Anlise Estrutural de Compostos Orgnicos://

Espectrometria de massas
Instrumentao

[Aula 02]

O Espectrmetro de Massas
Partes principais de um espectrmetro de massas

Detector de
ons
Separao dos ons

Vcuo

Incio

Inlet
Amostra
Gs
Lquido
Slido

Inlet assegura que amostra na forma de

vapor entre como um feixe de molculas
na fonte de ionizao

Gs
Lquido voltil
Slido voltil

Inlet parcialmente evacuado

Para formar o feixe de molculas, estas
passam atravs de um pequeno orifcio
chamado fenda molecular em seguida
entram na fonte ionizao

Amostras menos Sistema sob aquecimento aumenta presso

de vapor da amostra
volteis

CG/MS e HPLC/MS
Cromatgrafo

Nestes sistemas, o cromatgrafo funciona

como inlet, direcionando a amostra para a
fonte de ionizao

Espectrmetro de Massas

Para cada componente da mistura

que sai do cromatgrafo, obtido um
espectro de massas

CG/MS e HPLC/MS

Para cada componente da mistura

que sai do cromatgrafo, obtido um
espectro de massas

Cromatograma
(2 compostos)

Espectro de
massas 1

Espectro de
massas 2

Ionizao
Antes de serem analisadas (separadas em funo de m/z) as partculas so ionizadas

Principais tipos de
ionizao:

Ionizao por Eltrons (EI)

Ionizao Qumica (CI)
Ionizao por Dessoro (DI)
Ionizao por Electrospray (ESI)

Ionizao por Eltrons (EI)

Mtodo mais simples e mais usado de ionizao
Um feixe de eltrons de alta energia (70 eV) incide sobre o
feixe de molculas que vem do inlet, removendo um eltron de
algumas molculas, formando um ction radical

Molcula neutra Feixe de Ction radical

eltrons

Ionizao
Ionizao por Eltrons (EI)
Os ctions so direcionados pela placa repelente (+) em
direo s placas aceleradoras (-), que produzem um feixe
de ctions de alta velocidade em direo ao analisador

Ionizao
Ionizao por Eltrons (EI)
Vantagens

Desvantagens

Bom para anlise de rotina de

pequenas molculas orgnicas

Muita fragmentao on
molecular pode no ser detectvel

Barato e robusto

Amostra deve ser relativamente

voltil

Bastante fragmentao estrutura Ruim para anlise de molculas

com alto peso molecular e
biomolculas
Espectros reprodutveis Grande
Banco de dados de EI-MS
disponvel
possvel formar on M- pela
abstrao de eltrons

Ionizao
Ionizao Qumica (CI)
Um feixe de molculas de um gs reagente pr-ionizado
causa ionizao das molculas que vm do inlet
Gases reagentes mais usados: metano, amnia, isobutano
Ionizao pode ocorrer por:
- Transferncia de prton
- Transferncia de eltron
- Formao de aduto

Ionizao
Ionizao Qumica (CI)
Ex: gs reagente = metano
Pr-ionizao do metano:

Ionizao da amostra (M):

- Transf. de prton
- Formao de aduto

Ionizao

- Gs reagente
= metano

Ionizao Qumica
(CI)
Dependendo do gsreagente utilizado,
obtm-se um maior ou
menor grau de
fragmentao do on
molecular

- Gs reagente
= isobutano

- Gs reagente
= amnia

Ionizao

- EI

Ionizao Qumica
(CI)
Escolhendo o gs
reagente apropriado,
possvel obter um
espectro com on quasimolecular [M+H]+
praticamente intacto,
quando comparado a
outros mtodos de
ionizao

- CI (metano)

- CI (isobutano)

Ionizao
Ionizao Qumica (CI)
Vantagens

Desvantagens

Pouca fragmentao do on quasimolecular [M+H]+

Amostra deve ser relativamente

voltil

Barato e robusto

Ruim para anlise de molculas

com alto peso molecular e
biomolculas

possvel formar ons quasimoleculares do tipo [M-H]-

Os espectros no so reprodutveis
(dependem da presso,
temperatura, gs utilizado, etc)

Ionizao
Ionizao por Dessoro (DI)
Mtodos modernos que permitem ionizao de amostras no
volteis
Ex: - MALDI (ionizao por dessoro a laser assistida por matriz)
- FAB (bombardeamento de tomos rpidos)
- SIMS (espectrometria de massas de on secundrio)

A amostra, suportada em uma matriz, bombaredeada por um

feixe de ons (SIMS), tomos neutros (FAB) ou ftons de alta
intensidade (MALDI) que causa ionizao de algumas molculas
da amostras e sua ejeo da matriz. Os ons so ento
acelerados em direo ao analisador.

Matriz: no voltil, inerte, eletrlito.

Ex:
glicerol e trietanolamina (SIMS e FAB)
cidos cinmico e nicotnico

Ionizao
Ionizaes por Dessoro (DI)

Ionizao
Ionizao por Dessoro (DI)
Vantagens

Desvantagens

Permite anlise de molculas no

volteis

Formao de rudo no espectro

devido a ons provenientes da
matriz abaixo de m/z = 600

ons [M+H]+ ou [M-H]- podem ser

formados dependendo da matriz.
Ou ainda [M+Na]+, [M+K]+

Maior custo

Ionizao
Ionizao por Electrospray (ESI)

Permite anlise de amostras volteis e no volveis

Uma soluo da amostra injetada (spray) do fim de um capilar at uma
cmara aquecida. O capilar possui uma alta voltagem e as gotculas saem
dele com carga. Um gs secante remove as molculas de solvente,
restando somente os ons na fase gasosa.

Ionizao
Ionizao por Electrospray (ESI)
Vantagens

Desvantagens

Permite anlise de molculas de

uma ampla faixa de peso molecular

Maior custo

ons [M+H]+ ou [M-H]- podem ser

gerados. Ou ainda [M+Na]+,
[M+K]+
Como emprega amostra em
soluo, perfeito para ser usado
em sistema LC-MS

Analisadores
Analisador de setor magnetico
Baseia-se no seguinte fato: na presena de um campo
magntico ons (com massa m e carga z) tendem a descrever uma
trajetria curva com um raio (r) que depende da intensidade do
campo magntico (B). V a ddp entre as placas aceleradoras.

Analisadores
Analisador de setor magntico
O analisador um tubo curvo envolto por um magneto. Para um
determinado campo magntico aplicado (B), somente partculas
com um determinado valor de m/z chegaro ao final e alcanaro
o detector. Partculas com m/z muito altas ou baixa colidem com
as paredes do analisador e no alcanam o detector.
Variando-se o
campo aplicado
(B) partculas
com diversos
valores de m/z
conseguem
chegar ao final
do tubo e
alcanar o
detector.

Analisadores
Analisador de setor magntico
Resoluo = 2000 a 7000

OBS: Resoluo em Espectrometria de Massas

- R = resoluo
- M = masa do fragmento
- M = diferena de massa entre dois
fragmentos consecutivos que o
aparelho consegue detectar

Analisadores
Analisador de foco duplo
Um campo eltrico aplicado antes ou depois do campo magntico
Faz com que todas as partculas carregadas viajem com a mesma
velocidade
Tambm impe trajetria curva s partculas carregadas
Aumento na resoluo. R = 20000 a 70000

Analisadores
Analisador de quadrupolo
Quatro bastes paralelos ao feixe de ons
Entre os bastes h um campo eletrosttico oscilante que causa
uma trajetria oscilante aos ons
ons com m/z correta tm oscilao estvel e conseguem
atravessar o quadrupolo em trajetria espiral e atingir o detector.
ons com m/z muito alta ou muito baixa tm oscilao instvel e
colidem com os bastes.

Analisadores
Analisador de quadrupolo

Quatro bastes paralelos

ao feixe de ons

Entre os bastes h um
campo eletrosttico
oscilante que causa uma
trajetria oscilante aos
ons

ons com m/z correta tm

oscilao estvel e
conseguem atravessar o
quadrupolo em trajetria
espiral e atingir o detector.
ons com m/z muito alta ou
muito baixa tm oscilao
instvel e colidem com os
bastes.

Variao no campo eletrosttico

oscilante permite analisar
fragmentos com todos valores
de m/z

Resoluo baixa R ~ 3000

Analisadores
Analisador por tempo de vo (TOF)

Dois ons gerados da

mesma forma (com a
mesma energia cintica)
tero velocidades
diferentes dependendo
de suas massas.

Quanto maior a massa do

on, menor sua velocidade

ons mais leves chegam ao

detector primeiro

Vantagem: muito mais

simples que os anteriores

Quanto mais longo o analisador

TOF, maior a resoluo

Resoluo bastante baixa R

~ 500

Detectores

Conta o nmero de ons gerando uma corrente eltrica proporcional a

este nmero do ons. Sob condies normais de operao, esta corrente
eltrica deve ser amplificada

Multiplicador de eltrons (amplificador)

Permite a deteco de 1 on apenas!

A coliso dos ons com a superfcie do amplificador leva ejeo de

eltrons em cascata at o final do detector, levando amplificao do
sinal eltrico por 2n vezes, onde n o nmero de colises nas paredes
do amplificador