Equipo de Laboratorio:

Centrifugas,
Refrigeracion,
Incubadoras, Baos
Maria
Tcnicas Bsicas e Instrumentales
Brenda Ardon M.Q.C.

Centrifugas
Instrumentos que
someten a las
muestras a
intensas fuerzas
que producen en
poco tiempo, la
sedimentacion de
las particulas de
densidad mayor
que la del medio
que las rodea.

Termino para describir la

fuerza aplicada durante
la centrifugacin=
Fuerza centrifuga
relativa (FCR):
1.118 x 10-5 x r x rpm2
1.118 x 10-5 : factor
emprico
r: radio en cms del centro de
rotacin al fondo del tubo
(cm)
rpm:velocidad de la rotacin
del rotor en revoluciones
por min.
UNIDADES= g
Ej. 500 X g
NORMOGRAMA

Tipos: En funcin de los mrgenes de

aceleracin
centrfugas: de pocas g
a aprox. 3000 xg

De pocas g a ~ 3,000 g

super-centrfugas o
centrfugas de alta
velocidad

2,000 20,000 g

Ultracentrfugas

15,000 600,000 g

Se controla la temperatura
de la cmara para evitar
sobrecalentamiento de las
muestras debido a la friccin.

Versiones especiales
Microcentrifuga: hasta
12,000 g
Rotor fijo, se detiene
en minutos, para
Hematocrito
Centrifugas
refrigeradas:
fraccionamiento de
unidades de sangre,
refrigeradas 2-8C
Serofuge: de velocidad
fija (3,400 rpm),
cronometradas en
segundos,
desarrollan
velocidad en
segundos.

Centrifuga para Microhematocrito

Centrifuga
Serologica
Microcentrifuga

microcentrifugas
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Centrifuga
Refrigerada

Ultracentrfugas.
Velocidad: a partir de 50,000
rpm.
Presentan sistemas
auxiliares: sistemas de
refrigeracin, sistemas de
alto vaco.
2 tipos:
Analticas: obtencin de datos
precisos de propiedades de
sedimentacin (s, PM).
Preparativas: aislamiento de
partculas de bajo S
(microsomas, virus,
macromolculas).
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Componentes de una centrifuga

1. Eje o rbol central
2. Rotor: fijo al rbol y provisto
de cubetas para sostener los
tubos de centrifugacin
3. Cubetas o camisas
4. Motor
5. Accesorios:
Botn de encendido
Timer
Control de velocidad
Tacmetro (algunos)
Freno (brake)
Alarmas audibles

Tipos de rotores.

Existen tres tipos de rotores en las centrfugas:

- Rotores flotantes.
- Rotores de ngulo fijo o angulares.
- Rotores verticales.

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Rotores flotantes.
En este tipo de rotor, los tubos que se utilizan para
centrifugar estn unidos al brazo del rotor por su
parte superior.
Horizontales : moviles, forman angulo de 90 durante
la centrifugacion.
Forman Angulo de 90 durante la centrifugacion

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Durante la centrifugacin, debido a la fuerza

centrfuga, los tubos pierden la verticalidad y se
sitan perpendiculares al eje de rotacin.

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Rotores de ngulo fijo o angulares.

En este tipo de rotores la centrifugacin se lleva a
cabo siempre en un ngulo fijo respecto al eje de
rotacin.

Angulares: fijos
Forman Angulo de 45

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Parmetros a considerar en la centrifugacin:

1. Volumen a centrifugar: tipo de tubos y rotores
a emplear.
2. Naturaleza qumica de la solucin: naturaleza
del tubo a emplear
3. Diferencial de densidad entre la partcula a
sedimentar y la densidad del medio en el que
se encuentra.
A mayor diferencia: menor tiempo y menor
fuerza de aceleracin

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Operacin de centrifugas
Cuando se centrifuga una
solucin, se rompe la
homogeneidad y se
produce la separacin del
soluto y del disolvente.
Las primeras partculas en
sedimentar son las de
mayor masa.

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16

Aplicaciones
1. Remover
elementos
celulares
sanguneos para
obtener suero o
plasma
a. Muestras
sanguneas
b. Unidades de
sangre donada

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Derivados sanguneos..

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Aplicaciones
2. Concentrar
elementos
celulares y otros
componentes
provenientes de
lquidos
biolgicos para
su evaluacin
microscpica o
anlisis qumico.
Ej.: examen del
sedimento
urinario

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Aplicaciones
3. Separacin de
proteinas a travs
de anticuerpos para
su posterior
cuantificacin.
4. Separar
componentes
lipidicos (grasas) de
otros componentes
del suero o plasma
y separar
lipoprotenas.

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Aplicaciones:
5. Extracciones de
DNA a partir de
celulas para su
posterior
anlisis.
6. Separacin de
organelas
subcelulares a
traves de
ultracentrifugacion

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Mantenimiento
Velocidad: chequear c/3
meses, no debe diferir >5%
de la esperada.
Timer: chequear semanal
con timer de referencia, no
mas de 10% de error
Temperatura: chequear
mensual, variaciones no
mayores de 2C de la
temperatura esperada
Motor: cada 3 meses
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REFRIGERACION

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Efecto de la temperatura:
Curva de tres temperaturas cardinales
Temperatura
mnima: debajo
de ella no hay
crecimiento;
Temperatura
mxima: encima
de ella tampoco
existe
crecimiento;
Temperatura
ptima: permite
la mxima tasa
de crecimiento

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REFRIGERACION
ESENCIAL PARA EL MANTENIMIENTO DE:
MUESTRAS: SANGRE, SUEROS, ORINA
ETC...
REACTIVOS QUIMICOS.
REACTIVOS INFLAMABLES.
MEDIOS DE CULTIVO PREPARADOS.
SOLUCIONES AMORTIGUADORAS.

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26

2
1

Ciclo de
refrigeracin:
4 elementos

4
Elementos: Evaporador, Compresor, condensador y vlvula de
expansin.
1. Evaporador: el refrigerante se evapora y absorbe calor del
espacio que est enfriando y de su contenido.
2. El vapor pasa al Compresor movido por un motor que
incrementa su presin, lo que aumenta su temperatura.
3. El gas sobrecalentado a alta presin se transforma
posteriormente en lquido en un Condensador refrigerado por
aire o agua.
4. Despus del condensador, el lquido pasa por una Vlvula de
expansin, donde su presin y temperatura se reducen hasta
alcanzar las condiciones que existen en el evaporador.
REFRIGERANTE: AMONIACO LIQUIDO

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Diferentes tipos:

Rangos variados de Temp.;

Los mas comunes: 1-8C

Temperaturas extremas: -86C

Freezers criognicos de 140 C

a 150C, estables, temperaturas
uniformes y a expensas de gas de
nitrgeno liquido (LN).Ideal para
periodos prolongados.

Freezers para banco de sangre:

Plasma fresco congelado -20C
Clulas rojas empacadas
Aplicacin en vida ciencia,
farmacutica, clnica y industrial
LAB.

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Cadena de frio
Conservacin de insumos de
lab que requieren
temperaturas de refrigeracin
o congelacin para mantenerse
viables y garantizar resultados
confiables en el lab.
Para reactivos, fluidos
biologicos.
Unidades de sangre y sus
derivados
Indicador de auditorias de
calidad

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VERIFICACION DE LA
TEMPERATURA: refrigeradores

Termmetro dentro del refrigerador en posicin

vertical.
Las lecturas se hacen rpidamente para evitar la
entrada de aire caliente que modifique la
temperatura.
El mtodo mas acertado es poner el termmetro
dentro de un vaso con agua, ya que su
capacidad de calor evita las fluctuaciones muy
rpida
Termometro digital: sensor maxima y minima
tempertaturaALARMA de seguridad audible,
1C

Evaporador por efecto difuso del interior

del gabinete lo que permite una
uniformidad en la temperatura interior del
equipo.
Sistematizacin electrnica: equipos conectados
a un sistema central y monitoreados por
computadora; informes impresos y alarmas
audibles.

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VERIFICACION DE TEMPERATURA:
Congeladores o freezers:
Termmetro de alcohol.
-20 a -30C
Diferentes presentaciones segn
capacidad, rango de temperatura,
tipo de refrigerante,
requerimientos elctricos,
presentacin de exterior e interior,
dimensiones, peso neto etc...

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USOS Y CUIDADOS
VENTILACION ADECUADA ATRS
DEL REFRIGERADOR Y NO
CUBRIR.
NO ALIMENTOS.
NO ABRIR CONTINUAMENTE.
NO DESCONGELAR CON
INSTRUMENTOS.
VIGILAR LA TEMPERATURA.

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33

34

Incubadoras

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Tipos
TIPOS:
INCUBADORA DE
AIRE
INCUBADORA DE
AGUA
RECIRCULANTE
INCUBADORA DE
BLOQUES

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Necesaria para el
crecimiento de
microorganismos
que requieren de
CO2, por ejemplo:
N. gonorrhoeae
Incubadora de CO2

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INCUBADORAS
AIRE:
Temperatura uniforme
0.5C
Mas comunes
30,35,y37C
Control con
termostato
Resistencias de baja
potencia.
Poca humedad, nocivo
para bacterias, usar
toalla hmeda en un
vaso de agua

AGUA RECIRCULANTE:
Control de temperatura
preciso 0.2C
41.5- 44.5Cutilizadas en
el aislamiento de coliformes
fecales en analisis de agua
potable.
Usa recirculacion del agua
mediante una bomba
centrifuga.
Ej: coliformes fecales.

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INCUBADORA DE BLOQUES
ELEMENTO CALEFACTOR
CALIENTA UN BLOQUE DE
ALUMINIO O METAL CON
BUENA CONDUCCION
TERMICA QUE CONTIENE
ESPACIOS PARA PONER
TUBOS O PLACAS.
CONTROL PRECISO DE Temp.
AMPLIO RANGO DE
TEMPERATURA

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SEGURIDAD DE LAS
INCUBADORAS
TENER CONECCION A
TIERRA.
TENER LOS CUIDADOS
PERTINENTES A TODO
EQUIPO ELECTRICO.
PROVEER DE UNA CUBIERTA
A TODAS LAS INCUBADORAS
DE AGUA RECIRCULANTE.

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OPERACION
ENCIENDA ON .
PERIODO DE
CALENTAMIENTO HASTA
QUE ALCANCE LA
TEMPERATURA DESEADA.
VERIFIQUE LA
TEMPERATURA CON EL
TERMOMETRO DE
CONTROL.

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FALLAS COMUNES:
NO ENCIENDE: MEDIR VOLTAJE,
REEMPLAZAR RESISTENCIA,
CALIBRAR.
TEMPERATURA INESTABLE:
REVISAR TERMOSTATO,
RESISTENCIA, CIRCUITO CONTROL.
NO LLEGA LA TEMP. DESEADA:
REVISAR RESISTENCIA, REVISAR
TERMOSTATO.
NO CONTROLA TEMPERATURA:
REVISAR CIRCUITO CONTROL.

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BAOS DE AGUA

Baos Maria

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BAO MARIA:
EQUIPO DE LABORATORIO QUE
SIRVE PARA
MANTENER UNA TEMPERATURA
CONSTANTE
MEDIANTE EL CALENTAMIENTO
INTERMITENTE
DE AGUA.

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Baos Maria
Caja metalica, acero inoxidable,
variable volumen.
Usualmente para ensayos de
laboratorio a 37C.
Hasta 100C
Usados para conferir temperatura
uniforme a una sustancia lquida o
slida o para calentarla lentamente:
calentamiento indirecto
Conduccin termica
Resistencia
Timer, Temperatura, ON-OFF

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Esquema del bao de agua

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OBJETIVO
Asegurar que los baos maria se
emplean en la incubacin de las
pruebas, se mantengan en las
condiciones adecuadas y
permanezcan capaces de controlar la
temperatura requerida.

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CALIFICACION DEL EQUIPO

PARA LA CALIFICACION SE TOMA EN CUENTA
EL ESTADO FISICO DEL EQUIPO:
a)
b)
c)
d)
e)

LIMPIEZA DEL EQUIPO

CONECTOR ELECTRICO
SELECTOR DE TEMPERATURA
CARATULA INDICADORA
APARIENCIA EN GENERAL.

VERIFICACION:
SE LLEVA A CABO COMPARANDO LA
TEMPERATURA DEL EQUIPO CON UN
TERMOMETRO DE REFERENCIA.

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Operacin del equipo

Antes de encenderlo, cuidar que
tenga agua destilada a la altura
marcada por el fabricante, o que
est cubriendo la resistencia.
Ajustar la temperatura deseada,
con el regulador termosttico.

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Cuidados del equipo

a) Al encenderlo, tener cuidado que
el agua cubra la resistencia en
forma completa, especialmente
en los baos que utilizan
bombas de circulacin.
b) Utilizar siempre agua destilada,
el agua comn forma dentro de
los baos y sobre las
resistencias capas de carbonato,
que con el tiempo sirven de
aislante, dando como resultado
inestabilidad en la temperatura.
c) El agua del bao de Mara, debe
cambiarse semanalmente

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La Sabidura es la nica necesidad real que siempre tendrs.

PREGUNTAS?
Sabidura ante todo; adquiere Sabidura; y sobre todas
tus posesiones adquiere inteligencia, engrandcela, y ella
te engrandecer.
Proverbios 4:7-8.

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