Principios de la

tcnica de ELISA

R-Biopharm Latinoamrica // 1

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

ELISA Sandwich

R-Biopharm Latinoamrica // 2

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (1)

Micropocillos sensibilizados
con anticuerpos especficos
contra el antgeno

Anticuerpos especficos

R-Biopharm Latinoamrica // 3

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (2)

Agregado de las muestras y

los estndares

Tiempo de incubacin
requerido (de 30 a 60 min)

R-Biopharm Latinoamrica // 4

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (3)

Durante la incubacin

Hay un equilibrio entre el

antgeno unido y el no unido

R-Biopharm Latinoamrica // 5

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (3)

Lavado 3x

Remocin del antgeno no unido de

estndares y muestras

R-Biopharm Latinoamrica // 6

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (4)

Agregado del conjugado

anticuerpo-enzima

R-Biopharm Latinoamrica // 7

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (4)

Agregado del conjugado

anticuerpo-enzima

R-Biopharm Latinoamrica // 8

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (4)

Agregado del conjugado

anticuerpo-enzima

R-Biopharm Latinoamrica // 9

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (4)

Agregado del conjugado

anticuerpo-enzima
Hay una unin al complejo
antgeno-anticuerpo

R-Biopharm Latinoamrica // 10

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (5)

Lavado 3x

Remocin del conjugado

anticuerpo-enzima no unido

R-Biopharm Latinoamrica // 11

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (6)

Luego del lavado 3x

Remocin total del conjugado

anticuerpo-enzima

R-Biopharm Latinoamrica // 12

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (7)

Agregar Sustrato/Cromgeno

El Sustrato (S) desarrolla

un Producto (P) coloreado
en presencia de la enzima

R-Biopharm Latinoamrica // 13

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Sandwich Elisa (8)

Agregar Solucin Stop

La reaccin se detiene y el color

desarrollado se mide por medio de
un espectrofotmetro

La intensidad del color es directamente proporcional a la concentracin de las muestras/estndares

- a mayor color, mayor concentracin en las muestras/estndares

R-Biopharm Latinoamrica // 14

Vuelta de Obligado 2943 (1429) Buenos Aires - Argentina

Curva estndar

R-Biopharm Latinoamrica // 15

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