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Determinacin de

antiestreptolisinas
Aguilar Castro Jess
Cid Hernndez Francisco Javier
Gonzlez Alcntara Erick Jacinto
Medina Prez Bereshit Beln
Trejo Garca Abel

Estreptococos

Los estreptococos son


organismos anaerobios
facultativos y Gram Positivos
que a menudo aparecen
formando cadenas o por
pares y son catalasanegativa (los estafilococos
son catalasa positivos).

Estreptococos

Los estreptococos se
subdividen en grupos
mediante anticuerpos que
reconocen a los antgenos de
superficie. Estos grupos
incluyen una o ms especies.
Las agrupaciones de
estreptococos ms
importantes son A, B, y D.

Estreptococos
Entre los grupos de
estreptococos, la enfermedad
contagiosa (especificamente
faringitis) es causada por el
grupo A, el cul se enfatiza
aqu Streptococcus
pneumoniae (es la causa
principal de pulmona
humana), Streptococcus
mutans y otros estreptococos
llamados viridans (entre las
causas de caries dental) no
pertenecen a grupos
antignicos.

Estructura antignica de los


estreptococos
El principal factor de virulencia es la protena M, que hace
posible la multiplicacin de los estreptococos en el husped.
La pared celular, especialmente el complejo de peptidoglicanos
y polisacridos C, produce toxicidad tisular incluso en los
estreptococos muertos. Los estreptococos A forman adems
numerosas exotoxinas. Las hemolisinas, estreptolisinas O y S,
destruyen las membranas de los eritrocitos y otras clulas.
Las exotoxinas estreptoccicas pirognicas (EEP) A, B y C son
las responsables de la fiebre, exantema y enantema en la
escarlatina, as como de la sepsis y del sndrome de shock
txico. Actan como superantgenos que provocan una
liberacin de grandes cantidades de citoquinas. Las enzimas
estreptoquinasa, ADNasa y hialuronidasa favorecen la
proliferacin tisular de la infeccin.

Estructura antignica de los


estreptococos

Protena M

Esta sustancia es un
factor importante de
virulencia para el
S.pyogenes del grupo A.
La protena M tiene la
apariencia de
prolongaciones
semejantes a pelos de la
pared celular del
estreptococo.

Protena M

Cuando la protena M est presente los estreptococos son


virulentos, y en ausencia de anticuerpos especficos tipo M
pueden resistir la fagocitosis mediada por los
polimorfonucleares. Los estreptococos del grupo A
(S.pyogenes) carentes de protena M no son virulentos. La
inmunidad a la infeccin con estreptococos del grupo A se
vincula con la presencia de anticuerpos de tipo especfico a
la protena M. Debido a que existen ms de 80 tipos de
protena M, una persona puede sufrir infecciones repetidas
con S.pyogenes del grupo A de diferentes tipos M.

Sustancia T
Este antgeno no tiene
interrelacin con la virulencia
de los estreptococos. A
diferencia de la protena M, la
sustancia T es acidolbil y
termolbil. Se obtiene mediante
la digestin proteoltica que
destruye con rapidez a la
protena M. La sustancia T
permite diferenciar ciertos tipos
de estreptococos por
aglutinacin con antisueros
especficos en tanto que otros
tipos comparten la misma
sustancia T.

Toxinas y enzimas
Los estreptococos del grupo A fabrican ms de 20
productos extracelulares antignicos, los cuales incluyen lo
siguientes:
Toxinas o enzimas
Estreptoquinasa

Efecto producido
Esta sustancia transforma el plasmingeno del
plasma humano en plasmina.

Estreptodornasa

La estreptodornasa o desoxirribonucleasa
estreptoccica, despolimeriza el DNA.

Hialuronidasa

La hialuronidasa desdobla el cido hialurnico.

Exotoxinas pirgenas

Existen tres exotoxinas pirgenas


estreptoccicas: A, B Y C antignicamente
distintas.

Difosfopiridina nucleotidasa

Esta sustancia puede vincularse con la


capacidad de los organismos para matar los
leucocitos.

Hemolisinas

Estas sustancias pueden causar la hemolisis ya


sea parcial o total.

Caractersticas

Cocos Gram positivo, clulas menores a 1 m


sin movilidad, esporulados.

Identificacin de
laboratorio

Crecen en agar sangre. Actividad hemoltica


pronunciada, catalasa negativo.

Enfermedades

Infecciones de vas respiratorias superiores,


de la piel y de tejidos blandos. Las
manifestaciones clnicas son entre otras la
escarlatina. Secuelas no supurativas
(glomerulonefritis y fiebre reumtica) son
complicaciones importantes de las infecciones
cutneas y farngeas.

Transmisin

Habitan normalmente en vas areas


superiores y piel humana. Se transmiten por
fmites y contacto.

Tratamiento y prevencin La penicilina es el tratamiento de eleccin. No


hay vacuna. La eritromicina es un tratamiento
alternativo sin embargo existe resistencia.

Neutralizacin

Este mtodo est considerado de referencia para


cualquier estudio serolgico pues es el que ms se
correlaciona entre la respuesta "in vitro" y la
respuesta "in vivo".

En esta prueba se puede valorar la capacidad que


tienen los anticuerpos presentes en un suero problema
para neutralizar la actividad biolgica de un antgeno.

Son altamente sensibles y especificas.


Se pueden realizar en 2 vas:
1.

La concentracin viral se mantiene constante y el suero diluido.

2.

El suero se mantiene constante y el antigeno diluido.


Se podr determinar la capacidad neutralizante del suero o del
antigeno.

La valoracin biolgica de la efectividad del proceso se puede


realizar sobre cultivos celulares o animales de laboratorio.

Fundamento

Si se agrega antgeno a glbulos


rojos se producir hemlisis.
Cuando el suero del paciente
contiene anticuerpos, se pone
en presencia del antgeno, se
producir una reaccin
antgeno-anticuerpo, con la
subsiguiente neutralizacin del
antgeno en parte o por
completo segn la cantidad de
anticuerpo presente.

Si se encuentra una cantidad


constante de anticuerpo mientras
sea suficiente se producir la
neutralizacin del antgeno y no
aparecer hemlisis. Los resultados
se expresan en Unidades TODD
definidas al principio como la
cantidad de suero capaz de
neutralizar 2.5 dosis hemolticas
mnimas de una estreptolisina
estandarizada.

Pruebas de neutralizacion

virus de la polio
Titulos de estreptolisinas O
Toxinas difterica
Toxinas tetanica

Prueba de las antiestreptolisinas


Se utiliza para evidenciar la presencia de anticuerpos contra la
estreptomicina O de una de las enzimas producidas por estreptococo,
que tiene el poder de destruir los glbulos rojos in vitro cuando se
encuentran en forma reducida de altos ttulos de anticuerpos que se
detectan por medio de la neutralizacin de la accin ltica de la enzima
sobre los glbulos rojos.
Se dosifican por medio de las unidades TODD que solo indican la
dilucin a la cual positiva la reaccin el titulo de antiestreptolicinas alto
por si solo no es diagnostico por eso es de gran ayuda para permitir
hallar enfermedades.

Test de neutralizacin de virus

El mtodo consiste en la infeccin de un cultivo celular


receptivo con un virus que causa lesiones visibles en este
cultivo. La concentracin del virus es conocido mientras que
los sueros a analizarse diluyen en pasos de dos en dos.
Si el suero contiene anticuerpos especficos estos inhiben la
infeccin de las clulas por el virus en cuestin y con ello la
aparicin de lesiones en el cultivo celular.

Antiestreptolisinas
Hay dos tipos
SLO
SLS

Diagnostico de antiestreptolisina

Se realiza una evaluacin serolgica de antiestreptolisina O


Unidades de Todd
Un titulo bajo no hay fiebre reumtica
Con un titulo alto hay fiebre reumtica

Mtodo usado

Se incuba una mezcla de suero a evaluar, glbulos rojos y


estreptolisina O purificada
Se varia la concentracin de estreptolisina O para observar
a que concentracin se inhibe la lisis

Posibles falsos

Falsos negativos: por la


susceptibilidad de la
estreptolisina O al oxigeno
Falsos positivos: suero con
alto contenido lipemico
genera lipoproteinas que
inhiben a las estreptolisinas

Definicin de fiebre reumatica


Enfermedad
inflamatoria,
causada por
una reaccin
inmunolgica previa a una
infeccin
farngea
por
estreptococo beta hemoltico
del
grupo A
que afecta
principalmente al corazn,
las articulaciones, piel, tejido
celular subcutneo y sistema
nervioso central.

Prevencin y diagnstico
oportuno de fiebre reumtica,
Secretara de Salud, 2008

Epidemiologa
2005

2006

1086 casos de enfermedad


cardiaca reumtica

960 casos nuevos de fiebre


reumtica aguda

se atendieron 771 casos y


sucedieron 62 muertes por
enfermedad cardiaca reumtica

95,838 casos nuevos de


faringitis y amigdalitis
estreptocccica

Prevencin y diagnstico oportuno de fiebre reumtica,


Secretara de Salud, 2008

Etiopatogenia
Se manifiesta de dos a tres semanas despus de una infeccin
causada por S. pyogenes.
Sensibilizacin a los componentes y a los productos de los
estreptococos
Concentraciones crecientes de anticuerpos que reaccionan con
algunos componentes que conforman las clulas de los tejidos

Consideraciones
diagnosticas
La fiebre reumtica se
inicia con una faringitis
estreptoccica
Se manifiesta de dos a tres
semanas despus de la
infeccin
Los datos de laboratorio
evidenciaran la infeccin
por S. pyogenes
hemoltico

Diagnstico clnico
CRITERIOS REVISADOS DE JONES
Criterios mayores

Criterios menores

Carditis

Fiebre

Artritis
Corea de Sydenham

Artralgias

Eritema marginado
Nodulos subcutaneos

Malestar general

Manual de pediatra ambulatoria, Laboratorio


MA Alejandro, JB Juan Camilo, GRVSG 30 mm/h
Juan Fernando Mdica
PCR 30 g/L
Panamericana 2008:pg371
Antiestreptolisinas

Criterios menores

Criterios mayores

Periodo de latencia de dos a tres semanas siendo ms corto para


la artritis y la carditis y mas largo para la corea

Laboratorio
Cultivo de exudado farngeo
Hemlisis
Producen estreptolisina O o S y lisan todos los
eritrocitos

Determinacin de protena C reactiva

igual o mayor de 30 g/L

Tomado de : Prevencin y diagnstico oportuno de fiebre


reumtica, Secretara de Salud, 2008

Velocidad de sedimentacin globular


mayor o igual que 30 mm/hora.

La determinacin de antiestreptolisinas O es
positiva en los siguientes niveles:
4-5 aos: 120UI / ml.
6-9 aos: 480 UI/ml.
10-14 aos: 320 UI/ml.
UI: unidades Todd

Tomado de : Prevencin y diagnstico oportuno de fiebre


reumtica, Secretara de Salud, 2008

Antiestreptolisinas en suero
Diluir suero 1:50 ( 0.1mL suero + 4.9mL solucin amortiguadora
1.- Colocar 7 tubos y adicionar los siguientes volmenes
Tubo

Solucin
Amortiguadora
(mL)

0.6

0.5

0.5

0.5

0.5

1.0

1.25

2.- Realizar diluciones al doble con vol. de 0.5 a partir del tubo 1 y
desechar el volumen del tubo 5, los tubos 6 y 7 son testigos de la
prueba
Suero (dil.
1:50) mL

0.4

0.5

0.5

0.5

1:12
5

1:25
0

1:500 1:100
0

0.5

1:2000

3.- Adicionar estreptolisina O activada (reducida)


Estreptolisina 0.25
O (mL)

0.25

0.25

0.25

0.25

4.- Incubar a 37C por 15 minutos

0.25

Antiestreptolisinas en suero
5.- Adicionar glbulos rojos grupo sanguneo O positivo
GR al
5%
(mL)

0.25

0.25

0.25

0.25

0.25

0.25

0.25

6.- Incubar a 37 C por 45 minutos agitando suavemente cada 10


minutos
7.- Centrifugar a 1500 rpm por 1 minuto y realice la lectura tomando
la ltima dilucin donde no hay hemlisis

El tubo 6 es testigo positivo de hemlisis y el tubo 7 es testigo


negativo de hemlisis

El resultado se da en unidades Todd y corresponde a la inversa de la


dilucin en donde no se presenta hemlisis

EXPRESIN DE RESULTADOS

Unidades Todd: cantidad de suero capaz de


neutralizar 2.5 dosis hemolticas mnimas de una
estreptolisina estandarizada.
<50 U Todd = No infeccin por estreptococo.
>500 U Todd = son muy sugestivas de infeccin
reciente y activa por estreptococo.

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Referencias
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edicion. Editorial panamericana. Mexico 2007. pags. 539-540;
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Microbiologa mdica: Jawetz, Melnick y Adelberg; 22 edicin.
Biologa de los microorganismos: Michael T. Madigan,John M.
Martinko y Jack Parker;10 edicin.
Microbiologa mdica: Cedric Mims, 2 edicin.