Algoritmos

bacterianos
QBP. DOMINGO SANCHEZ FRANCIA
HOSPITAL DEL NIO MORELENSE
CUERNAVACA MORELOS.

I.-Puntos a tomar en cuenta

en las marchas bacterianas
1.-Toma de muestra
2.-Transporte de la muestra
3.- Anlisis Microscopico
4.- Cultivo y primoaislamiento
5.- Identificacin Bacteriana

II.- Origen de muestras

clnicas
1.-

Las muestras para el estudio

bacteriolgico, se dividen en dos tipos:

a).- las que proceden de sitios en los que

no hay flora bacteriana
normal
presente.
b).- aquellas que se toman de lugares que
tienen flora bacteriana normal.

Flora bacteriana
Es importante que el bacterilogo tenga
conocimiento de los siguientes aspectos:
cuales son los agentes etiolgicos aislados
con mayor frecuencia en procesos
infecciosos
de
sitios
anatmicos
normalmente estriles.

cuales
son
los
microorganismos,
presentes, bajo condiciones normales, en la
piel y en las mucosas.

Presencia de biota normal en

diferentes zonas corporales
del
humano.
ZONAS CORPORALES LIBRES DE
ZONAS CORPORALES CON DE
BIOTA NORMAL
Aparato respiratorio inferior
-Laringe
-Traquea
-Bronquiolos
Aparato genitourinario
-Ureteros
-Vejiga
-Rin
-tero
Lquidos
-Sangre
-Mdula sea
-L.C.R.
-Lquido seroso
-Lquido sinovial
-Lquido pleural
-Orina
Tejidos

BIOTA NORMAL
Piel
Mucosas
-Boca
-Orofaringe
-Nasofaringe
Odo externo
Ojo
Aparato genitourinario
-Uretra anterior
-Vagina
Aparato gastrointestinal
-Estmago
-Intestino delgado
-Intestino grueso

III.- TRANSPORTE DE LA
MUESTRA

1.-La cantidad de material debe ser adecuado.

2.-La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso

(por ejemplo, expectoracin, no saliva; pus de la lesin
subyacente, no de su trayecto fistuloso; una muestra de lo
profundo de la herida, no de la superficie).
3.-Se debe evitar la contaminacin de la muestra utilizando
slo equipo estril y precauciones aspticas.
4.-Las muestras para ser enviadas al laboratorio deben
colocarse en un medio de transporte, el cual tiene como
propsito mantener la viabilidad de las bacterias presentes
en la muestra e impedir su multiplicacin. Se han diseado
diferentes medios de transporte, el que ms se utiliza es el
de Stuart.

Medios de transporte de uso

en Bacteriologa Mdica.
MEDIO

PROPOSITO

STUART
STUART REDUCIDO

Aerobios y anaerobios facultativos

Anaerobios estrictos

CARY-BLAIR
AMIES
GLICEROL
SOLUCIN SALINA
AMIES Y DOUGLAS
HAJNA

Shigella y Campylobacter

CARBN ACTIVADO
CAS
REGAN-LOWE
2SP

Streptococcus pyogenes
Bordetella pertussis
Bordetella pertussis
Chlamydia

TRANSGROWN
PIKE
CALDO UREA
CAMPYTIO
SP4

Neisseria gonorrhoeae
Strptococcus pyogenes
Helycobacter pylori
Campylobacter jejuni
Micoplasma

IV.- Condiciones apropiadas para

el transporte de muestras
1.-La orina, las expectoraciones y el material de absceso, se
pueden colocar en frascos estriles de boca ancha.
2.-Los lquidos corporales como el Lquido Cefalorraqudeo
en tubos estriles (la sangre se coloca en frascos
diseados ex profeso).
3.-Los trozos de tejido se pueden colocar en frascos
estriles.

V.-Criterios para el rechazo en

la evaluacin de las muestras
a) Muestras no aptas para su procesamiento:

Punta de sonda foley

Orina de bolsa de sonda

Lquidos coagulados

Cultivos para anaerobios enviados en medio de

transporte inadecuado.
b).-Muestras remitidas en condiciones inadecuadas.
c).-Solicitud de estudios especiales innecesarios.

VI.- MICROSCOPIA
Este procedimiento evidencia lo siguiente:
1.- La presencia de bacterias, cantidad, morfologa y
agrupacin.
2.-Permite evaluar el grado de respuesta inmunolgica
con la presencia de clulas fagocticas, cuyo
quimiotactismo est orientado hacia un morfotipo
bacteriano en particular (Criterios de Bartlett), donde
se observen clulas bacterianas adheridas a la
membrana de los PMN y dentro de las vacuolas
digestivas formadas en el citoplasma de la clulas
inflamatorias.

VI.- Microscopia
3.-La observacin microscpica es el primer paso,
el cual permitir orientar el mtodo a desarrollar
en el estudio bacteriolgico para el diagnstico
clnico.
4.-Se pueden realizar preparaciones en fresco para
la observacin en campo oscuro, ( treponemas y
leptospiras), preparaciones en fresco de
muestras de vagina para la observacin de
clulas indicativas de vaginosis bacteriana.

VII.- Tinciones
1. Simples:
Azul de metileno
Fucsina fenicada
Verde de malaquita

2. Diferenciales:

Gram

Ziehl-Neelsen

Tan Thiam-Hok

Machiavello

Jimnez

VIII.- Tinciones Estructurales:

a) Flagelos
- Rhodes
- Tribondeau
- Leifson
b) Esporas
- Shaeffer-fulton
- Moeller
c) Cpsula
- Hiss
- Tinta china
d) Grnulos metacromticos
- Ernst-Neisser
- Albert
- Loeffler

Tincin Gram
(cultivo fresco)

coco

coco

coco

coco

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

bastn

coco

racimos

racimos

cadenas

tetradas

pares

Crecimiento
aerobio

Crecimiento
anaerobio

Esporas

Movilidad

+o

+o

+o

+o

+ o

+o-

Catalasa

Forma
Agrupacin

Oxidasa

Fermentacin de
glucosa a acido
o a acido+gas
O/F

Micrococcus

+ (o )

Staphylococcus

Streptococcus

Lactococcus

Enterococcus

Leuconostoc

Pediococcus

Aerococcus

Lactobacillus

Clostridium

Bacillus

Alcaligenes

Pseudomonas

Enterobacterias

Aeromonas

Chromobacteriu
m

Neisseria

IX.-Caractersticas fenotipicas
para la identificacin
bacteriana
A).- Criterios Generales:

Requerimientos de Oxigeno (atmsfera) y temperatura

de incubacin.
Morfologa colonial.
Tipo de hemlisis en GS carnero al 5%.
Requerimientos nutricionales.
Produccin de pigmentos.
Tinciones: Afinidad a la tincin de Gram.
Morfologa bacteriana.
Presencia de enzimas.
Reacciones inmunoserolgicas.
Sensibilidad antimicrobiana.

X.- Criterios de Cowan y

Steel
B).

Pruebas de seleccin Primaria :

Reaccin de catalasa
Reaccin de oxidasa
Prueba de movilidad
Pruebas de O/F de carbohidratos
Presencia de Esporas
Tincin de Ziehel Neelsen
Tincin de Gram

XI.-Requerimientos nutricionales
1.-Conocer que suplementos nutricionales que
requiere MO para crecer ptimamente.
2.-Ejemplo: dependencia de factor NAD (V) o
factor Hemina (X) ambos en el gnero
Haemophilus.
3.-Familia Enterobacteraceae: no son organismos
nutricionalmente exigentes.

XII.- Atmsfera
1.-Conocer cuales son los requerimientos de O2
de los MO.
2.-Aerobios.
3.-Microaeroflicos.
4.-Anaerobios facultativos.
5.-Anaerobios estrictos

XIII.- Temperatura
1.-Conocer la
desarrollo.

temperatura

ideal

para

su

2.-Mesoflicos (35 a 37C): la mayoria de las

especies bacterianas de inters clnico.
3.-Termoflicos
(>37C):
Pseudomonas
aeruginosa (41C), Campylobacterias (42C).
4.-Psicroflicos(<ATM): Yersinia enterocoltica
(4C), Listeria monocytogenes (ATM)

Morfologa colonial

Tipo de hemlisis en GS carnero

al 5%

XIV.-Produccin de
pigmentos
1.-Los pigmentos insolubles en agua
incluyen los carotenoides (amarillonaranja), la violacena (violeta o prpura)
y las fenazinas (rojo, castao, marrn).
2.-Los pigmentos hidrosolubles y difusibles
incluyen las fluorescenas (pioverdina),
piocianinas, piorrubina, melanina y otros
varios subproductos pigmentados, que
cambian el color del medio de cultivo.

Pigmentos insolubles en agua

Carotenoides (amarillonaranja)

Fenazinas (rojo, castao, marrn

Pigmentos hidrosolubles y
difusibles

Fluorescenas (pioverdina- piocianinas) Lampara de Wood (UV)

XV.-Tinciones: Afinidad a la
tincin de Gram.

Morfologa bacteriana

XVI.-Reaccin de catalasa
Esta
prueba
detecta
la
presencia
citocromooxidasas en las Micrococcaceae.

de

La prueba se hace con perxido de hidrgeno

(H2O2) al 3% sobre un portaobjetos. La produccin
inmediata y abundante de burbujas indica la
conversin del H202 en agua y oxgeno gaseoso.
La prueba de la catalasa debe realizarse a partir de
un medio que no contenga sangre porque los
eritrocitos pueden producir una reaccin de
catalasa dbil.

Prueba de la catalasa

Reaccin de citocromo oxidasa

Los
citocromo
son
hemoproteinas
que
contienen hierro y actuan
como ltimo eslabn de la
cadena de la respiracin
aerobia
;
transfireren
electrones de Hidrgeno
al
Oxgeno,
con
la
formacin de agua.
El sistema citocromo se
encuentra presente en
microorganismos
aerobios, microaeroflicos
y en algunos anaerobios
facultativos, pero nunca
en anaerobios estrictos.

Dimetil-p-fenilendiamina al 1%

Prueba de movilidad

En agar semislido por gota pendiente

Pruebas de fermentacin
de carbohidratos
1.-El medio OF de Hugh y Leifson contiene
peptona al 0,2% y 1,0% de hidratos de
carbono, de tal forma que la relacin entre
peptona e hidrato de carbono es 1:5, a
diferencia de la relacin 2:1 que existe en los
medios utilizados para fermentacin de
hidratos de carbono.
2.-La disminucin de la peptona minimiza la
formacin de productos de oxidacin a partir de
los aminocidos, que tienden a elevar el pH del
medio y pueden neutralizar los cidos dbiles
producidos por los bacilos no fermentadores.

Medio O/F

Los microorganismos oxidativos

producen cido slo en el tubo
abierto
expuesto
al
oxgeno
atmosfrico.

Los microorganismos
fermentadores producen cido
en ambos tubos.

Medio O/F
Izquierda
tubo
de
OF
inoculado con un organismo
de
metabolismo
no
fermentador y no oxidativo
para la glucosa.
Observe el ligero vire a
alcalino (azul) debido a la
utilizacin
de
proteinas
(peptonas) del medio.

XVII.-Pruebas de fermentacin
de carbohidratos

XVIII.-Presencia de enzimas
Deteccin de enzimas y vas
metablicas

a) RM-VP

b) O.N.P.G.

(KOH + Alfa-naftol).

Prueba de la ONPG (oNitrofenil- -Dgalactopiransido)

Es un compuesto estructuralmente
similar a la lactosa, excepto en que la
glucosa ha sido reemplazada por un
grupo o-nitrofenilo.
Esta prueba permite detectar con mayor
rapidez la fermentacin de la lactosa, al
evidenciar la enzima -galactosidasa
ms rpidamente.

XIX.Reacciones
inmunolgicas

Utilizacin de antisueros especficos para determinar

el fenotipo antignico de grupo y tipo (seroagrupar,
serotipificar)

MARCHAS BACTERIOLGICAS.
1.- Sistema gastrointestinal
1.-Coprocultivo rutina:
A).- Salmonella sp
B).- Shigella sp

2.-Coprocultivo
especfico
A).- E. coli patgenas.
B).- Campylobacter sp.
C).- Vibrios.
D).- Otras entidades

A).- Coprocultivo
Las enfermedades infecciosas del aparato
gastrointestinal representan una de las
principales causas de mortalidad y morbilidad
infantil por la diarrea aguda de nios menores
de cinco aos.
La patognesis de la diarrea involucra a varios
microorganismos como agentes causales,
pertenecientes en su mayora a la familia
Enterobacteriaceae, entre los que destacan:
Salmonella, Shigella, Yersinia y Escherichia coli.

Escherichia coli
Escherichia coli forma parte de la biota
normal, sin embargo las cepas patgenas se
clasifican de acuerdo con su mecanismo de
patogenicidad en seis grupos:
1. Enteropatgena
EPEC
2. Enterohemorrgica EHEC
3. Enterotoxignica
ETEC
4. Enteroagregativa
EaggEC
5. Enteroadherente difusa DAEC
6. EnteroinvasivaEIEC

 Algunas especies de Campylobacter

y Helicobacter se incluyen como
causantes de enfermedad en el
aparato gastrointestinal, al igual que
Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas.

Recoleccin de la muestra
Las muestras se recolectan directamente en un frasco
limpio y de boca ancha con tapa hermtica, al inicio de la
enfermedad y
preferentemente antes de iniciar
tratamiento antimicrobiano.
Cuando se sospecha de la posible recuperacin de
Shigella y Campylobacter, es necesario tomar dos hisopos
rectales impregnados de materia fecal, los cuales se
colocan en medio de transporte Cary-Blair (se pueden
usar otros medios de transporte como Stuart o Amies).

MATERIA FECAL
(MEDIO DE
TRANSPORTE CARYBLAIR)

MAC CONKEY

CALDO SELENITO

XLD

INCUBAR
37C, 24h

INCUBAR
37C, 8 12 h

INCUBAR
37C, 24h

Resembrar en Agar SS VB

Seleccionar colonias Lac(+) y Lac (-).

Resembrar en agar nutritivo para realizar
pbas. bioqumicas

Seleccionar colonias lac (-),

LD(+ -)
y/o produccin de H2S

Identificar colonias
sospechosas de Salmonella
Lac(-)
H2S(+)

AGAR NUTRITIVO
Oxidasa
OF

OX(-)
OF: (+/+)

OX(+ )
OF: (+/+)

Pbas. Bioqumicas:
KIA,ONPG,LD, OD, CIT, SIM
MR-VP, UREA, FD
Serotipificar
AB CLSI

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

E.coli patgenas
Shigella sp
Salmonella spp
Yersinia enterocolitica
Plesiomonas
Aeromonas

AGAR NUTRITIVO
Oxidasa
OF

Pbas. Bioqumicas:
KIA,ONPG,LD, OD, CIT,
SIM MR-VP, UREA, FD
Serotipificar
AB CLSI

HISOPADO
RECTAL CARY
BLAIR

2.-Tracto genitourinario
I.V.U : Urocultivo
Vaginitis

Vaginosis:

Cultivo vaginal

Uretritis:

Cultivo Vaginal

Cultivo sec. uretral

A).- Urocultivo
La orina de personas sanas es estril debido a su vaciado
frecuente, lo cual evita la colonizacin.
La acidez inhibe algunos microorganismos, y en los pacientes
masculinos, la secrecin prosttica contiene espermita y zinc
que impiden el desarrollo de algunas bacterias.
Cuando la orina es turbia debido a la presencia de leucocitos
(piuria), en ocasiones de eritrocitos (hematuria) y de bacterias,
es sugestivo de infeccin de las vas urinarias (IVU).
La bacteriuria puede ser asintomtica o presentarse como una
enfermedad crnica o aguda.

 En la colonizacin de las vas urinaria, intervienen

varios factores predisponentes que pueden ser de
origen local como por ejemplo: la contaminacin
fecal del meato urinario, el cateterismo, la patologa
urinaria congnita o adquirida y el reflujo vesical.
Entre los factores generales se mencionan: la
diabetes mellitus, el transplante de rganos, el
SIDA, el embarazo, la hipertensin arterial y la
terapia con frmacos de amplio espectro.
Escherichia coli es el agente etiolgico en ms del
80% de estas infecciones; ocasionalmente pueden
encontrarse dos o ms especies bacterianas
involucradas.

 La muestra de eleccin, es la primera orina de la

maana; sin embargo en la IVU aguda la carga
bacteriana es representativa a cualquier hora del da.
En pacientes femeninas se indica que deben lavarse
el rea periuretral y la periferia del meato urinario,
utilizando una gasa estril humedecida con agua y
jabn, con movimientos de adelante hacia atrs.

posteriormente se limpiar el rea con una gasa

estril humedecida con agua o solucin salina estril.

la recoleccin de la orina debe hacerse separando los

labios mayores con una mano, la otra mano sostiene
el frasco donde se deposita la muestra.

 A los pacientes masculinos se les indica que se limpien el

glande y la periferia del meato urinario con una gasa
impregnada con solucin salina estril antes de la miccin.
En ambos sexos la muestra debe tomarse por el mtodo
del Chorro medio, que consiste en que el paciente debe
desechar la primera porcin de orina y recolectar la parte
media del chorro en un frasco de boca ancha estril.
En recin nacidos, nios y ancianos la muestra puede
recibirse en una bolsa de plstico estril; las muestras
tomadas en esas condiciones fcilmente se contaminan de
biota fecal, en un resultado positivo debe considerarse la
posibilidad de una contaminacin.

 El criterio que se aplica para evaluar la presencia de

bacterias en la orina es el de Kass (1957) y Sanford (1956),
el cual considera que las bacterias provenientes de las
porciones superiores aparato urinario durante su residencia
en la vejiga, utilizan la orina como medio de cultivo,
alcanzando un poblacin superior a 100,000 UFC/ml de
muestra.
Por el contrario las bacterias que son arrastradas durante la
miccin, nunca llegan a esas cifras por lo que en estos
casos se les considera como contaminantes.
Cuentas menores de 100,000 UFC/ml podran corresponder
a infecciones en las vas superiores en pacientes que han
recibido antimicrobianos, o en aquellos cuya orina est muy
diluida por la terapia hidratante; por ltimo cuentas menores
de 10,000 UFC/ml se toman como contaminantes.

Criterios para el diagnstico de IN

6.5 Infecciones de vas urinarias.
(Sintomticas, cont.....)
Independientemente de los hallazgos de urocultivo:
6.5.1.11 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa, mayor
de 50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.1.12 Cateterismo: ms de 50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.1.13 Puncin suprapbica: cualquier crecimiento es diagnstico.
6.5.1.14 El aislamiento de un nuevo microorganismo en urocultivo
es
diagnstico de un nuevo episodio de infeccin urinaria.
6.5.2 Asintomticas.
Pacientes asintomticos de alto riesgo con un sedimento urinario
que
contenga 10 o ms leucocitos por campo ms cualquiera de los
siguientes:
6.5.2.1 Chorro medio: muestra obtenida con asepsia previa mayor
de 50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.2.2 Cateterismo: mayor de 50,000 UFC/ml (una muestra).
6.5.2.3 Puncin suprapbica: cualquier crecimiento es diagnstico.

ORINA
Homogenizar

DILUIR LA MUESTRA DE ORINA

EN SOLUCION SALINA ESTERIL

DILUCIN 1:100
0.1 ml ORINA+9.9 ml SS ESTERIL
Mezclar

Lectura del Sedimento

Tincin de Gram

Inocular con asa bacterilogica de

0.01 ul o con una pipeta
automatica 10l con una puntilla
esteril

GS 5% u otro medio nutritivo

Estriar de forma masiva 37C x
24 48 hrs
COCOS GRAM POSITIVOS
BACILOS GRAM NEGATIVOS

CONTAR EL NUM DE COLONIAS QUE

DESARROLLARON Y MULTIPLICARLAS
POR EL FACT. DE DIL.
REPORTAR EN UFC/ml

Agar de Mac Conkey con

estria central
37C x 24 48 hrs
BGN
AGAR NUTRITIVO

IDENTIFICAR Y REALIZAR
AB CLSI

B).- Exudado crvico vaginal

En las mujeres con signos y sntomas de infeccin
genital aguda las muestras ms comunes son de
cuello uterino y de uretra.
Este estudio es util para determinar el posible agente
causal de la vaginitis e incluso de la vaginosis
bacteriana.
Las muestras cervicales se obtienen con un
espculo, despus de eliminar el moco cervical con
una torunda seca y esteril.

Agentes potencialmente
patgenos:
Vaginitis
Vaginosis
Neisseria gonorrhoeae
Streptococcus
agalactiae
Candida albicans
Mycoplasmas y
ureaplasmas
Chlamidia
Trichomonas vaginalis

Gardnerella vaginalis
Mobiluncus
Bacteroides
Peptostreptococcus

Toma del producto

Con la paciente en posicin ginecolgica se introducir un
espculo lubricado con agua sol. salina estril.
Recoger la muestra, bajo visin directa, con un hisopo de
dalcrn, de la zona con mayor exudado, o en su defecto, del
fondo del saco vaginal posterior. Repetir la operacin con la
segunda torunda.
Se obtendrn 3 hisopados, uno destinada al estudio
microscpico del Gram, otro para cultivo y el tercero para el
fresco.
El envo de la muestra debe ser inmediato siempre que sea
posible.
El medio de transporte de Stuart-Amies, mantiene viables a
los MO hasta por 3-6 horas.

Mediante el uso de un espejo vaginal estril

lubricado con agua estril, se toman 3 hisopados
de muestrra de la secrecin de fondo de saco y
cervix.

Determinar
pH insito
1er. Hisopo para
laminilla Gram
Tincin de Gram compatible con
vaginosis bacteriana

2do. Hisopo medio de transporte

para cultivo

3er. Hisopo: Observar

Fresco, KOH al 10%
Criterios de Gardner y
De Nugent
Pseudohifas (+)
Prrsitos

Seleccionar medios
de cultivo primarios
GS carnero 5%

CGP
Cadenas
Col.hem.
Cat(-)
TaxoA= R
TSX= R
CAMP(+)

CGP
cadenas
Col. hem.
Cat(-)
PYR(+)
BE(+)
NaCl 6.5 (+)

Streptococcus hem. Gpo. B

Enterococos

GCh TM

Col. Grises, brillantes de DCGN

oxidasa positiva.
Cat(+)
Identificacin de Neisserias
Gilu(+), Mal(-), Fruc(-)
pruebas de sensibilidad.

Neisseria gonorrhoeae

Pruebas de susceptibilidad (CLSI)

Agar Dextrosa Sabouraud

Agar Biggy
Aagr Micosel

TG(+)
Mal(+), Sac(-), Tre(+), Lac(-)
Ure(-)

Candida albicans

C).-Exudado uretral masculino

El diagnstico de gonorrea puede establecerse en los
hombres que se presentan con uretritis supurativa aguda, en
quienes es posible identificar los diplococos intracelulares
gramnegativos.

Cuando la descarga uretral es escasa y los diplococos

intracelulares no aparecen en una muestra al azar, la toma de
la primera muestra de la maana, antes de orinar, suele ser
til.
La incidencia de C. trachomatis excede la de
N.
gonorrhoeae como causa de infecciones supurativas agudas
en los genitales.
Los signos y sntomas son indistinguibles; C. trachomatis
tiende a generar menos exudado y menor concentracin de
neutrfilos segmentados que
N. gonorrhoeae.

 Hasta un 20% de hombres y un 40% de las mujeres

con gonorrea pueden estar coinfectados por
C.
trachomatis.
En muchos casos pueden requerirse procedimientos
de cultivo para recuperar ambos microorganismos, en
particular cuando el tratamiento falla.
Con frecuencia, tanto en hombres como en mujeres la
infeccin es asintomtica, en particular cuando el
agente infeccioso es C. trachomatis.

Toma del producto

Limpiar
cuidadosamente
la
circundante con gasas estriles.

mucosa

Introducir el hisopo suavemente con un

movimiento de rotacin hasta penetrar
unos 2 cm dentro de la uretra (3-5 cm para
la investigacin de Chlamydia trachomatis)
y depositar en el medio 2SP.
Repetir operacin con un segundo hisopo
para
tincin
Gram.
El medio de transporte de Stuart-Amies,
mantiene viables a los MO hasta por 3-6
horas.

3.- Vas respiratorias

A).- Infecciones de las VRS
Exudado faringeo : Diagnstico de Faringo
amigdalitis, amigdalitis, epiglotitis.
Portadores de patgenos oportunistas Exudado
nasal.
Exudado Otico: Diagnstico de otitis media.

B).- Infecciones de las VRI

Cultivo de Expectoracin.
Cultivo de Lavado Bronco Alveolar.
Cepillado Bronquial (CB).

A).- Exudado faringeo

Este estudio bacteriolgico esta encaminado como
una herramienta para el diagnostico confirmatorio
de la faringo amigdalitis de origen pigena,
La confirmacin de patologas complejas, tales
como la difteria, la angina de Vincent, la faringitis
clamidiana y micoplsmica, as como las
infecciones virales, no pueden ser evidenciadas
por este procedimiento.
El clnico debe de formular el cuadro diagnstico
complementario cuando esto sea necesario.

 Los microbilogos deben orientar a los

mdicos para realizar un diagnstico
adecuado
entre
"investigacin
de
estreptococos" y cultivos de rutina.
La confusin surge cuando los mdicos
ordenan cultivos de rutina de garganta para
faringitis agudas y el laboratorio reporta la
presencia de Staphylococcus aureus,
Enterobacterias y BGN no fermentadores,
Haemophilus
influenzae
y
otros
microorganismos
que
no
causan
faringoamigdalitis primaria.

 Bajo visin directa, con la ayuda de un depresor

lingual, se tocar con un hisopo de dacrn en
todas las partes con exudado, membranas o
inflamacin.
Se deben frotar las criptas tonsilares y la faringe
posterior.
No tocar nunca la mucosa oral, lengua o vula.
Se investigar rutinariamente la presencia de
Streptococcus beta-hemoltico del grupo A
(S. Pyogenes), la posible presencia de los
Streptococcus beta-hem. De los grupos C y G.

 Se le solicita al paciente
que abra bien la boca y
que emita un "ah".
La lengua se abate
suavemente con una
esptula y se gua un
hisopo hacia la faringe
posterior.
La mucosa detrs de la
vula y entre los pilares
amigdalinos
es
recolectada
con
un
movimiento suave de
barrido de atrs hacia
delante.

EXUDADOFARINGEO
FARINGEO
EXUDADO
GSde
decarnero
carneroal
al5%
5%
GS
Sembrarpor
porestra
estracruzada
cruzada
Sembrar
Picarel
elmedio
medio3-5
3-5ocasiones
ocasiones
Picar
Incubaren
enCO2
CO2al
al3%
3%
Incubar
2448
48hrs
hrs37C
37C
24

CGP
CGP
Cadenas
Cadenas
Colhem.
hem.
Col
Cat(-)
Cat(-)

BAC(S)
(S) 0.04U
0.04U
BAC
TSX(R)
(R)1.25/23.75
1.25/23.75ug
ug
TSX
CAMP
(-)
CAMP (-)
GrupoA
A
Grupo
PYR
(+)
PYR (+)

BAC(S)
(S) 0.04U
0.04U
BAC
TSX(S)
(S)1.25/23.75
1.25/23.75ug
ug
TSX
CAMP
(-)
CAMP (-)
PosibleGrupo
GrupoC
C
Posible
PYR
(-)
PYR (-)
Seroagrupar preferentemente
Realizar susceptibilidad (CLSI)

BAC(R)
(R) 0.04U
0.04U
BAC
TSX
(S)
1.25/23.75
ug
TSX (S) 1.25/23.75 ug
CAMP(-)
(-)
CAMP
Posible
GrupoG
G
Posible Grupo
PYR(-)
(-)
PYR

B).- Cultivo nasal

Es la muestra indicada para la investigacin de
Bordetella pertussis y de otros patgenos
oportunistas (S. pneumoniae, H. influenzae, Neisseria
meningitidis).
En pacientes inmuno comprometidos se evaluara la
colonizacin de:
K. pneumoniae subesp. Rhinoscleromatis
K. pneumoniae subesp. ozaenae

Toma del producto

Las muestras nasofarngeas se obtienen usando
iluminacin por encima del hombro.
Con el pulgar de la mano, se eleva delicadamente la
punta de la nariz, se humedece la punta de un hisopo
nasofarngeo delgado de alambre flexible con agua o
solucin salina estril y se lo inserta con suavidad en
uno de los orificios nasales.
El hisopo se gua hacia atrs y hacia arriba a lo largo del
septo hasta encontrar resistencia, que indica que se ha
llegado a la faringe posterior, se retira con delicadeza y
se deposita en el medio de transporte Stuart.

Secrecin nasal
Toma de ambas narinas

GS al 5%
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

CGP racimos
Col. hem
Cat(+)
Furazolidona(S)
Oxidasa (-)

Coag(+)
Manitol(+)
Lac(+)

Staphylococcus aureus
AB. CLSI
Solo en manejadores
De alimentos

CGP
Cat(-)

DCGP
Col.hem
Taxo P(S)
16mm
OPT 5ug
Sol. en bilis (+)

GCh
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

Mac Conkey
24-48 Hrs 37C

BGN LAC (+ -)

BGN
Pleomrficos
F(V) F(X)

F(V) (+)
F(X) (+)
IND
ORN
URE

F(V) (+)
F(X) (-)
IND
ORN
URE

Agar Dextrosa Sabouraud

(Opcional)

INV. Hongos ms comunes

En pacientes
Inmunodeprimidos

Agar Nutritivo
OX
OF
Pigmentos

OX(-)
OF: (+/+)

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

S. pneumoniae
Serotipificar
AB. CLSI

H. influenzae
Serotipificar
AB CLSI

H. parainfluenzae
Serotipificar
AB CLSI

FENOTIPO
KIA, ONPG,RM-VP
Citrato,LD,OD,SIM,
URE, FD

K. Rhinoscleromatis
K. ozaenae

BGNF

C).- Otitis media

Se define otitis media
como la presencia de
exudado en la cavidad
media del odo.
Los lactantes y nios
pequeos son los ms
propensos a padecer
otitis media,

Los
dos
principales
patgenos son:
Cocos gram positivos como:
Streptococcus pneumoniae,
Streptococcus pyogenes,
Staphylococcus aureus.

Bacilos Gram negativos

como:
E.
coli
o
Pseudomonas
aeruginosa,Haemophilus
influenzae y anaerobios

Cultivo de secrecin de odo

El Cultivo bacteriolgico de aspirado de odo

medio adecuadamente recolectados, permite
determinar cules son los microorganismos
responsables de la otitis media aguda.

La timpanocentesis para obtener lquido para

cultivos, solo es til si existe exudacin.

Puede ser necesario el cultivo simultneo e

LCR y sangre, si existen signos y sntomas
sistmicos.

Exudado de odo
Toma de ambas narinas

GS al 5%
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

CGP racimos
Col. hem
Cat(+)
Furazolidona(S)
Oxidasa (-)

Coag(+)
Manitol(+)
Lac(+)

Staphylococcus aureus
AB. CLSI
Solo en manejadores
De alimentos

CGP
Cat(-)

DCGP
Col.hem
Taxo P(S)
16mm
OPT 5ug
Sol. en bilis (+)

GCh
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

Mac Conkey
24-48 Hrs 37C

BGN LAC (+ -)

BGN
Pleomrficos
F(V) F(X)

F(V) (+)
F(X) (+)
IND
ORN
URE

F(V) (+)
F(X) (-)
IND
ORN
URE

Agar Dextrosa Sabouraud

(Opcional)

INV. Hongos ms comunes

En pacientes
Inmunodeprimidos

Agar Nutritivo
OX
OF
Pigmentos

OX(-)
OF: (+/+)

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

S. pneumoniae
Serotipificar
AB. CLSI

H. influenzae
Serotipificar
AB CLSI

H. parainfluenzae
Serotipificar
AB CLSI

FENOTIPO
KIA, ONPG,RM-VP
Citrato,LD,OD,SIM,
URE, FD

K. Rhinoscleromatis
K. ozaenae

BGNF

D).-Cultivo de expectoracin
Las infecciones del tracto respiratorio inferior
son de las ms frecuentes dentro del
conjunto de las infecciones,tanto entre las
adquiridas en el ambiente comunitario como
en el medio nosocomial.
La bronquitis crnica se define, como
proceso caracterizado por un descenso
los flujos espiratorios que no cambian
manera significativa tras varios meses
seguimiento.

un
de
de
de

 El diagnstico viene sugerido por el

cuadro clnico, por lo que el cultivo no es
la herramienta de Dx de mayor utilidad
para esta patologa.
Un gran nmero de los pacientes son
fumadores,o estn expuestos de forma
prolongada a substancias nocivas para la
mucosa bronquial, y que refiere tos y
expectoracin habitual; segn la definicin
clsica, durante un mnimo de 3 meses y
hasta por dos aos consecutivos.

Esputo inducido

No es el tipo de muestra ms representativa

de las inefcciones VRI, por su mezcla con
secreciones procedentes de todo el arbol
traqueo-bronquial y con la flora saprfita de
la orofaringe.

El resultado depender en gran medida de

su correcta obtencin, control de calidad
antes de iniciar su proceso, tipo de agente
que se pretenda detectar.

Obtencin del
Enjuagar la boca con agua estril o solucin salina.
producto.
Obtener
el esputo tras una expectoracin profunda,
preferentemente matinal.
De no producirse expectoracin espontnea, puede
inducirse el esputo con nebulizaciones de suero
fisiolgico estril (15 ml durante 10 minutos.
Recolectar en un frasco de boca ancha esteril por lo
menos 2 ml de la secrecin.
Procesar lo antes posible.
Muestra de calidad =>25 PMN CE <=10 en promedio de
30 campos a 10x.

Criterios para el diagnstico de IN

Infecciones del tracto respiratorio.
6.1.2 Infecciones

de vas respiratorias bajas. CIE-10 (J12-J18, J20, J86.9, J98.5).

6.1.2.1 Neumona. CIE-10 (J12-J18).

Cuatro criterios hacen el diagnstico.
Criterios 6.1.2.1.4 y 6.1.2.1.5
son suficientes para el diagnstico de neumona.
6.1.2.1.1 Fiebre, hipotermia o distermia.
6.1.2.1.2 Tos.
6.1.2.1.3 Esputo purulento o drenaje purulento a travs de cnula endotraqueal
que al examen microscpico en seco dbil muestra <10 clulas epiteliales
y > 20 leucocitos por campo.
6.1.2.1.4 Signos clnicos de infeccin de vas areas inferiores.
6.1.2.1.5 Radiografa de trax compatible con neumona.
6.1.2.1.6 Identificacin de microorganismo patgeno en esputo, secrecin
endotraqueal o hemocultivo.

Muestra de Expectoracin

Gram: Criterios de
Murray-Bartlett
PMN =>25 CE <=10

GS al 5%
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

CGP racimos
Col. hem
Cat(+)
Furazolidona(S)
Oxidasa (-)

Coag(+)
Manitol(+)
Lac(+)

Staphylococcus aureus
AB. CLSI

CGP
Cat(-)

DCGP
Col.hem
Taxo P(S)
16mm
OPT 5ug
Sol. en bilis (+)

ECN

Mac Conkey
24-48 Hrs 37C

BGN LAC (+ -)

BGN
Pleomrficos
F(V) F(X)

F(V) (+)
F(X) (+)
IND
ORN
URE

Agar Dextrosa Sabouraud

(Opcional)

INV. Hongos ms comunes

Agar Nutritivo
OX
OF
Pigmentos

F(V) (+)
F(X) (-)
IND
ORN
URE

OX(-)
OF: (+/+)

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

OX(+)
OF: (+/+)

S. pneumoniae
Serotipificar
AB. CLSI

Coag(-)
Manitol (V)
Lac(V)

GCh
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

H. influenzae
Serotipificar
AB CLSI

H. parainfluenzae
Serotipificar
AB CLSI

Enterobacterias

FENOTIPO
KIA, ONPG,RM-VP
Citrato,LD,OD,SIM,
URE, FD

BGNF

Vibronaceae

E).- Neumona adquirida

en la comunidad (NAC).

Constituye una causa muy importante de morbilidad y

mortalidad.
La mortalidad varia desde el 5% a ms del 30%, segn
el agente causal y diversos factores de riesgo
individuales.
En los pases industrializados, la NAC es la primera
causa infecciosa de muerte y la sexta de mortalidad
general.
El nmero de personas que fallecen cada ao en el
mundo como consecuencia de esta infeccin se cifra en
aproximadamente 5 millones.

F).- Cultivo de LBA CB

Neumona nosocomial: La mayora de los
estudios consideran la neumona nosocomial
como la segunda causa de las infecciones
adquiridas en el hospital.
La neumona nosocomial se adquiere a travs
de tres mecanismos: la aspiracin, la
inhalacin de aerosoles y la diseminacin
hematgena a partir de otro foco de sepsis.
La flora orofarngea normal est formada
principalmente por cocos grampositivos.

 La colonizacin de la orofaringe por BGN se observa en

menos del 10% de los individuos sanos, aumenta con
hospitalizaciones prolongadas y alcanza el 60-75% en
enfermos crticos ingresados en unidades crticas.
La
implicacin
de
los
(enterobacterias como Klebsiella
coli, Serratia marcescens,
Pseudomonas aeruginosa) en la
muy frecuente (20-60%).

bacilos
gramnegativos
pneumoniae, Escherichia
Enterobacter spp., y
neumona nosocomial es

En el enfermo ventilado, Staphylococcus aureus se situara

en segundo lugar (10-30%), mientras que otros
microorganismos ms prevalentes en la comunidad, como
Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae o
Chlamydia pneumoniae seran menos frecuentes.

LBA CB

Gram: Criterios de
Murray-Bartlett
PMN =>25 CE <=10
Presencia de cel. ciliadas
GS al 5%
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

CGP racimos
Col. hem
Cat(+)
Furazolidona(S)
Oxidasa (-)

Coag(+)
Manitol(+)
Lac(+)

Staphylococcus aureus
AB. CLSI

CGP
Cat(-)

DCGP
Col.hem
Taxo P(S)
16mm
OPT 5ug
Sol. en bilis (+)

ECN

Mac Conkey
24-48 Hrs 37C

BGN LAC (+ -)

BGN
Pleomrficos
F(V) F(X)

F(V) (+)
F(X) (+)
IND
ORN
URE

Agar Dextrosa Sabouraud

(Opcional)

INV. Hongos ms comunes

Agar Nutritivo
OX
OF
Pigmentos

F(V) (+)
F(X) (-)
IND
ORN
URE

OX(-)
OF: (+/+)

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

OX(+)
OF: (+/+)

S. pneumoniae
Serotipificar
AB. CLSI

Coag(-)
Manitol (V)
Lac(V)

GCh
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

H. influenzae
Serotipificar
AB CLSI

H. parainfluenzae
Serotipificar
AB CLSI

Enterobacterias

FENOTIPO
KIA, ONPG,RM-VP
Citrato,LD,OD,SIM,
URE, FD

BGNF

Vibronaceae

Muestras sistmicas

LCR
Sangre
Mdula sea
Lquidos diversos:
a) L. Pleural
b) L. Sinovial
c) L.Peritonial

4.- Lquido cefalorraqudeo (LCR)

El lquido cefalorraqudeo (LCR) es la muestra clnica
representativa cuando hay sospecha de meningitis
sptica.
Los agentes infecciosos ms comunmente identificados
incluyen
N. meningitidis, S. pneumoniae , H.
influenzae, S. agalactiae
Otros agentes menos frecuentes son: Enterobacterias,
C. neoformans, C. albicans, algunos BGNF, S. aureus
entre otros.

Obtencin de lquido
cefalorraqudeo (LCR)

La coleccin del LCR solamente debe ser

tomada por personal especializado y bajo
condiciones de estricta asepsia.
Por lo general, se sacan tres tubos de LR
para qumica, microbiologa y citologa.
Si solamente hubiera disponible un tubo,
este debe enviarse al laboratorio de
microbiologa para su inmediato anlisis.

Transporte de las
muestras de LCR
Enviar inmediatamente al laboratorio de
microbiologa para su anlisis (en un
plazo no mayor de 1 hora a partir del
momento de la obtencin de la muestra
No refrigerar ni exponer
extremo o a la luz solar.

calor

LCR
Centrifugar
el LCR
3000 RMP/15min
SEDIMENTO:
Tinciones
Gram
Ziehl Neelsen
Tinta china
GCh
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

GS al 5%
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

CGP racimos
Col. hem
Cat(+)
Furazolidona(S)
Oxidasa (-)

CGP
Cat(-)

Coag(+)
Manitol(+)
Lac(+)

DCGP
Col.hem
Taxo P(S)
16mm
OPT 5ug
Sol.en bilis (+)

Staphylococcus aureus
AB. CLSI

S. pneumoniae
Coag(-)
Manitol (V)
Lac(V)

Novobiocina (S)
16mm

S. epidermidis
AB CLSI

Serotipificar
AB. CLSI

Novobiocina (R)
<16mm
S. saprophyticus

CGP
Col. hem
Cadenas cortas
Taxo A (R)
SXT(R)
CAMP (+)

S. agalactiae

BGN
Pleomrficos
F(V) F(X)

F(V) (+)
F(X) (+)
IND
ORN
URE

F(V) (+)
F(X) (-)
IND
ORN
URE

Mac Conkey
24-48 Hrs 37C

DCGN
Cat(+)
OX(+)
Glu(+)
Mal(+)
Fru(-)

Serotipificar
AB CLSI

Agar Dex. Sabouraud

(Opcional)

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos
ms comunes

Agar Nutritivo
OX
OF
Pigmentos

Neisseria
meningitidis
AB CLSI
OX(-)
OF: (+/+)

Seroagrupar
AB CLSI

H. influenzae

Sobrenadante
Ag capsulares:
N. meningitidis,
H. influenzae,
S. pneumoniae,
S. del gpo.B,
Escherichia coli.

H. parainfluenzae
Serotipificar
AB CLSI

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

OX(+)
OF: (+/+)

FENOTIPO
KIA, ONPG,RM-VP
Citrato,LD,OD,SIM,
URE, FD

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

5.- Sangre (Hemocultivo)

El estudio bacteriolgico de la
sangre
debe
realizarse
principalmente en pacientes
con neumona, meningitis o
fiebre de origen desconocido,
entre otros sndromes.

DEFINICION
Bacteriemia: es la presencia de
bacterias viables en el torrente
sanguneo,
evidenciada
por
la
obtencin de cultivos en sangre, sea
por puncin venosa o por aspiracin a
travs de un catter intravascular.

DEFINICION (NOM-045-SSA22005 )
Este diagnstico se establece en un paciente con
fiebre, hipotermia o distermia con hemocultivo
positivo.
El diagnstico de bacteriemia nosocomial (BN)
puede darse aun en pacientes con menos de 48
horas de estancia hospitalaria si se les realizan
procedimientos de diagnstico invasivos o reciben
terapia intravascular.

Interpretacin del Hemocultivo Positivo.

Un hemocultivo positivo para Gramnegativos,
Grampositivos u hongos es suficiente para hacer el
diagnstico.
En caso de aislamiento de un bacilo Grampositivo o
estafilococo coagulasa-negativo, puede considerarse
bacteriemia si se cuenta con dos o ms de los
siguientes criterios:
Alteraciones hemodinmicas.
Trastornos respiratorios.
Leucocitosis o leucopenia no inducida por frmacos.
Alteraciones de la coagulacin (incluyendo trombocitopenia).
Aislamiento del mismo microorganismo en otro sitio anatmico.

Los grmenes identificados como causales de

Bacteriemia Nosocomial segn la bibliografa
internacional son principalmente:
1.- Cocos gram positivos:
3.- Bacilos
Estafilococo Coagulasa-Negativo
Gramnegativos:
Staphylococcus aureus
Pseudomonas spp
Enterococcus spp.
E. coli
2.- Hongos levaduriformes:
Candida spp

RHOVE-DGE

Klebsiella pneumoniae
Enterobacter cloacae
Acinetobacter spp
Serratia spp

Material necesario
Guantes, jeringuilla, aguja, ligadura,
torundas,
contenedor
de
punzocortantes, botella de cultivo,
tintura de yodo, alcohol isoproplico al
70%.
El tamao de la aguja depender del
lugar de la del tamao de la vena y la
edad del paciente.

Venopucin
1) Seleccione el brazo y aplique el torniquete para restringir el paso de
la sangre venosa.
2) Normalmente se selecciona la vena ms prominente para la puncin.
3) Limpie completamente la piel con alcohol al 70%; y a continuacin
limpie con solucin yodo povidona, frotando el rea seleccionada y
deje secar.
4) Introduzca en la vena la aguja con el bisel hacia arriba. Una vez que
la vena se haya canalizado, extraiga la sangre jalando el mbolo de
la jeringuilla de manera lenta y con continuidad.
5) Una vez que se ha obtenido la cantidad de sangre necesaria, retire
el torniquete y coloque un algodn con alcohol sobre el sitio de
Insercin.
6) Retire la aguja y haga que el paciente sostenga firmemente el
algodn hasta que cese el sangrado.
7) Inocule el medio de cultivo con los volmenes de sangre que
recomienda el fabricante.

Sangre
Inoculacin de la botella
Incubar a 35C
Monitoreo de produccin
consumo de gas,
hemlisis y turbidez
Durante las 6 -18hrs posteriores
Incubando la botella 35C
Monitoreo de produccin
consumo de gas,
hemlisis y turbidez
Diariamente si se mantiene negativo
Subcultivar en Agar Chocolate
Incubar a 35-37C 24 48 y realizar tincin de Gram
Directo de la botella
Repetir la operacin cda 3er. da

Cultivo (+)

ID. Bacteriana
AB CLSI

Cultivo (-)

Descartar el frasco si despus de 7 das

de incubacin
no se compruba positivo

Mdula sea
Inoculacin de la botella
Incubar a 35C

Monitoreo de produccin
consumo de gas,
hemlisis y turbidez
Durante las 6 -18hrs posteriores
Incubando la botella 35C

Monitoreo de produccin
consumo de gas,
hemlisis y turbidez
Diariamente si se mantiene negativo
Subcultivar en Agar Chocolate
Incubar a 35-37C 24 48 y realizar tincin de Gram
Directo de la botella
Repetir la operacin cda 3er. da

Cultivo (+)

ID. Bacteriana
AB CLSI

Cultivo (-)

Descartar el frasco si despus de 7 das

de incubacin
no se compruba positivo

LIQUIDOS
Centrifugar
3000 RMP/15min
SEDIMENTO:
Tinciones
Gram
Ziehl Neelsen

GCh
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

GS al 5%
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

CGP racimos
Col. hem
Cat(+)
Furazolidona(S)
Oxidasa (-)

CGP
Cat(-)

Coag(+)
Manitol(+)
Lac(+)

DCGP
Col.hem
Taxo P(S)
16mm
OPT 5ug
Sol.en bilis (+)

Staphylococcus aureus
AB. CLSI

S. pneumoniae
Coag(-)
Manitol (V)
Lac(V)

Novobiocina (S)
16mm

S. epidermidis
AB CLSI

Serotipificar
AB. CLSI

Novobiocina (R)
<16mm
S. saprophyticus

CGP
Col. hem
Cadenas cortas
Taxo A (S)
SXT(R)
CAMP (-)

S. pyogenes

BGN
Pleomrficos
F(V) F(X)

F(V) (+)
F(X) (+)
IND
ORN
URE

F(V) (+)
F(X) (-)
IND
ORN
URE

Mac Conkey
24-48 Hrs 37C

DCGN
Cat(+)
OX(+)
Glu(+)
Mal(+)
Fru(-)

Serotipificar
AB CLSI

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos
ms comunes

Agar Nutritivo
OX
OF
Pigmentos

Neisseria
meningitidis
AB CLSI
OX(-)
OF: (+/+)

Seroagrupar
AB CLSI

H. influenzae

Agar Dex. Sabouraud

(Opcional)

H. parainfluenzae
Serotipificar
AB CLSI

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

OX(+)
OF: (+/+)

FENOTIPO
KIA, ONPG,RM-VP
Citrato,LD,OD,SIM,
URE, FD

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

6.- Piel y tejidos blandos

Cultivo de secrecin de herida

Cultivo de absceso
Cultivo para anaerobios

A).- Cultivos de secrecin de

Heridas, lceras y abscesos
Lavar cuidadosamente la superficie de la herida.
La aspiracin percutnea requiere una desinfeccin severa,
previa similar a la realizada en la toma de hemocultivos.
Recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando
preferentemente de zonas profundas.
Esta tcnica tambin es adecuada para obtener muestras de
celulitis, lceras, escaras o abscesos abiertos y heridas
superficiales.
Cuando la muestra sea insuficiente, instilar solucin salina
estril y aspirarlo nuevamente en la jeringa.
Cuando los procedimientos anteriores no sean factibles podr
efectuarse un frotis de las partes profundas de la herida con
un hisopo para tincin de Gram.

Criterios para el diagnstico de IN

6.8 Infeccin de piel y tejidos blandos.
6.8.2 Infecciones de tejidos blandos. CIE-10 (L04, L08).
Fascitis necrosante, gangrena infecciosa, celulitis, miositis y linfadenitis.
Con tres o ms de los siguientes criterios:
6.8.2.1 Dolor localizado espontneo o a la palpacin.
6.8.2.2 Inflamacin.
6.8.2.3 Calor.
6.8.2.4 Rubor, palidez o zonas violceas.
6.8.2.5 Crepitacin.
6.8.2.6 Necrosis de tejidos.
6.8.2.7 Trayectos linfangticos.
6.8.2.8 Organismo aislado del sitio afectado.
6.8.2.9 Drenaje purulento.
6.8.2.10 Absceso o evidencia de infeccin durante la ciruga o
por examen histopatolgico.

Heridas, abscesos
lceras
GRAM
Respuesta inflamatoria

Zona de necrosis
proteoltica
GCh
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

GS al 5%
al 5%
CO2 al 5%
24-48hrs 37C

CGP racimos
Col. hem
Cat(+)
Furazolidona(S)
Oxidasa (-)

CGP
Col. hem
Cadenas cortas
Taxo A (S)
SXT(R)
CAMP (-)

Coag(+)
Manitol(+)
Lac(+)

S. pyogenes
Staphylococcus aureus
AB. CLSI

Seroagrupar
AB CLSI

E. corrodens
Serotipificar
AB

Coag(-)
Manitol (V)
Lac(V)

Novobiocina (S)
16mm

S. epidermidis
AB CLSI

Novobiocina (R)
<16mm
S. saprophyticus

BGN
bipolares
Cat(+)
OX(+)
Glu(+)
OF(+/ -))

BGN
Pleomrficos

Fositas
Cat(-)
OX(+)
OF(-/ -))
LD(+)
OD(+)

Mac Conkey
24-48 Hrs 37C

F(V) (-)
F(X) (-)
IND
ORN
URE

Agar Dex. Sabouraud

(Opcional)

BGN LAC (+ -)

INV. Hongos
ms comunes

Agar Nutritivo
OX
OF
Pigmentos

Pasteurella sp
AB CLSI
OX(-)
OF: (+/+)

H. aphrophilus
Serotipificar
AB

OX(+ -)
OF: (+/-)
OF: (-/-)

OX(+)
OF: (+/+)

FENOTIPO
KIA, ONPG,RM-VP
Citrato,LD,OD,SIM,
URE, FD

Enterobacterias

BGNF

Vibronaceae

B).- Cultivo de catter

Desinfectar con alcohol una zona de piel de unos 10 cm
correspondiente a la zona de entrada del catter.
Hacerlo en forma de crculos comenzando par el centro.
Repetir la misma operacin, pero con el alcohol iodado o
iodopovidona.
Retirar el catter con la mxma asepsia.
Con pinzas y las tijeras estriles, cortar los 3 cm distales del
catter que corresponden a la porcin intravascular.
Introducir el segmento de catter en un recipiente estril
correctamente identificado.

Criterios para el diagnstico de IN

Bacteriemias.
6.9.6 Bacteriemia relacionada a lneas y terapia intravascular.
Hemocultivo positivo perifrico y a travs del catter con dos o ms de los
siguientes criterios:
6.9.6.1 Relacin temporal entre la administracin de terapia
intravascular y la aparicin de manifestaciones clnicas.
6.9.6.2 Ausencia de foco evidente.
6.9.6.3 Identificacin de contaminacin de catter o solucin endovenosa.
6.9.6.4 Desaparicin de signos y sntomas al retirar el catter o la
solucin sospechosa.
6.9.6.5 Cultivo de punta de catter >15 UFC/ml.

Cateter 3cm
Mtodo de Maki

AGAR NUTRTIVO
Rodarlo sobre toda la
Superficie del agar

Caldo BHI

Distribuir con una asa

bacterilogica en estria masiva

Incubar por 24 -48hrs Hrs

35 37C

Incubar de 8 a 12 Hrs
35 37C

Agar Nutritivo
35 - 37C x 24 48 hrs
COCOS GRAM POSITIVOS
BACILOS GRAM NEGATIVOS
BGN
AGAR NUTRITIVO
<15 UFC no representativo
=>15 UFC Representativo

IDENTIFICAR Y REALIZAR
AB CLSI