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D ETER M IN A C I N D E
P LO M O IN O R G N IC O EN
O R IN A
Indicadores de
exposicin
LA PLUMBURIA (Pb-U)
se expresa en g/g de
creatinina o en g/l de orina
de 24 horas. La muestra de
orina
se
recoge,
en
recipientes exentos de plomo
y debe ser mantenida entre
2 C y 8 C de temperatura.
Debe
tenerse
especial
cuidado
en
evitar
la
contaminacin ambiental de
la muestra. La plumburia se
determina por mtodos de
absorcin atmica. El valor
normal de Pb-U es inferior a
50 g/g de creatinina.
CIDO DELTA
AMINOLEVULNICO
Indicadores
de efecto
URINARIO (ALA-U)
La
acumulacin
de
ALA
y
posterior aumento de la excrecin
urinaria del ALA-U se produce
como
consecuencia
de
la
inhibicin del plomo sobre el ALAD y la estimulacin del ALAsintetasa. Numerosos estudios
han demostrado que la excrecin
urinaria de este indicador est
asociada a la cantidad de plomo
metablicamente activo en el
organismo, lo que podr indicar
su utilizacin para evaluar la
cantidad de plomo movilizable
antes del tratamiento quelante
Se mide en mg/g de creatinina.
Como tcnica analtica se utiliza
el mtodo Davis.
Fundam ento
La muestra de orina se recoge en un frasco
de polietileno, utilizando cido ntrico como
conservante. El plomo se compleja con
pirrolidinditiocarbamato de amonio (APDC) y
el complejo se extrae con isobutilmetilcetona
(MIBK). El plomo contenido en la fase
orgnica s determina por espectrofotometra
de absorcin atmica con llama a una
longitud de onda de 283,3 nm, utilizando un
mtodo directo de cuantificacin.
Tom a de m uestra
Las muestras de orina, preferentemente de 24 horas,
se toman en frascos de polietileno que contienen 0,5
ml de cido ntrico concentrado. Despus de
homogeneizar la muestra agitando, se transfiere una
alcuota de 40 ml a un frasco para enviar al laboratorio.
Hasta el momento de efectuar el anlisis, las muestras
deben conservarse refrigeradas.
P rocedim iento
Limpieza del
material
Preparacin de la
muestra
1. Pipetear 10 ml de orina en un tubo de centrfuga.
2. Aadir 1 ml de disolucin de Tritn X-100/APDC y agitar
Preparacin de
patrones y curva de
calibracin
Pb/ml
De cada una de estas disoluciones pipetear 10 ml en
tubos de ensayo.
Con cada uno de los patrones se sigue el mismo
proceso que para las muestras
Debe someterse al mismo proceso que las muestras
y patrones un ensayo en blanco de agua bidestilada.
Con las lecturas obtenidas para los patrones,
corregidas con el valor del blanco, se construye la
grfica seal-concentracin, ajustando los puntos
obtenidos a una recta.
C lculos
Los resultados, expresados en micro gramo de plomo por
litro de orina se obtienen mediante la siguiente expresin:
Donde:
C = Concentracin de plomo en g/litro de
orina.
c = Concentracin de plomo en g/ml
leda en la curva de calibracin.
Los resultados pueden referirse a la cantidad de creatinina
presente en la muestra mediante la siguiente expresin
Fundam ento
La orina se hace pasar a travs de un sistema de
dos columnas de intercambio inico. En la primera,
que contiene una resina aninica, queda retenido
el porfobilingeno junto a otras interferencias.
Sobre la segunda, conteniendo una resina
catinica, se retiene el ALA, que es posteriormente
eludo con acetato sdico. A continuacin se hace
reaccionar con acetilacetona a pH 4,6 formndose
un compuesto pirrlico que a su vez reacciona con
el p-dimetilaminobenzoaldehido del reactivo de
Ehrlich, dando un cromgeno de color rosado que
se mide espectrofotomtricamente a 553 nm
Tom a de m uestra
Recoger la orina de 24 horas. Aadir 3 ml
de cido clorhdrico concentrado. Mezclar
bien y medir el volumen total. Conservarlo
refrigerado. En estas condiciones el ALA es
estable al menos en 2 semanas.
P rocedim iento
Columnas de
intercambio
inico
Se realiza una suspensin de la resina,
utilizando 3 g de resina y 7 ml de agua para
cada columna. Se depositan 10 ml de dicha
suspensin en una columna de vidrio o
plstico, convenientemente cerrada con
vidrio o algodn, de manera que resulte una
columna de 2 cm de altura y 1,5 cm de
dimetro.
Preparacin del
patrn
Disolucin patrn de ALA (0,2 mg/ml).
Pesar 25,6 mg de ALA-HCI , disolvindolo y
aforndolo a 100 ml, con la disolucin
tampn pH = 4,6
Disolucin patrn de trabajo de ALA (2
mg/100 ml)
En el momento del anlisis, diluir 1.0 ml de
la disolucin patrn de ALA a 10.0 ml con
tampn acetato de pH = 4.6
Procedimiento de
anlisis
1. Colocar
2.
3.
4.
5.
C lculos
La concentracin de ALA en orina se calcula
mediante las siguientes ecuaciones:
donde Cp es la
concentracin de
ALA en mg/100 ml
del patrn
Referencias
INSTITUTO NACIONAL DE SEGURIDAD E HIGIENE EN EL
G racias