CONTROLE DOS MICRORGANISMO

PELA AO DOS AGENTES FSICOS E

QUMICOS

Os seguintes termos so usados para

descrever os processos fsicos e os agentes
qumicos destinados ao controle dos
microrganismos:

DESINFETANTE um agente que mata as

formas
vegetativas,
mas
no,
necessariamente as formas esporuladas dos
microrganismos patognicos.
Desinfeco o processo de destruio dos
agentes infecciosos, pode usar substncia
qumica,
radiao
ultra-violeta,
gua
fervente ou vapor para tratar objetos
inanimados.

ANTISSPTICO
semelhante
ao
desinfetante, previne o crescimento ou ao
de microrganismos, pela destruio dos
mesmos ou pela inibio de seu crescimento
ou atividade.
Usualmente est associado com substncias
aplicadas aos seres vivos, pessoas ou
animais.

SANEANTE um agente que reduz a

populao

microbiana

at

nveis

considerveis, de acordo com as exigncias

de sade pblica.

GERMICIDA o agente que mata os

microrganismos,

so

chamados

de

microbicida. Bactericida, viricida e fungicida

indicam o tipo de microrganismo destrudo.
MICROBISTICO apenas inibi o crescimento
dos

microrganismos

bacteriosttico)

(fungisttico

ou

ESTERILIZAO o processo pelo qual os

microrganismos

so

mortos,

inativados

irreversivelmente ou retirados de um material

ou

suspenso,

esporuladas.

inclusive

as

formas

AGENTES FSICOS

Os mtodos fsicos mais frequentes so:

Temperatura
Radiao ultravioleta
Radiao ionizantes
Filtrao

Temperatura
O calor o mtodo mais eficiente para matar
microrganismos.

Pode ser calor: seco ou mido.

Calor Seco:
Age promovendo uma
componentes do protoplasma.

oxidao

Tem baixa capacidade de penetrao.

Menos eficiente que o calor mido.

de

s temperaturas necessrias para a

esterilizao so 160-180C por uma ou duas
horas.

Emprega-se para vidraria, leos ou ps.

A flambagem a mais usual.

Bico de Bunsen

Calor mido:
Age promovendo a desnaturao de protenas
e dissoluo dos lipdeos.

mais eficiente que o calor seco.

A condio mais usada para esterilizao

vapor de gua aquecido 120C, sob presso
de 1 atmosfera
durante 15-20 minutos
(autoclave).

A pasteurizao consiste no aquecimento a

60C por 30 minutos, seguido de resfriamento
brusco (no esterilizao).

ESTERILIZAO EM AUTOCLAVES
Usada para esterilizao de reatores pequenos
(30 L), vidrarias, meios de cultura, etc.

Modo de operao:
Completar

o nvel de gua

Colocar

o material na autoclave e fechar, deixa a

vlvula de descarga aberta.
Deixar

o vapor fluir pela vlvula de descarga,

expulsando o ar contido na autoclave.
Aps

expulso do ar fechar a vlvula de

descarga, a presso e temperatura devem subir
at a ideal para esterilizao (121C e 1 atm).
Atingida

a condio de esterilizao, manter

estvel pelo tempo necessria.

Para o resfriamento, desligar o aquecimento ou

fechamento da entrada de vapor.

S abrir a autoclave aps a temperatura est

prxima da temperatura ambiente.

A

despressurizao brusca pode provocar

danos aos sensores, como sondas de pH e de
oxignio dissolvido.

Pequenos objetos so esterilizados de 15 a 30

minutos. Reatores necessitam de mais tempo

(40 minutos a 1 hora), j que o centro demora
para atingir a temperatura adequada.

De modo geral, os microrganismos so mais

resistentes ao frio do que ao calor.
Com algumas excees, a temperatura de
geladeira (4C) pode ser empregada para
conservao de culturas.
O congelamento lento promove a formao de
cristais de gelo, que perfuram a membrana e a
parede celular.
O congelamento brusco a temperaturas inferiores
a -30C seguido de dessecamento vcuo
liofilizao usada na conservao de
microrganismos.

Radiaes
Possuem atividade letal sobre os microrganismos.
Podem ser:
Ionizante comprimento de onda menor que 1 nm
No Ionizante (UV) de 1 a 350 nm

Ultravioleta
A luz UV danifica o DNA das clulas expostas.
Inibem a replicao correta do DNA durante a
reproduo celular.

Os comprimentos de onda mais eficazes

esto entre 240-280 nm.

So usadas na desinfeco de ambientes e

materiais cirrgicos.

A radiao no muito penetrante.

Pode lesar os olhos humanos, causar

queimaduras e cncer de pele.

Radiaes Ionizantes
Os raios gama, raios X, ou feixes de eltrons
de alta energia.

Ionizam a gua, formando radicais reativos,

que reagem com os componentes celulares.

So muito mais penetrantes que as radiaes

UV.

Usado para esterilizar produtos farmacuticos

e suprimentos mdicos.

Filtrao
A passagem de solues ou gases atravs de
filtros de poros suficientemente pequenos usado
para reter bactrias e fungos (no vrus).

utilizada na esterilizao de materiais sensveis

ao calor, como meios de cultura, enzimas, vacinas
e solues antibiticos.

comum a utilizao na entrada de ar para os

biorreatores.

 Baixo custo
confivel
Mais utilizadas nas instalaes industriais para
esterilizao do ar
Podem ser de carvo, algodo, papel, l de
vidro e membrana polimricas

Filtros de Membrana
Apresentam poros de dimenses menores do
que os microrganismos a serem retirados (0,20,45 m).

AGENTES QUMICOS

O uso de agentes qumicos tem se tornado um

mtodo bastante conveniente e efetivo de
esterilizao e desinfeco.

Usados na desinfeco de pisos e superfcies.

Tambm so utilizados quando equipamentos

de operaes unitrias ou componentes de uma
instalao industrial no admite esterilizao
pelo vapor de gua saturado.

Exemplo:

filtros, bombas, centrfugas, vlvulas.

Poucos obtm a esterilidade, a maioria tem

ao desinfetante.
Nenhum desinfetante isolado apropriado
para todas as circunstncias.
A ao depende de fatores como:
temperatura, pH, presena de sais, presena
de protenas e o tempo de contato.

Ordem de resistncia exposio aos

agentes qumicos.
Tipo de
Microrganismo

Bactria esporulante
Micobactria e
Vrus pequenos ou no
lipdicos
Fungos

Nvel de
atividade
requerida

Alto
Alto ou
intermedirio

Intermedirio a
baixo
Dependendo
do nvel deBaixo
atividade
Bactria vegetativa
necessria
Vrus mdios ouque so escolhidos os
agentes
lipdicosqumicos.

Avaliao de um Desinfetante

Mtodo de Disco-difuso

Os agentes qumicos so apresentados em

grupos que tenham em comum, ou as
funes qumicas (alcoois, aldedos), ou
elementos qumicos (halognios, metais
pesados etc), ou mecanismo de ao
(agentes oxidantes, agentes de superfcie
etc).

LCOOL
Aplicao:

desinfetante de nvel intermedirio.

Ao:

ruptura da membrana
desnaturao das protenas.
Apresentao

celular

mais frequente: lcool etlico e

lcool isoproplico entre 60 e 90%.

Compatibilidade

com
materiais:
mais
indicado para superfcies externas dos
materiais e superfcies de vidro.
Caractersticas

da ao: como evapora

rapidamente sua ao limitada, havendo
necessidade de submerso de objetos para
uma ao mais ampla.

FORMALDEDO (4 a 8%)
Aplicao: desinfetante de alto nvel, mas
carcinognico.

Espectro
viruscida.

de

ao:

bactericida,

fungicida,

Usado na desinfeco de equipamentos.

Pode

ser encontrado na forma slida (pastilhas

formalina) ou como soluo aquosa 37-40%
(diludo em lcool ou gua). A soluo deve ser
usada por 30 minutos, na concentrao de 8% em
soluo alcolica e 10% em soluo aquosa.

GLUTARALDEDO
Aplicao

usado

e indicao: desinfetante de alto nvel

na

esterilizao

de

equipamentos

dependendo do tempo de exposio.

Ao

germicida: alterao do RNA, DNA e

sntese protica.
Tempo:

alcalino

utilizado em soluo a 2% com pH

(7,5-8,5)

por

30

minutos.

Fenol e Compostos Fenlicos

Fenol raramente usado
possibilidade
de
irritao
desagradvel.

devido
e
odor

O cresol, O-fenilfenol, o compostos

fenlicos mais utilizado como desinfetante
de superfcies.
O bifenol, triclosano, usado em sabonetes
antibacterianos.

FENLICOS (5%)
Aplicao: desinfetante de nvel baixo a
intermedirio.

Ao: destruio do protoplasma com ruptura

da parede celular com precipitao protica.

Espectro de ao: bactericida, viruscida,

fungicida.

Usado na desinfeco de reas de laboratrio

e produo. Sua concentrao para uso de
0,4-5% sendo que o tempo de exposio deve
ser menor ou igual a 10 minutos.

Halognios
O iodo e o cloro so agentes antimicrobiano
eficazes.
O iodo est disponvel como tintura de iodo,
usado principalmente na desinfeco da pele
e no tratamento das feridas.
O cloro, como gs ou em combinao com
outras substncias qumicas, amplamente
usado.

HIPOCLORITO DE SDIO
Aplicao:

quanto maior a concentrao e/ou o

tempo maior o espectro de ao, podendo ser
utilizado como desinfetante de baixo a alto
nvel.
Espectro

de ao: Atua a concentraes to

baixas como 25 ppm para microrganismos mais
sensveis. Mais usualmente utilizada em
concentrao de 1000 ppm.

Caractersticas:

o desinfetante mais
amplamente utilizado. Apresenta ao rpida e
baixo custo.

considerado como prejudicial ao ambiente.

Compatibilidade

com materiais: bastante

corrosivo, principalmente de metais e tecidos de
algodo e sintticos.

PERXIDO DE HIDROGNIO (6 a 10%)

Aplicao: desinfetante de alto nvel,
principalmente para materiais termo sensveis.
Ao: agente oxidante. Desnaturao protica,
ruptura da permeabilidade da membrana celular.
Tempo: a inativao de microrganismos
dependente
de
tempo,
temperatura
e
concentrao.
Quando a concentrao estiver abaixo de 6%
deve ser desprezada.
Compatibilidade com materiais: corri zinco
cobre e lato.

COMPOSTOS QUATERNRIOS DE AMNIA

Aplicao:

desinfetante de baixo nvel. Muito

utilizado como desinfetante de superfcies,
limpeza geral.
Ao:

desnaturao das protenas celulares

essenciais e ruptura da membrana celular.
Inativados por tensoativos, resduos aninicos e
protenas. Algumas formulaes so inativadas
por gua dura.

Baixo

nvel de toxicidade direta, mas poluente

ambiental.

Solues e sua toxidade relativa ao ambiente

Baixa
Oxidantes
lcool
cidos orgnicos
Aldedos

Alta
Compostos de quaternrio de
amnia
Fenlicos
Hipoclorito de sdio
Biguanidas

No Brasil, a regulamentao e recomendaes

do uso de um germicida particular realizada
por organismos como INCQS (Instituto Nacional
de Controle de Qualidade em Sade) e ANVISA.
As formulaes existentes no mercado devem
ser usadas segundo a orientao do fabricante,
de acordo com seu registro nos rgos
governamentais competentes.

Etapas de um ciclo de desinfeco/esterilizao

qumica de um equipamento:
Desmontagem do equipamento.
Limpeza dos componentes, removendo os resduos de

meios de cultura, biomassa e produtos, fazendo uso de

detergentes.
Lavagem dos componentes com gua com baixo teor de

dureza para remoo dos detergentes utilizados.

Montagem do equipamento e introduo da soluo

aquosa do germicida, proporcionando o tempo de

exposio preestabelecido para ao do germicida.
Drenagem da soluo germicida do sistema.
Remoo

dos resduos do germicida atravs

circulao cuidadosa de gua ou outro fluido estril.

de

CPI Clean in place

Clean-in-place significa Limpeza interna de uma
pea ou equipamento sem relocao ou
desmontagem.
Livre de sujeira, resduos, detergentes ou
quaisquer contaminantes que possam afetar ou
adulterar o produto ou processo.

Usando um software o processo de limpeza

realizado nas seguintes fases:
Lavagem inicial: gua potvel distribuda
atravs da instalao e enviado para o dreno
atravs de uma bomba centrfuga.
Circulao de alcalinos (NaOH 0,2% -2,0%): A
soluo circulada atravs do equipamento a ser
limpos o tempo necessrio para o procedimento.
Depois a soluo drenada.

Circulao

de cido (HNO3 0,5% ou H2PO4 2%) :

A soluo distribuda atravs do equipamento a
ser limpo pelo tempo programada.
Aps a
limpeza cida, a soluo drenada.
Lavagem

final: A gua passa pelo sistema

durante o tempo estabelecido. Esta etapa muito
importante, essencial que todos os resduos de
cido sejam eliminados da linha de produo.
Desinfeco:

A gua entra no sistema, enquanto

o agente de desinfeco adicionada atravs de
uma bomba de dosagem.