriz mitocondrial)
Hiptesis Qumica
Fosforilacin a nivel de sustrato
Gliclisis
Fosfoglicerato cinasa
Piruvato cinasa
Ciclo de Krebs
Succinato tiocinasa

FOSFORILACIN A NIVEL DE LA CADENA
RESPIRATORIA (MITOCONDRIA)
La teora quimiosmtica
Mitchell postula que la energa de la
oxidacin de componentes en la CR genera
iones H+ que son expulsados alrededor de
una membrana acopladora en la
mitocondria, es decir, la membrana acta
como una bomba de protones cada una, en
la cadena respiratoria I, III y IV.

COMPLEJOS ENZIMATICOS
La mitocondria presenta 5 complejos PROTENA - LPIDO,
que se extienden en la membrana mitocondrial interna.

a) Componentes Fijos:
I : FMN- FeS protena NADH Dh
II : FAD FeS- Succinato Dh
III : Cit b (FeS) Citocromo C
1
IV : Cit a Cit a3
b) Componentes mviles:
- El NAD,
- La CoQ y
- El Citocromo c

NAD
CoQ
Cit c
FAD
IV III
V
RELACION FOSFORO/OXGENO
(P/O)
Depende del complejo:
El complejo I expulsa 6 a 4 protones
El complejo III 4 protones y el complejo IV,
expulsa 2 protones.
Por tanto la relacin P : O puede no ser un
entero cabal, por ejemplo, 3, pero es posible
que sea 2.5 por simplificacin, pero se
continuarn utilizando el valor de:
3 para la oxidacin del NADH + H y
2 para la oxidacin del FADH2 .
Cadena Respiratoria
Msc. Francisco Abanto Zamora
Relacin P/O : (NADH=3ATP;
FADH=2ATP, cit C= 1ATP)
El flujo de electrones desde los sustratos al oxigeno es
la fuente de energa del ATP
SITIOS DE CONSERVACIN DE LA
ENERGA
UNA ATP SINTASA LOCALIZADA EN LA MEMBRANA
FORMA ATP
La diferencia de potencial
electroqumico se usa para impulsar
a una ATP sintasa localizada en la
membrana la cual en presencia de
Pi + ADP forma ATP.
Las subunidades estn adheridas,
posiblemente mediante un tallo.
Las unidades fosforilantes similares
se encuentran en el interior de la
membrana plasmtica de las
bacterias, as como en el exterior de
la membrana de los tilacoides en
los cloroplastos.
ATP Sintetasa
LA TEORA QUIMIOSMTICA
Postula:
1. La adicin de protones (cido) al medio externo de
las mitocondrias conduce a la generacin de ATP.
2. La fosforilacin oxidativa no ocurre en sistemas
solubles donde no existe la posibilidad de una ATP
sintasa vectorial. Debe haber una membrana
cerrada para obtener fosforilacin oxidativa.
3. La cadena respiratoria contiene componentes
organizados lateralmente (asimetra transversal)
como los requiere la teora quimiosmtica.
LA TEORA QUIMIOSMTICA
EXPLICA:
La accin de los desacopladores: Estos
compuestos (por ejemplo, dinitrofenol) son
anfipticos e incrementan la permeabilidad de
las mitocondrias.
Existencia de sistemas transportadores de
intercambio mitocondrial: Estos sistemas
son una consecuencia de la membrana
acoplada que debe ser impermeable a los
protones y otros iones para conservar el
gradiente electroqumico.

MECANISMO DE DESACOPLADORES
La accin de estos consiste en disociar la oxidacin
en la cadena respiratoria, de la fosforilacin.
Bloquean la sntesis de ATP, al tiempo que permite
que contine el transporte electrnico a lo largo de la
CR hasta el O
2
Hay oxidacin del sustrato pero no formacin de ATP.
Son cidos dbiles solubles en lpidos.
Los desacopladores son anfipticos e la
permeabilidad de la mitocondrias a los H+ el
potencial electroqumico.
Ejemplo: El 2,4 DNP, Dinitro cresol, Pentaclorofenol.
CCCP (m-clorocarbonilcianuro fenilhidrazona), 100
veces ms activa que el primero.
MECANISMO DE
DESACOPLADORES
El 2,4-dinitrofenol (DNP) el cual acta cerca a la
membrana interna, protonndose, debido al pH ms
bajo existente en esta zona, esta protonacin
aumenta la hidrofobicidad del DNP, lo cual permite
que difunda en la membrana y que la atraviese por
la accin de masa.
Una vez dentro de la matriz, el pH ms alto hace
que el hidroxilo fenlico desprotone.
As pues, el desacoplador tiene el efecto de
transporte de H+ de vuelta hacia la matriz, evitando
el canal protnico Fo y, por tanto, sin sntesis de
ATP. Ya que la entrada de los H+ en la matriz, a
travs del canal Fo proporciona la energa
necesaria para impulsar la sntesis de ATP.
MECANISMO DE IONOFOROS
Los Ionforos son sustancias lipoflicas y pueden
atravesar la membrana mitocondrial interna
formando complejos con cationes especficos y
facilitan el transporte de iones al interior de la
mitocondria.
Permiten a los iones inorgnicos atravesar la
membrana y desacoplan la cadena de
transferencia de electrones desde la fosforilacin
oxidativa disipando la contribucin elctrica y el
gradiente electroqumico a travs de la membrana
mitocondrial.
Ejemplo: valinomicina, nigericina.

LA TEORA QUIMIOSMTICA
EXPLICA:
EL CONTROL RESPIRATORIO La diferencia de
potencial electroqumico a travs de la membrana,
una vez que establecida como resultado de la
translocacin de protones, inhibe el transporte
posterior de equivalentes reductores a travs de la
cadena respiratoria. Esto a su vez depende de la
disponibilidad de ADP y Pi
ESTADO DE CONTROL DE RESPIRACIN
Condiciones que limitan la velocidad de respiracin
Estado 1 Solamente Disponibilidad de ADP y sustrato.
Estado 2 Solamente Disponibilidad de sustrato.
Estado 3
La capacidad de la cadena respiratoria misma cuando
todos los sustratos y componentes estn presentes en
cantidades de saturacin.
Estado 4
Solamente Disponibilidad de ADP.
Estado 5
Solamente disponibilidad de Oxgeno.
ESTADOS DE RESPIRACION CELULAR.
El control respiratorio asegura un suministro
constante de ATP.
La velocidad de respiracin de las mitocondrias se
pueden controlar por la [ADP], esta se debe a que la
oxidacin y la fosforilacin estn ntimamente
acopladas, es decir, la oxidacin no puede proceder
por la va de la CR.
El estado de reposo se encuentra en el estado 4,
siendo la respiracin controlada por la disponibilidad
de ATP.
La clula se aproxima al estado 3 y 5 ya sea que la
capacidad de la CR se satura o la PO2 decrece a
valores menores, as la manera de procesos
oxidativos biolgicos permite que la energa libre que
resulta de la oxidacin de los alimentos, estos se
vuelven disponibles y son capturados escalonados.
TRANSFERENCIA DE EQUIVALENTES
REDUCTORES
En la membrana existen
sistemas de intercambio por
difusin para el intercambio
de aniones por iones OH- y
de cationes por iones H+.
Estos sistemas se requieren
para la captura y salida de
los metabolitos ionizados al
tiempo que se conserva la
neutralidad elctrica y
osmtica.
LANZADERAS DE SUSTRATO
El NADH no puede penetrar la membrana
mitocondrial, pero en el citosol se produce de
manera continua por deshidrogenasas,
entonces existe mecanismos que involucran la
trasferencia de H+ a travs de la
m.mitocondrial por medio de pares de
sustratos relacionados por DHs adecuadas.
Se requiere que exista la Dh especfica en
ambos lados de la membrana mitocondrial.
Lanzadera del Glicerol-3-Fosfato
Esta lanzadera se presenta en el msculo de
insectos voladores, encfalo, tejido adiposo pardo y
msculo blanco e importante en el hgado. Permite la
transferencia de H+ a la CR.
Lanzadera del malato
Es importante en m. cardaco porque presenta deficiencia
del glicerol-3-P Dh. Permite la transferencia de H+
directamente a la matriz mit.
El OA es impermeable a la mm transamina con el
glutamato antes de su transporte a travs de la mm y se
reconstituye en el citosol.

Lanzadera del Malato-Aspartato
Lanzadera del Fosfato de Creatina
Aumenta la participacin del fosfato de
creatina como amortiguador, al actuar a
manera de un sistema dinmico para la
transferencia de fosfatos de alta energa
provenientes de las mitocondrias, en tejidos
activos como el corazn y el msculo
esqueltico.
Permite el transporte rpido de fosfato de alta
energa de la matriz mitocondrial al citosol.

Presenta varias
isoenzimas:
Ck
a :
ATP
CK
c:
CPC
CK
g:
Gliclisis
y sintess PC
CK
m:
FO:
ATP PC
MUCHAS GRACIAS