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1865
1865 Medel
Medel
1902
Boveri
y
1902
Boveri
y
proponen
proponen que
que los
los
hereditarios
hereditarios estn
estn
cromosomas
cromosomas
1910
confirma
1910
confirma
Teora
Teora cromosmica
cromosmica
de
de la
la herencia
herencia
Sutton,
Sutton,
factores
factores
en
en los
los
Principio
transforma
nte
Retoman
principio
transformante
e
identifican DNA como
molcula
de
la
transformacin
bacteriana
DNA
Propuesto en 1953
Describe como pareja de
hebras que se entrelazan
Cadenas
formadas
de
polinucletidos
Dos
Dos cadenas
cadenas de
de polinuecletidos
polinuecletidos enrollados
enrollados
sobre
sobre un
un eje
eje comn
comn
Las
Las bases
bases purina
purina y
y pirimidina
pirimidina estn
estn en
en el
el
interior,
interior, mientas
mientas que
que las
las unidades
unidades de
de fosfato
fosfato
y
y desoxirribosa
desoxirribosa se
se encuentran
encuentran en
en el
el exterior
exterior
Las
Las dos
dos cadenas
cadenas permanecen
permanecen unidas
unidas por
por
puentes
puentes de
de hidrogeno
hidrogeno
La
La adenina
adenina siempre
siempre esta
esta emparejada
emparejada con
con la
la
guanina
guanina y
y la
la citosina
citosina con
con la
la timina
timina
Sntesis
Sntesis
proteica
proteica
Replicaci
Replicaci
n
n
Caractersticas
hereditarias
transmitidas por transcripcin del
DNA
IMPORTANCIA
BIOLGICA DEL DNA
REPLICACIN DE DNA
Hiptesis de replicacin:
Extraccin de
DNA
Lisis celular
Eliminacin de protenas
Enzimas proteolticas: proteinasa K.
Algunos protocolos utilizan para la lisis
El Ditiotreitol o DTT
Sirve para desproteger al ADN
Este reduce los puentes disulfuro de las
protenas
Muchas veces la reduccin de los puentes
disulfuro se da por una desnaturalizacin
esta puede ser a altas temperaturas, un
agente desnaturalizador como hidrocloruro
de guanidinio a 6M, urea 8 M o de
dodecilsulfato de 1%
Eliminacin de RNA
Digestin
del
RNA
con
ARNasas, como la ribonucleasa
A de pncreas de bovino.
a
cabo
despus
extraccin del DNA.
de
la
Eliminacin de protenas
Solventes
orgnicos:fenol-cloroformo-alcohol
isoamlico
Fenol: bidestilado, equilibrado y protegido
contra la oxidacin mediante la adicin de 8hidroxiquinolina.
Cloroformo: se le adiciona alcohol isoamlico
(24:1), para prevenir la produccin de espuma
Concentracin de DNA
Precipitacin
TARJETAS
WHATMAN
Las tarjetas FTA contienen
sustancias qumicas que lisan
clulas,
desnaturalizan
protenas y protegen los cidos
nucleicos de las nucleasas, del
dao oxidativo y el dao
causado por la radiacin UV.
Los cidos nucleicos quedan
capturados en la matriz de
celulosa de la tarjeta, los
detritos
celulares
son
eliminados con reactivo de
purificacin y agua libre de
nucleasas.
prenatal
o
deteccin
de
portadores sanos de enfermedades genticas
Enfermedad de
Duchenne
Enfermedad de
Huntington
Drepanocito
infecciosas
Estudio
Criminalstica
Objetivo
Que
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LEER EN EL ESPECTROFOTMETRO:
260 nm: ABSORCIN DEL ADN
230 Y 280 nm: ABSORCIN DE ENLACE PEPTDICO Y AMINOCIDOS
AROMTICOS
21
CON
LA
CLAVE
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REFERENCIAS
Guyton A. Fisiologa mdica.11 ed. Madrid: Elevier,
2006.
Passarge. Gentica: texto y atlas: mdica
panamericana,2010.
Oliva R. Gentica mdica.3 ed, Barcelona: Ediciones
universidad ,2004.
Hernndez Chavarra Francisco, fundamentos de
epidemiologia: el arte detectivesco de la investigacin
epidemiolgica, San Jos, C.R: EUNED, 2002.
Orfila 4, IV jornadas anuales sociedad espaola
medicina legal y forense, Cdiz, Espaa: 1990.
Concepcin J Puerta B y Claudia P. Uruea P, practicas
de biologa molecular, Espaa: Editorial Pontificia
Universidad Javeriana.