Carcinognesis por radiacin

Beatriz L. Molinari
Radiobiologa
CNEA
Conicet

Fundamentos
Fundamentos
de
de radiacin
radiacin

RADIACION
IONIZANTE
Ionizaci
n
Alteraciones
moleculares
Tarda
s

Inmediatas
Citolgicos
Tisulares

Dao gentico
Mutacin
Neoplasia

Muerte celular

Recuperacin

Vida y Radiacin
La vida sobre la tierra se ha
desarrollado con la presencia
permanente de un fondo de
radiacin. No es algo nuevo
inventado por la inteligencia
del hombre: la radiacin
siempre ha existido sobre la
tierra.

Naturaleza de la luz:
teora electromagntica

La luz est constituida por la

propagacin de una oscilacin
armnica de un campo elctrico y uno
magntico perpendiculares entre s.
Se obtienen sinusoides. Esta
oscilacin que se propaga en el vaco
a una velocidad de 300.000Km/seg (la
velocidad de la luz) y constituye la
luz.

Atomos

Los tomos estn compuestos de

partculas mas pequeas:
Protones
Neutrones
Electrones

Ondas electromagnticas

El protn con carga positiva atrae

al electrn con carga negativa. Se
crea una fuerza elctrica o campo
elctrico

Cuando
un
electrn
pasa
lo
suficientemente cerca de un protn
se crea un campo elctrico en el
espacio vaco que rodea al protn

Las ondas de radio, las microondas, los

rayos infrarrojos, los rayos ultravioleta, los
rayos X y los rayos gamma son originados
por la misma perturbacin en forma de
ondas que se repiten en una distancia
llamada longitud de onda. El nmero de
ondas/sec es la frecuencia

Espectro
electromagntico

Ionizacin
Ionizacin

Proceso por el cual se agregan

sustraen electrones de tomos
molculas, creando iones.

La radiacin ionizante es producida

por tomos inestables. Los tomos
inestables difieren de los estables
porque ellos tienen un exceso de
energa de masa.

Radiacin ionizante

Liberacin localizada de grandes

cantidades de energa.

La energa disipada por cada

ionizacin es aproximadamente
de 33 eV.

La energa asociada con la unin

C=C es de 4,9 eV

Tipos de radiacin
ionizante
La absorcin de energa por el
material biolgico puede conducir
a:

Excitacin: el pasaje de un electrn de un

nivel de energa a uno mas alto sin
eyeccin del electrn (UV)

Ionizacin: si la energa es suficiente

para eyectar al electrn fuera del tomo.
Esta radiacin se denomina radiacin
ionizante. Rayos x rayos .

Tipos de radiacin

Electromagnti
ca

Partculas
Alpha
Beta
Electrones
Neutrones
Protones
Iones pesados

Rayos gamma
Rayos x
Ultra-violeta
Luz visible
Luz infraroja
Microondas
Radio

Unidades mas usadas

Unidad
1 rad
1
1
1
1
1

rad
rem
Sv
Gy
mSv

Unidad de Conversion
cantidad de energa
absorbida / gr de materia
0.01 Gy
0.01 Sv
100 rem
100 rad
0,1 rad

Unidades
ROENTGEN

Carga elctrica producida en

1 cm3 de aire. Unidad de exp

GRAY (Gy)

Absorcin de 100 ergios de e

por gramo de sustancia.
= a 100 rads

REM

Rads x RBE

RAD

SIEVERT (Sv)
= 1Gy

Fuentes de radiacin

Fuentes naturales de
irradiacin humana

Exposicin anual normal a la radiacin natural

300 mrem/year
Radon gas
Cuerpo humano
Sup. terrestre
Rayos csmicos

200 mrem
40 mrem
28 mrem
27 mrem

Exposicin anual normal a radiacin generada por el hombre

70 mrem/yr

Procedimientos mdicos
53 mrems
Productos consumidos
10 mrems
Vuelo aeronutico
2 mrems
TV
1 mrem
Armas nucleares y fallout
1
mrem
Industria nuclear
less than 1 mrem

Fuentes de radiacin
natural

3.0 mSv/year

1 Sv = 1 Sievert = 1 Joule/Kg

Rayos csmicos
mSv/yr
Terrestre 10%
Interna
13%
Radon
67%

10%
0.3
0.4
2.0

0.3

mSv/yr
mSv/yr
mSv/yr

Radn

Dosis de Referencia

Radiografa

Molar=2-10 mSv

Radiografa

Panormica=10-

20mSv/mm

Lmites de exposicin

5 mSv/ao (0.5 rem)

Dosis al

pblico

50 mSv/ao (5 rem)

Trabajador

Relaciones dosis (rem)respuesta

0-150sin sntomas
150-400enfermedad moderada
a severa
400-800enfermedad severa.
Muerte por encima de 500 rem
Arriba de 800Fatal
***Dosis agudas a todo el cuerpo

Nuestra exposicin
anual
Actividad
Dosis (mrem/ao)
Fumar

280

Material radiactivo usado en

el laboratorio

<10

Rayos x odontolgico

10 m/rem per x-ray

Radiografa de trax

8 m/rem per x-ray

Agua de bebida
Vuelos intercontinentales
Planta de quemado de
carbn

5
5 m/rem por viaje
0.165

Radiacin csmica

Partculas
cargadas
originadas en el sol y en
las estrellas interactan
con la atmsfera de la
tierra
y
el
campo
magntico y producen
una lluvia de radiacin
que
bombardea
permanentemente
la
tierra
Protones 85%, part. alfa
11%, electrones 2%.

Radiacin terrestre

Material radiactivo se
encuentra en la tierra,
el agua, y en la
vegetacin

Uranio y torio y sus

productos de
decaimiento han estado
presentes desde el
comienzo de los
tiempos.

El material radiactivo
puede ser ingerido con
el alimento inhalado

La cantidad de radiacin
terrestre vara en
diferentes lugares de la
tierra.

Radiacin Interna
Las
persona
estn
expuesta a radiacin
desde
materiales
radiactivos presentes
en su cuerpo: radon,
potasio 40, uranio y
torio.
Radn contribuye con
el 55% de la radiacin

Rayos X y materia

3 Formas de interaccin

Efecto fotoelctrico

Efecto Compton

Produccin de pares

Efecto fotoelctrico

Toda la energa del rayo X

se entrega a un electrn
orbital
X-ray

Resultado : electrn de alta

energa

e-

Produccin de pares
X-ray

e+
e-

Rayos x con suficiente energa para fo

pares electrn-positrn

Result: positrn +electrn de alta energ

Efecto Compton

El rayo X entrega
parte de su energa a
un electrn orbital

e-

Result: electrn de alta energa + R

Tipos
Tipos de
de radiacin
radiacin
ionizante
ionizante

neutrn

Rayos-X o

Cuatro tipos de radiacin

ionizante

Rayos x (fotones)
Rayos gamma (fotones)
Partculas alfa
Partculas beta
Neutrones

Cuatro tipos de radiacin

ionizante
Rayos X

Se producen siempre que un electrn

es removido de su rbita alrededor del
nucleo. Se produce un reordenamiento
de los electrones del tomo con
liberacin
de
los
elementos
caractersticos
de
los
rayos
X.
Formacin de iones

Cuatro tipos de radiacin

ionizante
Rayos gamma

Rayos gamma fotones: Resulta

cuando el nucleo libera energa.

Radiacin con
partculas

Electrones

Protones
partculas cargadas
positivamente. Masa
2000 veces mayor que
el electrn.
Partculas nucleos de tomos de He. Poseen
carga neta positiva. Masa 4 veces mayor que
el protn. Se producen en grandes
aceleradores.
Neutrones
sin carga elctrica, se generan en

partculas cargadas negativamente.

reactores.
Iones pesados nucleos de elementos cargados
positivamente. Deben ser acelerados
a
muy altas energas (MeV GeV)

Cuatro tipos de radiacin

ionizante
Partculas alfa

2 neutrones y 2 protones: tienen

poca penetracin, tienen masa. Son
peligrosas si se inhalan. Se eyectan
del ncleo atmico durante el
decaimiento
de
elementos
radiactivos

Cuatro tipos de radiacin

ionizante Partculas Beta
Electrones con poca masa y energa
variable. Los electrones se forman
cuando un neutrn se transforma
en un protn y un electrn.

Cuatro tipos de radiacin

ionizante Neutrones

Tienen la misma masa que los

protones pero no tienen carga.
Masa algo mayor que el protn.

Ionizacin indirecta es
causada por:

Rayos X

Rayos Gamma

Neutrones

Ionizacin directa es
producida por:

Protones

Particulas alfa

Particulas Beta

Iones acelerados

tomo radiactivo

radiacin ionizante

partcula alfa

rayos x

partcula beta

rayos gamma

EFECTOS DE
RADIACIONES
SOBRE ADN
Radiacin ionizante y no
ionizante

Tipos de dao al DNA

Dimeros de pirimidina (UV)

Roturas de cadena sencilla o
doble
Uniones covalentes entre
cadenas
Modificacin de las bases
Intercalacin
Prdida de bases

Tipos de radiacin
ionizante

La absorcin de energa por el

material biolgico puede conducir a:
Excitacin: el pasaje de un electrn
de un nivel de energa a uno mas
alto sin eyeccin del electrn.
Ionizacin:
si
la energa es
suficiente para eyectar al electrn
fuera del tomo. Esta radiacin se
denomina radiacin ionizante. Rayos
x rayos .

Radiacin ultravioleta

Emana del sol inalterada hasta que entra en la

atmsfera. Aqu las mas dainas son filtradas.
UVA: 315-400 nm
UVB: 280-315 nm
UVC: 100-280 nm (se absorbe por la
atmsfera)
Fuentes artificiales son lmparas de descargas
gaseosas

Radiacin ultravioleta

Es una radiacin electromagntica no

ionizante porque la energa de cada
fotn est por debajo de la energa
necesaria para ionizar.
Las protenas y los cidos nucleicos
son las estructuras de importancia
biolgica que contienen cromforos
(grupos de tomos que absorben
selectivamente
cierta longitud de
onda). Los cidos nucleicos absorben
el rango de energa de 200-300 nm

Efectos de radiacin
ultravioleta

Relacin con el desarrollo de

carcinoma epidermoide, basocelular y
melanoma en individuoe de piel
blanca.
Produce dmeros de pirimidina que
conducen a mutaciones del ADN.
Los individuos con defectos en las
enzimas que dirigen la reparacin del
AND son particularmente susceptibles.

Tipos de daos al DNA

Mecanismo de mutacin por
UV

Citosinas adyacentes forman

un dmero. Durante la
replicacin ambas cadenas,
templados, sintetizan nuevas
cadenas.

El dmero de citosina
incorpora adenina (en lugar de
guanina)en la nueva cadena

Replicacin subsecuente
produce la mutacin CC a TT.

Aunque el dmero de citosina

puede ser corregido, la
mutacin producida no se
detecta por el sistema de
reparacin.

Tipos de daos al DNA

Uniones entre cadenas

Producto de los enlaces covalentes

entre las dos cadenas opuestas del
DNA

Producido por la exposicin a

mostazas de nitrgeno/azufre,
platino, mitomicina C, and
psoralenos + UV

Tipos de daos al DNA

Modificacin de las bases
Agentes que provocan
modificacin de las bases del
DNA

Tipos de daos al DNA

Roturas de cadena sencilla o
doble

Producidos por una gran variedad de agentes.

Consisten en la escisin del enlace fosfodiester de una o ambas cadenas del DNA

Ruptura de una cadena

Ruptura de dos cadenas

Radiacin ionizante
Produce
rupturas en una
ambas cadenas
de ADN o
Dao directo

Produce
formacin de
radicales libres
Dao indirecto

Dao y reparacin del DNA

Exgeno

Agentes

Endgeno

Arresto
del ciclo
celular

DNA
Damage

Reparacin
del ADN

Replicacin
ADN

Apoptosis

Alteracin
gentica
permanente

Enfermedad

El ADN es la molcula blanco

de la radiacin ionizante

Dao al ADN
gamma-, beta-, rayos X (low LET)
neutrones (alto LET)

alpha-,

high LET

Efecto de la dosis sobre las aberraciones cromosmicas

luego de la exposicina a radiacin de bajo y alto LET)

Dicentrics or translocations

low LET (acute)

low LET (chronic)

Dose (Gy)

Ciclo Celular
G = crecimiento y

preparacin de los
cromosomas
S = sntesis de ADN
G2= preparacin

para M = mitosis
G0= salida del ciclo

en G1, clula
inactiva o en gran
actividad.
neuronas, linfocitos

Radiosensibilidad
durante el ciclo celular

S tardo: mas radioresistente

M y G2: mas radiosensibles

Progresion del ciclo celular luego

de Rx: genes checkpoint detienen
el ciclo celular en G2 para
reparacin

Alteraciones por
radiacin
Mutaciones en los genes del ciclo celular
afectan
el desarrollo del mismo: oncogenes
P53: controla el dao al ADN y evita la
progresin del ciclo en G1 y G2.
Dosis bajas: demora la progresin del ciclo (G1
yG2)
Dosis altas: dao no reparable
apoptosis
AT: ataxia telangiectasia. Detecta dao al ADN,
interrumpe el ciclo, mantiene largo del telmero.

Carcinognesis por
radiacin

Dosis bajas de radiacin pueden modular

numerosos genes de respuesta temprana
(reparacin y adaptacin)
modulacin del P53 por numerosas kinasas
produciendo apoptosis arresto del ciclo
celular
detencin del ciclo celular por accin de
checkpoints: G1/S, G2/M (reparacin del dao)
Activacin de genes que responden
tempranamente P53, MAPK, NFkB, caspasas,
etc.

Inestabilidad genmica
Bajas dosis de radiacin producen
efectos no advertidos en las clulas
que sobreviven a la radiacin
Los efectos se hacen evidentes
varias generaciones posteriores
Se expresa en la progenie
Todas las clulas hijas presentan
una mayor probabilidad de mutar.

Efecto bystander

Induccin de cambios
en clulas que no son
alcanzadas
directamente por la
radiacin

Induccin de efecto
bystander

Partculas alfa
Rayos x de baja energa
Blindaje parcial o irradiacin localizada
Transferencia de medio de cultivo
Irradiacin con microhaz
Dosis de 3-5 mSv

Induccin de efecto
bystander
Induccin de:

Muerte celular
Inestabilidad genmica
Mutaciones
Transformacin celular
Aberraciones cromosmicas

Efecto Bystander

Microhaz
Cada clula alcanzada por una
partcula

10% de las clulas

alcanzadas por una partcula

Sawant et al. 2000

Transformacin celular

Sawant et al.2000

Frecuencia de mutacin

Radiacin sobre el
citoplasma produce
mutaciones

Zhou et al. 2000

La influencia de la
comunicacin intercelular
en la formacin de
micronucleos
Blindaje

400
Clulas no evaluadas

Micronucleos/1000 cell

800
Mitad inferior de los
pulmones irradiados con
10 Gy

Clulas expuestals
Khan et al 1998

Bystander, conclusiones

El microhaz facilita la evaluacin de respuestas

biolgicas en funcin del tipo de exposicin y del blanco

El microhaz ha posibilitado caracterizar el efecto

bystander

La distribucin de energa no es proporcional al dao

biolgico.

La respuesta biolgica est relacionada con tejidos, no

con clulas individuales.

Las respuestas Bystander plantean un nuevo paradigma

en cuanto a la accin de la radiacin

Como interacta la
radiacin con las
clulas?
Pasado

Teora de los
hit
Ionizacin
directa
Formacin
de radicales
libres

Presente
Efecto
Bystander
Comunication
clula-clula
Comunicacin
clula-matriz

Datos de radiocarcinognesis en humanos

Turai/IAEA M-IX 2000-09-

76

Carcinogenesis: experiencia
reciente en humanos

Sobrevivientes de Hiroshima y
Nagasaki. 86.000 personas
recibieron al menos 0.005 Sv. En
este grupo el desarrollo de cncer
excedi al de grupos control. Se
produjeron 334 muertes en exceso
por tumores slidos y 87 muertes
en exceso por leucemia.

Muertes por cncer

atribuble a la bomba-A
De 86572 sobrevivientes de Hiroshima y
Nagasaki 7,827 personas murieron de
cncer en 1950-90:
Observados
Esperado en Exceso (%E)
Tumores
7578
7244
334
(4.4)
Leucemia
249
162
87
(35.0)
Total
7827
7406
421
(5.4)
Ref: Pierce et al, Rad.Res. 146: 1-27, 1996
Turai/IAEA M-IX 2000-09-

79

CHERNOBYL

Areas Afectadas

Dosis en tiroides de nios y adolescentes en

Bielorusia y Ucrania
%

[Shore 1995]

Antes del accidente

Tasa de cncer de tiroides=
0.5/millon.
En el perodo 1991-1994
Tasa de cncer de tiroides=
100/millon.
.
Esto representa 200 veces mas.

Factores que aumentaron la

incidencia de cncer de
tiroides en nios

Deficiencia
poblacin

de

iodo

en

Bloqueo tardo de la profilaxis

con iodo fro

Falta de deteccin
casos ocultos

activa

la

de

Casos de cncer de tiroides

en las regiones afectadas
despus de Chernobyl 19861994

Exposicin aguda a la radiacin

Dosis(ra
Efectos
ds)
0-20
No se detectan efectos
20-100 Cambios en la sangre
Disminucin de los glbulos
blancos
100-200 Sndrome agudo de
radiacin
200-300 Vmitos, diarrea, debilidad,
muerte
hemorragias,
300-600 Vmitos,
diarrea.
Muerte con 350 rad mas

Dosis efectiva total (Rx)

Exmen
Radiografa de
trax
cerebro
columna
Urografa
Dental
Tomografa

Dosis
(mSv)
0,02
0,15
0,90
0,20-0,90
10-30
6-16

Radiacin
Rayos x de origen mdico
por
bombas A
Tipo de
cncer

Leucemi
a
Tiroides
Mama
Pulmn

Islas
Bom Marsh
ba A
all

Espon
Fluoro
Mastit
In
dilitis
sc
Tiroides
is
utero
Anq
Torax

Hueso
Hgado
Piel
Linfoma

Esfago
Estmag

Acelerador de partculas TANDAR de la Comisin

Nacional de Energa Atmica (CNEA), Argentina

Haces de Protones

Generados por el acelerador Tandar.

Su distribucin de energa en su
trayectoria determina la curva de
Bragg.
Plateau y Pico de Bragg
Rango de recorrido definido
Permite una selectividad espacial
para la mxima deposicin de dosis.

Curva de Bragg
zona del picode
Bragg

zona de plateau

Rango

zona distal

Proyecto: introduccin de la
protonterapia en la Argentina

Los protones pueden localizarse en la zona tumoral

mas efectividad que los rayos
X gamma.

con

El dao a tejidos circundantes al tumor es menor.

La terapia con protones es ptima para el

tratamiento de tumores localizados en zonas
vecinas a rganos vitales. Ej. melanomas de la coroides y
tumores de la base del crneo.

Su aplicacin a patologas humanas se concret en 1990

en Loma Linda University Medical Center .

Equipo de trabajo para investigaciones

radiobiolgicas con el acelerador Tandar

JA Schuff, L Policastro, H Durn, AJ Kreiner, A

Mazal, BL Molinari, A Burln, ME Debray, JM
Kesque, H Somacal, P Stoliar, A Valda, OA
Bernaola, A Perez de la Hoz, G Saint-Martin, S
OConnor, J Davidson, M Davidson, F Naab, MJ
Ozafrn, ME Vzquez, M Palmieri, M Ruffolo.

Irradiacin con haces de

protones y de litio
PDV

Sobrevida
(control%)
Fraccin
de
sobrevida

0.1

0.01

1E-3

Dosis (Gy)

Dosis
(Gy)
LET (KeV/uM)

Gamma
0,2

Protone
s
Litio
7

Zona Plateau
Pico Bragg
0,1
Zona Distal

3,1 + 0,1
15,6 +
26 + 2
100 +

10

Dao progresivo en la piel de

rata inducido por protones

Para cuantificar el dao producido por partculas

cargadas, que entregan una dosis de energa con una
definida distribucin espacial en un material biolgico,
se evaluaron parmetros radiosensibles de la piel de
ratas Wistar.
Se obtuvieron dosis progresivas de protones en una
misma zona de tejido, mediante la interposicin de una
cua de Lucite (equivalente tejido) sobre la zona a
irradiar.
De esta forma se irradi una zona del dorso de los
animales con dosis variables entre 0 y 100 Gy.

Haz de protones de 22,4 MeV generado en el

Acelerador TANDAR (CNEA-Argentina)
La dosis de entrada se entrega en la zona de
plateau de la curva de Bragg.
El flujo del haz se midi utilizando una cmara
de transmisin a la salida de la ventana de
extraccin.

Arreglo experimental

Imagen del dao en la

piel

Curvas de Isodosis

Distribucin espacial en el tejido de la dosis relativa debida

a la cua.

Evaluacin del tejido irradiado

1.Zona de dosis 0 Gy. Las partculas no atraviesan el espesor de la
cua. No hay dao tisular.
2. Zona alcanzada por la cada distal del pico de Bragg. El haz
alcanza zonas superficiales del tejido. Dao intermedio.
3. Zona alcanzada por el pico de Bragg. Dao mximo, alteracin de
la epidermis, carencia de anexos.
4. Zona alcanzada por las distintas regiones del plateau. Se extiende
hasta el final de la cua. Dao intermedio y variable.
5. Zona sin cua donde el haz atraviesa completamente la piel. Dao
mnimo.

Tabla comparativa de
alteraciones temporales
Espesor de la Piel

Pico de Bragg

Porcetanje del
control

Plateau
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

5
6
7
Das post irradiacin

Tabla comparativa de
alteraciones temporales
Espesor del epitelio

Pico de Bragg

Irradiado/Control %

Plateau

800
700
600
500
400
300
200
100
0

Dias post irradiacion

Tabla comparativa de
alteraciones temporales
Espesor de la Piel

Pico de Bragg

Porcetanje del
control

Plateau
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

5
6
7
Das post irradiacin

Tabla comparativa de
alteraciones temporales
Espesor del epitelio

Pico de Bragg

Irradiado/Control %

Plateau

800
700
600
500
400
300
200
100
0

Dias post irradiacion

Evaluacin del tejido

Control: Dosis 0 Gy

Evaluacin del tejido

Se indican las isodosis de 32, 49, 67 y 100 Gy

Evaluacin del tejido

0.25mm

Zona de dao por protones del plateau del haz

Conclusiones
Los

resultados
obtenidos
permiten
analizar in-vivo la respuesta de un tejido
complejo a la radiacin con partculas. La
mayora de los datos experimentales se
obtienen a partir de cultivos de tejidos.
La utilizacin de una cua de espesor
variable como degradador de energa,
permiti que los tejidos de los animales
irradiados fueran afectados a diferentes
profundidades y dentro de un amplio
rango de dosis.

Conclusiones

Se
determinaron
diferentes
zonas de dao tisular en funcin
del tiempo postirradiacin. El
dao tisular es compatible con la
dosis
recibida
y
con
la
profundidad alcanzada luego que
el haz atravesara el prisma de
lucite.
Las alteraciones de la piel
relativas al control, mantienen
valores similares para todos los
casos estudiados.