HOSPITAL DE CLINICAS UNIVERSITARIO LA PAZ

UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL Y HEMOTERAPIA

UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN ANDRES
FACULTAD DE CIENCIAS FARMACUTICAS Y BIOQUIMICAS

RODRIGO FERNANDO FERNANDEZ APAZA

Interno de Bioqumica
DR. JESUS MURILLO MONTECINOS
Docente
MEDICINA TRANSFUSIONAL
Rote

LA PAZ-BOLIVIA

5 .Hapteno
Molculas orgnicas pequeas (proteinas o u otra molculas Ac. Penicilnico)
que tienen antigenicidad pero no inmunogenicidad . El AND no es
inmunognico pero se comporta como hapteno. Los haptenos se reconocen
como antgenos timo dependientes.
6. Eptope (determinante antignico)
Los Eptopes son la regin inmunolgica activa de un inmungeno, las cuales
se unen a un receptor de membrana antgeno especfico en los linfocitos o
a anticuerpos solubles. Usualmente su superficie en mayor a 7x12x35A.
7. Valencia antignica
Nmero total de determinantes antignicos en una molcula de antgeno, la cual
puede unirse especficamente con su anticuerpo. Las proteinas,
polisacaridos y lipopolisacaridos son antgenos multivalentes. Usualmente
se requiere de 5 a 7 contactos de atraccin de alta energa, aunque algunos
son de reulsin.
8. Alergeno, son molculas proticas o sacaridas incuas para la mayora de
los individuos que causan hipersensibilidad en individuos genticamente
predispuestos

 Propiedades bsicas de los antgenos

1. Extrao (no propio)
No propio , un Ag cuanto mas extrao sea para el organismo, mayor sera
la respuesta inmune contra el mismo.
1) Tipo, caracter, nmero y configuracin estrica de eptope antignico
Contribucin de las propiedades de los grupos qumicos a la
inmunogenicidad del antgeno(acidos y bases fuertes incrementan la
respuesta inmune- tirosina y la fenilalanina)
Contribucin de la posicin de grupos qumicos a la inmunogenicidad del
antgeno

Reaccin cruzada entre BSA y albmina de

otros gneros
Albumin
source
human
pig
caprine
horse
hamster

cross reaction%
BSA

Albumin
source

15
32
75
13
13

cony pig
dog
mouse
rat
cat

cross reaction %
BSA
5
13
10
17
25

EPITOPE: es la porcin de una macromolcula, de 8 a 15 AA, que es

responsable de inducir una respuesta inmune. Dentro de una
molcula puede haber varios epitopes y cada una de ellas genera una
respuesta inmune especifica distinta.

degradacin

Molcula antignica (antes)

Molecula antignica (despus)

Eptope LB:1 patrn lineal en la superficie; 2 eptope crptico; 3 eptope conformacional

Eptope LT: 4,5patrn linear, localizado en cualquier posicin
Los eptopes conformacionales son fcilmente inactivados por degradacin

Eptopes antignicos de LB y LT

 Factores que influencian la inmunogenicidad de un

antgeno
1 propiedades qumicas
Propiedad

qumica,

peso

molecular

(mnimo

5-10

kDa),

arquitectura,

estabilidad, conformacin molecular (mas complejo, mejor), accesibilidad,

degradabilidad y susceptibilidad a fagocitosis (procesamiento por APC es un
paso esencial).
2 factores del receptor (husped): genotipo (MHC), edad, sexo, salud
3 mtodo de inmunizacin: dosificacin, ruta, frecuencia, adyuvante

Lpidos, son poco inmunognicos suelen ser lpidos de membrana (fosofolpidos

cardiolipinas), cuando se conjugan a proteinas o sacaridos se vuelven inmunognicos
(lipopolisacaridos, lipofosfoglican).
Son degradados en el fagosoma por saponinas, se conjugan a la CD1 para ser
reconocidos por los LTCD1= lipopptigos, CD1b=glucopptidos, CD1d=lpidos propios)

Acidos nuclicos, El DNA hipometilado o las secuencias CpG de microorganismos son

inmunognicos.

Otros antgenos, metales (Ni, Hg) quimicos orgnicos.

Antgeno heterfilo, xenogenico, alogenico, autoantgeno

antgeno idiotpico
Antgeno heterfilo: antgenos comunes en distintas especies de animales y que
son compartidos con bacterias hongos y vegetales. La mononucleosis infecciosa se
diagnostica mediante a capacidad de aglutinacin del suero del paciente frente a
globulos rojos de carnero.
Antgenos xenogenicos: Antigenos de otras especies
Antgenos alognicos: Antgenos de diferentes individuos de una misma especie
Autoantigeno: Antigenos propios que bajo algunas condiciones como infeccin,
trauma, tratamiento teraputico, u otros se vuelven antignicos e inducen respuesta
inmune.
Antigenos idiotpicos: Tambin polimorfismos en el TCR, BCR e Ig pueden inducir
la produccin de anticuerpos
Antgenos ocultos: provienen de rganos inmunolgicamente privilegiados
(cerebro= barrera hematoenceflica, testculo= barrera por clulas de Sertoli,
cristalino=falta de irigacin).
Antigenos eritrocitarios y antigenos leucocitarios

* ANTIGENOS TUMORALES
Marcadores tumorales con utilidad clnica probada
Nombre
Antgeno CA 125
Antgeno CA 15-3
Antgeno CA 19-9
Antgeno carcinoembrionario
Antgeno especfico de prstata
Componentes "M"
Fetoprotena a-1
Fosfatasa prosttica antignica
Gonadotrofina corinica
Microglobulina -2

Tumores con los que se asocia

comnmente
Carcinoma ovrico
Carcinoma de mama
Carcinoma de tubo digestivo
Carcinoma de tubo digestivo
Carcinoma de prstata
Gamapatas monoclonales
Carcinoma heptico
Carcinoma de prstata
Tumores gonadales
Tumores de origen linfoide (B)

 Caractersticas de la interaccin entre antgeno y

anticuerpo
1 Configuracin espacial igual a la llave-cerradura
2 unin no covalente: puentes de hidrgeno, interacccines electrostticas,
fuerzas deVan der Waals y enlaces hidrofbicos
3 reversible: la interaccin puede ser alterada por la temperatura, punto
isotnico, fuerza inica y taza de antigeno-anticuerpo
4 Afinidad y avidez
5 Reaccin cruzada

Interaccin entre el CDR de anticuerpos y

eptopes de antgenos

 Superantigenos (Sag)
1 Concepto: a dosis bajas(1 10ng/ml). Los Ags normalmente activan al
0,001% de los LT, los superantgenos son capaces de activar 2 20 de
clones de LT e iniciar una fuerte respuesta inmune.
2 Categora: superantgenos exgenos, Ejm. Enterotoxina S. aureus A-E;
superantgenos endgenos, Ejm. Proteinas del virus del tumor mamario
3 Diferencia con antgenos comunes
1 baja dosis y fuerte respuesta
2 no restringido por el MHC
3 el reconocimiento no es especfico, no requiere procesamiento y
presentacin
4 induce la produccin de muchas citoquinas, resultando en enfermedades
patolgicas severas
En general se han identificado unos 20 superantigenos diferentes.

From
bacter

T cell

From
virus

T cell

Diagrama conceptual de la accin de super antgenos

Mecanismo de accin de los adyuvantes

- Prolonga la presencia del antgeno: libera lentamente (das) el Ag en los ndulos
linfticos, incrementa la capacidad fagoctica, ayuda a la formacin de clulas de memoria y
prolonga la respuesta humoral
- Incrementa las seales co-estimulatorias: Activacin de linfocitos
- Estimula la proliferacin de linfocitos inespecificamente
- Induce la formacin de granulomas

Etpas del procesamiento antignico exgeno y endgeno

Captacin
Acceso de los Ags y patgenos a la va de degradacin intracelular
Degradacin
Protelisis limitada de antgenos a pptidos
Formacin del complejo MHC-proteina
Cargado de peptidos en las molculas MCH
Presentacin antignica
Transporte y expresin de complejos pptido-MHC en la superficie de las APC
para el reconocimiento por LT

Anticuerpos (Acs)
Las molculas unidas a membrana de los LB o secretadas por estos, que se unen
a los antgenos. Son tetrapptidos con funciones especializadas diferentes.
Cada Ac tiene especificidad diferente a los otros Acs
Los Ac unidos a membrana confieren especificidad Ag al LB, tambin proliferacin
antgeno especfica de los clones de LB que interactan con un Ag en particular
Cada LB hace uno y solo un tipo de Ac (seleccin clonal)
Los anticuerpos secretados circulan por la sangre (20% de protenas plasmticas,
2-4 g de Ac/da) y sirven como efectores de la inmunidad humoral.
Existen barreras naturales al paso de los anticuerpos en las articulaciones, vagina,
tero, vejiga, testculos, placenta y cerebro (barrera hematoenceflica).

Los LB tienen un nico receptor de antgeno (BCR) distribuido clonalmente

(50s Jerne y Macfarlane Burnet 1959)

13
1

14
2

16

15
3

17
5

18
6

LB

20

19

10

Anticuerpos

10
10
10

10
10

11

10

10
10
10

12

10
10

10
10

10
10

10
10

10

Y Y

YY

LB vrgen

Y Y

Day
0

Y Y

YY

2
Y

Y Y

YY
Y

Y Y

Y Y
Y
Y YY
Y
Y
Y
Y Y

Clula formadora de
acticuerpos
(clula plasmtica)

Los anticuerpos (su histria)

-En 1890 por Von Behring y Kitasato, describieron que los sueros de animales
inmunizados con toxina, tenian un componente neutralizante de la toxina. La
transferencia de ese suero poda proteger otros animales de la accin de la
toxina (difteria o ttanos)
-Bordet en 1899 determin que los animales podan hacer Acs contra eritrocitos
de otras especies y que estos inducian la destruccin de estas clulas con el
complemento del suero
-1901-1920 Landsteiner defini al sistema del grupo sanguneo ABO (Rh en
1940)
-1930s Heidelberger demostr la reaccin cuantitativa de la precipitinas
-1930s Landsteiners analiz la especificidad de los Acs
-1960s Edelman, Porter, Bence-Jones y Hilschmann, determinaron la estructura
primaria y secundaria de los anticuerpos. Descubrieron que las proteinas de
Bence-Jones eran cadenas livianas de inmunoglobulinas
-1975 Kohler y Milstein inventaron la tecnologa de los Acs monoclonales
-1976 Tonegawa clon el primer gen de los anticuerpos

Los anticuerpos a menudo son el

mayor componente de las proteinas
sricas
The first evidence that antibodies were contained in
particular serum protein fractions came from a
classic experiment by A. Tiselius and E. A.Kabat, in
1939. They immunized rabbits with the protein
ovalbumin (the albumin of egg whites) and then
divided the immunized rabbits serum into two
aliquots. Electrophoresis of one serum aliquot
revealed four peaks corresponding to albumin and
the alpha, beta, and gamma globulins. The other
serum aliquot was reacted with ovalbumin, and the
precipitate that formed was removed; the
remaining serum proteins, which did not react with
the antigen, were then electrophoresed. A
comparison of the electrophoretic profiles of these
two serum aliquots revealed that there was a
significant drop in the globulin peak in the aliquot
that have been reacted with antigen (IgG aprox.
80%)

Los Acs son heterodmeros.

Tienen cadenas peptdicas (2L y 2H)
Las L estn unidas a las H por S-S
Internamente las L y H estn unidas por S-S
En las L-H est la regin variable V (110 aa)
La mayora de las diferencias entre Acs cae en
esta regin (CDRs L/CDRs H).
En 1945 Henry Bence Jones, determin que la orina de los pacientes con
mielma mltiple tena proteinas particulares que precipitaban a 60C y que se
solubilizaban a 80C, proteinas que luego fueron descritas como cadenas
livianas de los Acs (proteinas de Bence Jones)

Fab (Fragment antigen bindig), no

es capz de unirse a Ag

Nosonoff Alfred

Fc (fragmento cristallizable), se
cristalizaba en fro.

Porter
Edelman Gerald

La acidificacin suave separa el Ac en: LH + LH, rompe los S=S de las H.

El Ac. propinico o el Ac. actico separa las los L de las pesadas, rompe los S=S
entre L y P (S+S+HH).

Tanto H como L contienen secuencias homlogas de 110 aa (dominio),

caracterizados por un loop de 60 aa que esta unido por un S-S
En general las Igs tienen un dominio Cl,VL y tres o cuatro CH1, CH2 CH3 y *CH4
Cada dominio consta de loops, cadenas beta paralelas y beta anti paralela

Estudios de secuenciacin de aa determinaron que existe alta variabilidad

concentrada en regiones discretas de los VL1 y VH1. Adems, representan
el partope del anticuerpo
FR frame work regiones mas conservadas,
forman las cadenas b paralelas en la regin
variable.
CDR regiones determinantes de
complementaridad, interesantemente
coinciden complementarias con las regiones
que se unen al eptope del antgeno

Dominios CH1 y CL1: como extensin de los V facilitan el mximo de rotacin de los
brazos de las Igs. Estabilizan a la interaccin de los V con los eptopes. Tambin
funcionan como espaciadores entre la regin de unin al antgeno y la efectora.
Regin bisagra: (regin de 8 a 15 aa) est entre los dominios CH1 y CH2 de las IgG,
IgD e IgA. Es una regin rica en cisteinas, prolinas y residuos hidrofbicos , dndole
alta flexibilidad (cambio de ngulos) a la molcula de Acs para que CDRs encajen con
el eptopo. El esta regin el nmero de S-S vara entre clase y subclase de Acs
Las IgM e IgE carecen de regin visagra (CH2 extra)

Dominios CH2 (G,D,A); CH3 (M,E)

Suelen ser ricos en carbohidratos (son responsables de la solubilidad de Acs,
protegen de la degradacin e incrementan la funcionalidad del dominio Fc).
La remocin del acido silico descubre la galactosa de sus oligosacaridos les
predispone a ser catabolizados en el hgado (fagocitosis y destruccin).
Los HC en la IgA permite que se acople el fragmento secretor
En el caso de IgG e IgM sirve para interactuar con el sistema del complemento
Los Acs son 82 a 96% polipptidos y 2 14% carbohidratos.
Dominios CH3 (G,D,A); CH4 (M,E)
Estos dominios permiten el paso de los anticuerpos a travs de los epitelios
(trancitosis).
Estos dominios (opsoninas) interactuan con el Fc en las clulas fagocticas .
Las clulas placentarias tienen Fc para permitir el ingreso de algunas IgGs
En las IgE para unirse al Fc de basfilos y mastocitos
En las IgA e IgM para interactuar con receptores en clulas epiteliales, tambin para
permitir la formacin de multmeros
En la IgM permite fijar al C1q del sistema del complemento.y unirse a los receptores
de los fagocitos

La funcin de los Acs no solamente

es unirse al determinante Ag
Una vez unidos al Ag, los Acs evocan
respuesta inmune o funciones
inmunolgicas removiendo al Ag o
haciendo destruir al patgeno.

Promueve la fagocitosis de antgenos por macrfagos y neutrfilos, este

mecanismo es dependiente de receptores para Acs (receptores Fc=FcR)
Los FcR estan presentes en la superficie de macrfagos y neutrfilos
ACTIVACION DEL COMPLEMENTO
La IgM y las IgG1, 2 y 3 activan complemento
CITOTOXICIDAD DEPENDIENTE DE ANTICUERPOS (ADCC)
La unin a sus clulas blanco (clulas de husped infectadas con virus),
produce que estas sean destruidas por las NK va FcR
TRANCITOSIS
Es el paso de los Acs a travs de membranas epiteliales (respiratorio,
urogenital, gastrointestinal, mamario)
ALERGIAS
Unica de la IgE, activa mastocitos, eosinfilos y basfilos

Las clases de anticuerpos estn definidas por las secuencias de las cadnas
pesadas

El tipo de Ag y las citoquinas influencian el tipo de Acs que se producirn. IL-4

(IgE); IL-2, IL-4, IL-5 (IgM ); IL-2, IL-4, IL-5, IFN-g (IgG); IL-5, TGF-b (IgA)

Es la primera Ig producida en respuesta a un Ag, solo en ocasiones

especiales sale de circulacin a los tejidos.

Debido a que tiene cadena Join ocasionalmente puede adquirir fragmento secretor
(como la IgA), lo que le permite atravesar membranas epiteliales y patrullar
membranas mucosas.
La IgM al ser pentamrica tiene afinidad especial por los polisacaridos presentes en
microorganismos. Los infocitos B no tienen receptores para IgM.

La IgD es co-expresada con la IgM en LB vrgenes, se ha demostrado su

participacin en determinados trastornos febriles. Tiene una regin bisagra
larga que conduce a su degradacin proteoltica, y que tenga ms
flexibilidad para unirse al Ag.
La unin de la IgD al antgeno puede activar, anergizar y destruir a las clulas
B, los agregados de IgD activan complemento por la va alterna
Clulas plasmticas que expresan IgD son encontradas en la mucosa nasal, los
LT tienen receptores para IgD que facilitan la interaccin T-B e induccin de
cambio de clase. Se ha encontrado igD anti insulina, penicilina y anti leche.

Es el mayor isotipo secretado en las superficies mucosas, los neutrfilos y

monocitos tienen receptores para la IgA desencadenando degranulacin y
estallido respiratorio.
En suero existe como monmero, en mucosas es encotrada como dmero, trmero
e incluso tetramero (cadena J)
La IgA1 es producida por LB de mdula sea (Suero), no opsoniza no es citoflica
para macrfagos pero si para neutrfilos. La bilis es rica en IgA.
La IgA2 es producida por LB de mucosas (secreciones mucosas, calostro, leche,
saliva, lagrimas, moco nasal y traqueobronquial).

El componente secretor es producido por

las clulas epiteliales de las membranas
mucosas
La IgA secretora atraviese al epitelio
gracias a la unin a los receptores poli Ig.
Los PIgR interactan con las cadenas join
El componentes secretor protege a la IgA
del clivaje proteoltico en las mucosas
En la leche materna protege al bebe
durante los primeros meses de vida,
conforme el intestino madura decrece su
capacidad de absorber anticuerpos, esta
IgA no pasa a circulacin.

El calostro materno es rico en IgG e IgA

Pese a su baja concentracin en el suero tiene una muy potente actividad, es la

mas lbil al calor (56C 3/30), las Cel plasmticas secretoras se localizan
preferentemente en el pulmn y piel
Induce la hipersensibilidad inmediata (alergia, asma, shock anafilctico)
La IgE se une a los receptores en los basfilos sanguneos y mastocitos de la piel.
Se necesitan dos IgE para degranular a los basflos y los mastocitos lo cual
conduce a los sntomas de la alergia y en otros casos a la destruccin de
parsitos

Pruebas cruzadas (cross match)

El propsito de las pruebas cruzadas es detectar la presencia de anticuerpos

preformados en el suero del paciente(receptor), dirigidos contra los antgenos HLA del
presunto donador, mediada por complemento.

En caso de estar presentes, los anticuerpos significa que el receptor ha estado

sensibilizado contra estos antgenos del donador y que por tanto, est preparado para
rechazar de manera enrgica cualquier injerto que los posea.