LABORATORIO CLNICO

El informe To err is human (Instituto de Medicina de EEUU

1999),que en ese pas mueren ms personas como consecuencia de

errores mdicos que por accidentes de trnsito, Ca de mama, SIDA etc.
La mayora de los errores eran previsibles.
Si bien los errores en el laboratorio clnico producidos como

consecuencia de resultados falsos no han recibido la misma notoriedad

como los errores teraputicos o quirrgicos, siguen siendo una fuente de
error y pueden producir serias y adversas consecuencias para los
pacientes.
La frecuencia de errores en laboratorios clnicos se estima en 1 error

c/ 900-2.074 pacientes o bien 214-8.316 resultados.

La mayora de errores ocurren en la fase preanaltica (46-68%), si bien

en la fase analtica ocurren entre un 7 y un 13%, de los cuales hasta en

un 6% ocurren por interferencias .

LABORATORIO CLNICO
Los laboratorios no pueden detectar tan fcilmente los errores

causados por sustancias interferentes. Podemos definir una

interferencia analtica como el efecto de una sustancia diferente al
analito que queremos medir presente en el sistema analtico que causa
una desviacin del valor medido respecto al verdadero valor,
usualmente expresado como concentracin o actividad.
Las propiedades de estas sustancias interferentes son:
1) nica de un individuo,
2) concentracin variable en el tiempo,
3) pueden producir resultados falsos positivos y falsos negativos,
4) pueden interferir con uno o varios inmunoensayos pero no

necesariamente con todos,

5) pueden interferir para diferentes analitos,
6) anticuerpos interferentes de baja afinidad poliespecficos pueden

estar presentes en altas concentraciones o bien anticuerpos

interferentes de alta afinidad pueden estar presentes en bajas
concentraciones,

LABORATORIO CLNICO
Laboratorio Clnico es una especialidad que resulta indispensable en la

medicina actual.
Objetivos y funciones, en lo que se refiere a la asistencia mdica; se

seala la compleja situacin a que se enfrenta en la actualidad, motivada

entre otros factores por la creciente introduccin de nueva tecnologa y el
aumento de la demanda.
Se ofrecen algunas propuestas para el uso racional de este recurso.

Asimismo, se presenta la variedad de exmenes que se realizan en el

laboratorio clnico, el personal que trabaja en l y las instalaciones de que
consta.
Tambin se dedica un espacio a los materiales y reactivos, as como a

las perspectivas que abri al trabajo de los laboratorios mdicos la

introduccin de la computacin.

OBJETIVOS Y FUNCIONES DEL LABORATORIO CLNICO

Especialidad mdica bsica, perteneciente al grupo de las que se

denominan comnmente medios de diagnstico y, como todas ellas, resulta

indispensable en la actualidad.
En cuanto a la asistencia mdica, los exmenes de laboratorio tienen como
objetivos:
1. Ayudar a confirmar o descartar un diagnstico.
2. Establecer un pronstico.
3. Controlar la evolucin de la enfermedad y los resultados del tratamiento.
4. Detectar complicaciones.
5. Colaborar con estudios epidemiolgicos y de grupos de riesgo.
6. Constituir una parte esencial de los protocolos de investigacin cientfica y
de los ensayos clnicos para la introduccin de nuevos medicamentos.

CARACTERISTICAS
El valor diagnstico de la mayora de las investigaciones de

laboratorio est limitado porque, aunque refleja cambios en la

funcin de los rganos y de los sistemas, la mayora de estos
cambios son inespecficos.
Por lo tanto, si bien estas investigaciones detectan la presencia de

una alteracin patolgica, a menudo no identifican la enfermedad

concreta.
Es decir, dirigen la atencin del mdico hacia un diagnstico

particular (incluso en el caso de que los resultados sean

considerados normales), o permiten excluirlo con una razonable
confiabilidad; pero no pueden emplearse como sustitutos del
interrogatorio ni del examen fsico, sino como complemento de estos.
La interpretacin de los resultados de los anlisis de laboratorio

depende sobre todo de su sensibilidad, su especificidad nosogrfica

y su valor predictivo.

EVOLUCIN
El perfil de trabajo del laboratorio clnico se fue conformando desde

finales del siglo XIX y no permaneci ajeno al impetuoso desarrollo

que experimentaron las ciencias mdicas en la segunda mitad del
siglo XX.
Durante ese tiempo se ha acumulado un vasto caudal de

experiencia en el estudio de las alteraciones humorales, que tienen

lugar durante la evolucin de una enfermedad o como consecuencia
de un tratamiento.
Esto conllev a una demanda creciente de pruebas para el
diagnstico, que tuvo que ser enfrentada por los profesionales del
laboratorio, quienes respondieron, a su vez, con una oferta que
super la demanda y, al mismo tiempo, la hizo aumentar, lo que
origin una espiral viciosa con la cual se cre una situacin muy
compleja, que puede resumirse de la manera siguiente:

CONSECUENCIAS
1. Incremento considerable en la variedad de anlisis que se realiza en los
laboratorios, algunos de los cuales duplican la informacin brindada por otros,
sin aportar nuevos datos.
2. Incremento progresivo de la cantidad de investigaciones que se indica,
motivada por la masificacin de los servicios de salud, el mercantilismo de
la medicina, los estudios de poblaciones (screening) y las exigencias de los
sistemas de seguros mdicos en muchos pases, entre otras causas. En
varios pases del continente, este aumento es de 15 % en el ltimo quinquenio.
3. El propio progreso cientfico-tcnico (el desarrollo de nuevas tcnicas de
diagnstico rpido y la difusin y perfeccionamiento de los equipos
automatizados, por ejemplo) ha estimulado el desarrollo de una mentalidad
que lleva a los profesionales de la medicina a realizar determinadas
investigaciones y procedimientos, no porque sean necesarias, sino porque son
posibles.
4. El trabajo del laboratorio se ha hecho en pocos aos tan complejo y la cantidad
de informacin que brinda es tan considerable, que muchos profesionales no
han tenido tiempo de adaptarse a esos cambios y de asimilar esa informacin.

CONSECUENCIAS
5. Ha tenido lugar una transformacin epistemolgica en la enseanza
de la medicina en las ltimas dcadas: por una parte, los programas
no enfatizan el uso correcto de los medios de diagnstico ni
estimulan, en los futuros mdicos, el desarrollo de una mentalidad
que permita obtener los mximos beneficios para los enfermos con
el menor costo posible para la sociedad; por otra parte, el propio
personal de los laboratorios suele estar poco preparado en cuanto a
la gestin de calidad que le permita lograr resultados de excelencia.
Adems, a menudo este personal carece de una formacin que le
permita entablar un dilogo efectivo con los mdicos de asistencia.
6. Existe un reclamo creciente de que los laboratorios clnicos utilicen
sus recursos de manera efectiva y se desempeen con calidad
ejemplar, al tiempo que se hace evidente la necesidad de un uso
racional de este importante recurso.

PERSPECTIVAS
Situaciones complejas que resolver (interdisciplinaria): promover uso racional
del laboratorio clnico. Algunas sugerencias :
1. Precisar, de manera adecuada, las limitaciones y la utilidad clnica de las
investigaciones que se realizan en el laboratorio.
2. Promover la eliminacin de las pruebas que duplican informacin.
3. Fijar plazos lgicos de realizacin de exmenes evolutivos.
4. Elaborar protocolos apropiados, de conjunto con mdicos asistenciales, para la
prctica diaria como investigacin y definir circunstancias en que sern empleados.
5. Enfasis en estudios de costo-beneficio y costo-efectividad y trazar poltica orientada a
la disminucin de los costos sin perjudicar por ello la atencin al paciente.
6. Reducir la solicitud de urgencias al mnimo indispensable.
7. Prestar especial atencin a las etapas preanaltica y posanaltica.
8. Identificar los problemas que entorpecen el flujo de trabajo del laboratorio y establecer
medidas para su solucin.
9. Evaluar de forma crtica las necesidades actuales y las perspectivas de desarrollo del
laboratorio, antes de introducir nuevos exmenes y nuevas tecnologas.
10. Educar al personal para los cambios que deben introducirse.
11. Profesionales de laboratorio deben fomentar sistema de manejo de calidad total, con
crecientes expectativas, tanto explcitas como implcitas, actuales y futuras.

EXMENES QUE SE REALIZAN EN EL

LABORATORIO CLNICO

La variedad de exmenes de laboratorio es considerable; no todos los

laboratorios pueden realizar esta amplia gama de investigaciones, como
tampoco todas las instituciones mdicas del pas, incluidas las ms
especializadas.
En cuanto al sector privado, en los pases en que existe, este aspecto por lo

general es controlado mediante la acreditacin de los laboratorios de este

sector, por las asociaciones mdicas nacionales, en coordinacin con los
organismos gubernamentales que regulan la actividad sanitaria.
En principio, antes de incorporar la determinacin de algn analito a las

investigaciones que se realizan en un laboratorio, es importante adquirir toda la

informacin bsica disponible acerca de su fisiologa, su fisiopatologa y su
importancia clnica.
Ello incluye aspectos tales como su estructura, origen, causas fisiolgicas y

patolgicas de su aumento o disminucin; sensibilidad y especificidad

nosogrficas; intervalos de referencia, nivel de cambio significativo desde el
punto de vista clnico y su valor diagnstico o pronstico.
Adems, es preciso conocer las caractersticas de los mtodos de anlisis, las

limitaciones de estos, las posibles interferencias, la preparacin del paciente y,

por ltimo, realizar los clculos de costo-beneficio de su introduccin.

EXMENES QUE SE REALIZAN EN EL

LABORATORIO CLNICO
1.

Qumica sangunea: incluye pruebas para el estudio del metabolismo

de los carbohidratos, las protenas, los lpidos, el agua y los electrlitos
y el equilibrio cido-bsico; enzimas sricas, productos intermedios o
finales del metabolismo, oligoelementos, hormonas y niveles de
medicamentos en sangre, entre otros.

2. Hematologa: incluye un grupo de exmenes denominados bsicos o

habituales (hemoglobina, hematcrito, recuentos de clulas de la
sangre, examen de la extensin coloreada de sangre perifrica, clculo
de las constantes corpusculares, velocidad de sedimentacin globular)
y pruebas ms especializadas, como los estudios de anemias
hemolticas y nutricionales, el examen de las extensiones coloreadas de
mdula sea (mielograma), las coloraciones citoqumicas y algunos
estudios realizados con el empleo de radionclidos, sondas
moleculares o microscopia electrnica.
3. Estudios de la hemostasia: agrupan a todas las pruebas que permiten
explorar los mecanismos de la coagulacin sangunea, la fibrinlisis y la
actividad de los trombocitos.

EXMENES QUE SE REALIZAN EN EL

LABORATORIO CLNICO

4. Inmunologa: incluye una amplia gama de pruebas para el estudio de la

autoinmunidad, las inmunodeficiencias, el tipaje para trasplantes y otras.
5. Examen qumico y citolgico de la orina, del lquido cefalorraqudeo, del
lquido amnitico o sinovial, del seminal, de la saliva, y de exudados y
trasudados.
6. Biologa molecular: se emplean las sondas de ADN para el estudio de
enfermedades infecciosas, neoplsicas y genticas, as como para sustituir
cada vez ms los mtodos clsicos de estudio del sistema inmunolgico. El
ADN disponible para una reaccin, es ampliado por medio de la reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR), que redunda en diagnsticos ms rpidos y
especficos y abre posibilidades insospechadas unos pocos aos atrs.
7. En laboratorios del nivel primario de atencin mdica realizan examen
parasitolgico de heces, as como examen directo de esputo, para BAAR
(parte del PCT). En los dems niveles, estas investigaciones, as como
todos los dems exmenes parasitolgicos, microbiolgicos y serolgicos,
son realizados por los laboratorios de microbiologa, especialidad diferente.
En la mayora de los pases del continente americano, todas estas
investigaciones forman parte del contenido de trabajo de los laboratorios
clnicos, al igual que los exmenes citolgicos.

VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL

LABORATORIO
IMPORTANCIA
El nivel de calidad de la fase preanaltica condiciona el nivel de calidad
de las fases siguientes. la obtencin correcta de la muestra es la primera
condicin de un resultado correcto

Preanalitica :ISO 15189

Todos los pasos a seguir en orden cronolgico, partiendo desde la
solicitud del clnico, incluyendo solicitud, preparacin del paciente
obtencin de la muestra primaria, transporte hacia y dentro del
laboratorio y finaliza cuando el procedimiento analtico comienza .

ETAPA PREANALTICA
Aatencin al usuario
Solicitud del examen,
Preparacin del paciente,
Toma de muestra,
Transporte
Almacenamiento
Centrifugacin

Secuencia recomendada en
el uso de tubos
Tubo de separacin de suero
Tubo de coagulacin
Tubos con anticoagulantes:
citrato de sodio
EDTA
Heparina
Facilitar el reconocimiento de los

tubos/tapones

% DE ERROR
Preanaltico
46%

Analtico
7%

Postanaltico
47%

(Rose,Boone)

68,2%
(Plebani)

13,3%

18,5%

RECHAZO DE
MUESTRA
Datos incompletos o ilegibles
Discordancia entre datos solicitud y muestra
Proporcin inadecuada de sangre-anticoagulante
Muestra incorrecta. Uso de anticoagulante

incorrecto
Transporte inapropiado
Presencia de interferentes como hemlisis, turbidez
Cantidad insuficiente de muestra
Tiempo de recoleccin incorrecto

MUESTRA NO VLIDA

% de error preanaltico
Error en nombre paciente
Error identificacin unidad hosp
Extravo orden
Orden malinterpretada
Envase inapropiado
Toma incorrecta de muestra
Toma de via de infusin
TOTAL

3,0%
19,0%
18,0%
3,0%
3,0%
2,0%
20,0%
68,0%

Errores relacionados con la Solicitud

Examen ordenado pero no realizado
Examen realizado pero no ordenado
Discrepancias con nombre mdico
Errores en urgencia

1,4%
1,1%
1,9%
0,8%

4,8% con error en ingreso de

solicitud
Arch Path Lab Med 1999; 123:1145

Preparacin del Paciente

Objetivo:
Establecer una correcta preparacin del paciente, tratando de
evitar cualquier factor externo que pueda influir en las
determinaciones y lograr un estado basal para que el
resultado obtenido pueda ser comparable con su estado real
de salud en ese instante y con otros resultados obtenidos bajo
las mismas condiciones en otros momentos de la vida del
paciente.

Gestin de traslado de
muestras

Tiempo apropiado
Temperatura especificada
Seguridad del transportador, pblico en
general y laboratorio que la recibe.
Cumpliendo con los requisitos regulatorios
nacionales, regionales o locales.

Almacenaje por tiempo

especificado
Condiciones que aseguren estabilidad de las

propiedades para repeticiones o anlisis adicionales

SISTEMAS BIOLGICOS SON INESTABLES

ADSORCIN, DESNATURALIZACIN, EVAPORACIN,
CONGELACIN LENTA, ALCUOTAS.

Tiempo entre toma de

muestra y procesamiento
Sangre con EDTA
Hasta 24 horas a TA
Hasta 7 das a 4C

Sangre con heparina

Hasta 24 hora TA

Sangre sin anticoagulante Hasta 24 horas a TA

Suero
o -70C

Hasta 48 horas a 4C.

T Ambiente 18-22 C

3 Meses a -20C

ISO 15189 :2003

Anlisis
conjunto de operaciones que tienen el objeto de determinar el valor o
caractersticas de una propiedad.
NOTA En algunas disciplinas (ejemplo: microbiologa) un anlisis es la
actividad total de un conjunto de ensayos/pruebas, observaciones o
mediciones.

MTODOS ANALTICOS (DE MEDICIN)

MTODO ANALTICO: CONJUNTO DE
PROCEDIMIENTOS (INSTRUCCIONES ESCRITAS) Y
TCNICAS PARA REALIZAR UNA ACTIVIDAD
ORDENADO EN FORMA SISTEMTICA.

FORMAN PARTE DEL PROCESO ANALTICO

INEVITABLEMENTE EL INSTRUMENTO EMPLEADO
EST INVOLUCRADO EN EL MTODO

ERROR ANALTICO O ERROR DE LA MEDICIN:

TIPOS DE ERROR:
ERROR SISTEMTICO: ES CONSTANTE O VARA
EN FORMA PREDECIBLE, SE CONOCE SU EXISTENCIA
EQUIPO,REACTIVOS, METDICA, CALIBRACIN

ERROR ALEATORIO: SE PRODUCE AL AZAR, ES VARIABLE

REACTIVOS, EQUIPO, PIPETEO, TRANSCRIPCIN

ERROR TOTAL = ERROR SISTEMTICO + ERROR ALEATORIO

CARACTERSTICAS DE DESEMPEO ANALTICO

PRECISIN :GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE
RESULTADOS INDEPENDIENTESDE LA
MISMA MUESTRA
REPETIBILIDAD: CUANDO SE MANTIENEN LAS CONDICIONES ANALTICAS
REPRODUCTIBILIDAD : CUANDO ALGUNAS DE ELLAS VARAN(PRECISIN
INTERMEDIA)

ESPECIFICIDAD ANALTICA: CAPACIDAD DE PRODUCIR

UNA SEAL EXCLUSIVAMENTE CON
UN ANALITO ENPRESENCIA DE OTROS
COMPONENTES (MATRIZ)

SENSIBILIDAD ANALTICA: CAPACIDAD DE PRODUCIR UNA

SEAL DISTINTA FRENTE A CANTIDADES
DISTINTAS DEL ANALITO

LINEALIDAD: CAPACIDAD DE PRODUCIR SEALES CUYA

INTENSIDAD VARE PROPORCIONALMENTE CON LA CANTIDAD DEL
ANALITO

LMITES DE DETECCIN Y CUANTIFICACIN

EXACTITUD: GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE UN
RESULTADO Y EL VALOR VERDADERO
VALOR CONSISTENTE CON LA DEFINICIN DE UNA
CANTIDAD PARTICULAR DADA.

VERACIDAD: GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE EL PROMEDIO

DE UNA SERIE DE RESULTADOS DE LA MISMA MUESTRA Y EL
VALOR VERDADERO
caracterstica

estimador

veracidad

Sesgo (error sistemtico)

precisin

s (desvo estndar), C.V.

exactitud

s acumulado

VALIDACIN

NECESIDAD DE CALIBRACIN:

CONJUNTO DE OPERACIONES QUE ESTABLECEN

LA RELACIN ENTRE LA RESPUESTA DEL SISTEMA
Y LA CANTIDAD DEL ANALITO
UTILIZA UN MATERIAL DE REFERENCIA
(CALIBRADOR)

BALANZA:DETERMINACIN DE MASA PESADA

PESO = MASA . GRAVEDAD
EQUILIBRAR UNA MASA DESCONOCIDA CON OTRA
CONOCIDA
CAPACIDAD -SENSIBILIDAD PRECISIN
USO,EN LA PREPARACIN DE:
DE
MATERIALES DE REFERENCIA(ESTNDARES)
REACTIVOS
SOLUCIONES (1 PASO)
CALIBRACIN DE EQUIPAMIENTO VOLUMTRICO

INSTRUMENTOS MAS PRECISOS DEL LABORATORIO

UBICACIN EN LUGARES LIBRES DE VIBRACIONES Y

PROTEGIDOS DE LA LUZ SOLAR

PESAS CALIBRADAS:ESPECIFICACIONES DEL N B S

PASOS
1-COMPROBAR EL NIVEL
2-VERIFICARLA SITUACIN DE MOVIMIENTO
3-FIJAR EL PUNTO 0 (TARAR),VENTANAS LATERALES
CERRADAS.
4-ABRIR, COLOCAR LA MUESTRA (NO
DIRECTAMENTE),CERRAR
5-EQUILIBRAR HASTA EL REPOSO
6-REGISTRAR
7-RETIRAR LA MUESTRA
8-EQUILIBRAR (RETIRAR LAS PESAS)
9-VERIFICAR EL CERO (VENTANAS LATERALES
CERRADAS)

ELECTRNICA: COMPENSACIN ELECTROMAGNTICA

RELACIN ENTRE LA MASA(FUERZA) Y LA CORRIENTE
DE COMPENSACIN (CORRELACIN)

MEDICIN DE VOLUMEN
MATERIAL DE VIDRIO VOLUMTRICO (CALIBRADO, NO
CALENTAR) :PIPETAS ,MATRACES AFORADOS, VASOS
NO VOLUMTRICO- NO CALENTAR A LA LLAMA
DIRECTA
JARRAS,BOTELLAS,VASOS, MATRACES
CLASE A CAP
PIPETAS-AFORADAS:TD-TC (SE SOPLA)
GRADUADAS: TD-TC
ELEGIR LA ADECUADA
TODO EL MATERIAL:SANO, LIMPIO, SECO Y
DESENGRASADO

PASOS
1-COLOCAR PROPIPETA O PERA DE GOMA AL EXTREMO
2-INTRODUCIR LA PIPETA EN LA SOLUCIN
3- SUCCIONAR LENTAMENTE(NO DEBE ENTRAR
AIRE),HASTA UN NIVEL POR ENCIMA DE LA MARCA DE
CALIBRACIN
4-RETIRAR LA PIPETA
5- ENJUAGAR LA PUNTA(ERROR)
6-VACIARLA EN POSICIN VERTICAL HASTA QUE EL
EXTREMO INFERIOR DEL MENISCO LLEGUE A LA
MARCA DE CALIBRACIN
7-DRENARLA EN EL RECIPIENTE DEFINITIVO EN
POSICIN VERTICAL, SI ES TC, TOCAR LA PARED DEL
RECIPIENTE

PIPETAS AUTOMTICAS
ASEGURA UN VERTIDO EFICAZ DE VOLMENES
IGUALES (DILUCIN) POR DESPLAZAMIENTO DE AIRE
CALIBRACIN
MANTENIMIENTO

INSTRUCCIONES

LUBRICACIN
PRECISIN (COEFICIENTE DE VARIACIN 0.1%- 1%)
VERIFICACIN
SECAR LA PUNTA DE ARRIBA HACIA ABAJO
PUNTEROS CALIBRADOS

SOLUCIONES- PREPARACIN
1-PESAR EL SOLUTO SLIDO EN UN VASO(GUANTES)
2-AGREGAR SOLVENTE AL VASO EN CANTIDAD
SUFICIENTE PARA DILUR
3-COLOCAR UNA VARILLA DE VIDRIO( O UN EMBUDO
DE VIDRIO) EN EL MATRZ. (EN EL QUE SE VA A MEDIR
EL VOLUMEN FINAL DE SOLUCIN)
4-VERTER EL CONTENIDO DEL VASO EN EL MATRZ A
TRAVS DE LA VARILLA O EL EMBUDO (PUEDE SER
POR LA PARED CON PIPETA O GOTERO)
5-AGREGAR SOLVENTE AL VASO Y REPETIR LA
OPERACIN HASTA QUE NO RESTE MAS SOLUTO Y EL
NIVEL CASI ALCANCE LA MARCA DEL
MATRZ(ENRASE)

6-AADIR SOLVENTE GOTA A GOTA POR EL

CUELLO DEL MATRZ PARA ARRASTRAR SOLUTO
7-TAPAR EL MATRZ Y MEZCLAR INVIRTINDOLO
Y AGITANDO 4 VECES
8-DEJAR REPOSAR (QUE DESCIENDA TODO )Y
AJUSTAR
ELMAGNTICO
ENRASE
AGITADOR
, CORRECCIN DE PH SI

ES NECESARIO
TRASVASE O TAPADO PARA ALMACENAR
EVITANDO EVAPORACIN

CENTRIFUGACIN
DISPOSITIVO QUE ACELERA LA SEPARACIN
GRAVITACIONAL DE LAS SUSTANCIAS QUE
DIFIEREN SIGNIFICATIVAMENTE EN SUS MASAS
LABORATORIO:SEPARAR PARTCULAS
EN SUSPENSIN(CLULAS)
SEPARAR DOS LQUIDOS

UTILIZA LA FUERZA CENTRFUGA RELATIVA = FCR

FCR = 1.118*10 5 * radio * rpm
( RADIO EN CENTMETROS,REVOLUCIONES POR
MINUTO,VELOCIDAD ROTATORIA)

PRECAUCIONES :
TUBOS EN EQUILIBRIO (DISPOSICIN GEOMTRICA,
PESAR)
TUBOS TAPADOS

VARIACIN ANALTICA
INCERTIDUMBRE (DE LA MEDICIN):
Es el parmetro asociado a un resultado que caracteriza la
dispersin de valores que podra tener esa medicin
Engloba todas las posibles fuentes de variacin

VALORES DE REFERENCIA (NORMALIDAD)

Los valores de referencia son un conjunto de valores de una

magnitud biolgica, obtenidos con un determinado procedimiento

de medida y procedentes de un mismo paciente (valores de
referencia individuales) o de un grupo de individuos (valores de
referencia poblacionales) y que cumplen unos requisitos
determinados.
Para interpretar un anlisis clnico, hay que comparar el valor
observado de cada magnitud biolgica con los lmites de
referencia (valores de referencia) suministrados por el propio
laboratorio que ha realizado la analtica.

CAUSAS DE VARIABILIDAD DE LAS DETERMINACIONES

ANALTICAS.
Variaciones fisiolgicas y analticas.
- Las magnitudes biolgicas varan a lo largo de la vida , de unos individuos

a otros y estn sujetas a las variaciones propias del proceso analtico

- Para la correcta interpretacin de los resultados del laboratorio debemos
conocer ambas fuentes de variabilidad:
LA BIOLGICA Y LA ANALTICA
Ambas variabilidades pueden inducir importantes errores de
interpretacin

VARIABILIDAD BIOLGICA
Variaciones intraindividuales
factores metablicos
ingesta reciente
ejercicio intenso reciente
ritmos biolgicos
Variaciones interindividuales
Factores genticos: sexo, raza, grupo sanguneo
Factores fisiolgicos: edad, embarazo, ciclo menstrual
Factores geogrficos: altitud, clima
Factores morfolgicos: estatura, masa corporal
Factores dietticos: dieta habitual, obesidad
Factores ambientales: estrs, profesin, ejercicio muscular,
ingesta de xenobiticos

VARIABILIDAD BIOLGICA (Ejemplos)

1) Edad: fosfatasa alcalina, glucosa, urea, colesterol, creatinina
2) Sexo: creatinina, urea, hierro, ferritina, bilirrubina, hemoglobina, son
ms altos en el hombre que en la mujer
3) Ingesta de alimentos: tanto la dieta y la ingesta reciente de alimentos
como un ayuno prolongado pueden producir variaciones en la
concentracin de determinados constituyentes:
- Ayuno muy prolongado: hipoglucemia, hiperbilirrubinemia
- Ingesta reciente: lipemia, triglicridos elevados
-Determinados alimentos o bebidas: pueden producir modificaciones en la
concentracin de ciertos constituyentes. La presencia de serotonina en el
pltano, pia, tomate o palta da lugar a una excrecin elevada de cido
hidroxiindiolactico (5HIA) en la orina.
- Los efectos del caf, t y bebidas carbnicas que interfieren en la
determinacin de las catecolaminas.
- Hbitos dietas ricas en protena: cido rico, urea y fosfatos elevados
- ingesta de alcohol: glucosa elevada.
-Alcoholismo crnico : GGTP y VCM elevados

VARIABILIDAD BIOLGICA (Ejemplos)

4) Postura: al cambiar de tumbado (decbito) a erguido, se elevan las
protenas, albmina, hierro, enzimas (GOT, GPT)
5) Estrs: elevacin del cortisol, TSH, prolactina, adrenalina
6) Ejercicio: la actividad fsica tiene una gran influencia sobre
numerosos constituyentes:
- Aumentan las enzimas musculares: CK ,LDH ,AST
- Aumentan las hormonas: cortisol, prolactina, TSH
-Cambios en el hemograma
7) Hospitalizacin: calcemia, calciuria, fosfaturia elevadas (como
consecuencia de la inmovilizacin)
8) Atencin mdica o quirrgica previa: la palpacin de prstata
produce aumento de la fosfatasa cida y PSA
9) Embarazo: aumento de transferrina, colesterol, triglicridos, fosfatasa
alcalina, cortisol, T4, alfa y beta globulinas. algunos cambios son
debidos a hemodilucin.

VARIABILIDAD BIOLGICA (Ejemplos)

10) Ritmos biolgicos:
-Diarios (circadianos) variaciones cclicas durante el da,
factores que contribuyen: estado de vigilia, actividad Ej. el hierro
puede variar en 50% entre las 8-14 horas las hormonas que
siguen un ritmo circadiano (cortisol) hay que estandarizar las
horas de toma de muestra
-Ciclo mensual (Ej. hormonas del ciclo menstrual) FSH
(folculo estimulante)
LH (lteoestimulante), Progesterona, Prolactina: Se deben
expresar los valores de referencia en funcin de la fase del ciclo
menstrual
-Ciclos estacionales:
verano: aumenta la vitamina D, volumen plasmtico
invierno: aumenta el colesterol y albmina

VARIABILIDAD ANALTICA
Todos los factores de variacin que pueden tener lugar durante el
proceso analtico, que va desde la solicitud analtica hasta la entrega de
los resultados. El proceso analtico consta de tres fases, bien
diferenciadas:
- Fase pre-analtica, Fase analtica y Fase post-analtica
De estas tres fases, numerosos factores de la preanaltica o fase preinstrumental pueden originar importantes variaciones en la concentracin
de diferentes magnitudes o constituyentes. Entre estos factores
destacamos:
- La extraccin : duracin de la aplicacin del torniquete.
- Interferencias preanalticas: debidas a la presencia de una sustancia
que altera el resultado final del constituyente que vamos a medir.
Las interferencias pueden ser debidas a fuentes endgenas
(producidas in vivo por ciertas condiciones patolgicas) o exgenas
(debidas a contaminacin de la muestra o bien por la presencia de
determinadas sustancias qumicas)

VARIABILIDAD ANALTICA
Interferencias endgenas
- Suero ictrico: Concentraciones elevadas de bilirrubina, superiores a
25 determinadas magnitudes: albmina, glucosa..
-Suero lipmico: Una alta concentracin de triglicridos da lugar a una
turbidez en el suero que puede inducir a interferencias positivas, es decir
incrementos en las determinaciones fotomtricas de algunas sustancias
como albmina, calcio y fosfato, entre otros. O bien interferencias
negativas, provocando un a disminucin de las concentraciones de
bilirrubina o de actividades enzimticas como de la amilasa, la CK etc.
-Suero hemolizado: la lisis de los elementos formes de la sangre puede
contaminar el suero o el plasma dando lugar al incremento o disminucin
de determinadas magnitudes.
Segn el grado de hemlisis se producen incrementos muy significativos
de las concentraciones de: LDH, AST, potasio y hierro.
La lisis de las plaquetas provoca fuertes aumentos de la concentracin
srica de potasio y magnesio.

VARIABILIDAD ANALTICA
Interferencias exgenas
Contaminacin de la muestra: anticoagulantes o conservantes
- En un plasma obtenido con anticoagulante tipo quelante del calcio
(EDTA),
no se puede determinar los metales divalentes (calcio, hierro,
magnesio.), ni tampoco las enzimas para cuya actividad la presencia de
estos iones es fundamental: fosfatasa alcalina, LDH.
Interferencias qumicas:
- Los tratamientos farmacolgicos, la nutricin parenteral, los
suplementos nutricionales o las drogas de abuso pueden dar lugar a
importantes variaciones en la medida de la concentracin de algunos
constituyentes.

INTERFERENCIAS MEDICAMENTOSAS
Constituyen una fuente importante de variabilidad analtica y que debe tenerse en
cuenta en la interpretacin de los datos del laboratorio. Con frecuencia, cuando se
solicitan pruebas de laboratorio no se especifica la medicacin usual del paciente
ni se valora que influencia pueden tener estos frmacos en los valores de los
resultados analticos.
Interferencias in vitro
Son las producidas por el propio frmaco o alguno de sus metabolitos,debido a:
- tener estructura muy similar al componente a analizar por ejemplo:
hierro (Ferrogadumet,Tardyfron..) en la determinacin del hierro srico o la
metildopa (Aldomet) se valora junto con las catecolaminas
- por las propias propiedades qumicas del frmaco (pH, masa molecular..)
- por interferencias en la determinacin qumica por alteraciones
espectrofotomtricas.
En general, son interferencias mtodo dependientes. Utilizando otro mtodo
analtico desaparecen.
Interferencias in vivo
Son debidas al propio efecto del medicamento. Puede originar:
-un aumento de la sntesis de la enzima responsable de la metabolizacin,
fenmeno conocido como de induccin enzimtica. Ej. Fenobarbital
-Una accin sobre los mecanismos de secrecin o eliminacin.
Ej. los diurticos

En resumen, para una correcta interpretacin clnica de los datos del laboratorio, antes de
atribuirles un significado patolgico hay que valorar las distintas fuentes de variabilidad:
-Variaciones biolgicas: en su mayor parte, a variaciones fisiolgicas de los individuos,( edad,
sexo, raza, embarazo..) o bien al uso de medicamentos
- Variaciones pre-analticas: al error resultante de todas las fuentes de variacin producidas
desde la toma de muestra hasta la introduccin de sta en la cadena analtica
-Variaciones analticas o instrumentales: corresponden al error analtico debido a los
mtodos de valoracin.
Los efectos de las interferencias medicamentosas pueden ser:
- Interferencias metodolgicas (in vitro) o mtodo dependiente: en stas, el medicamento
y /o sus metabolitos pueden perturbar la valoracin de un componente a cualquier nivel.
- Interferencia o efecto biolgico (in vivo) o mtodo independiente: en las cuales el
medicamento provoca un cambio en la magnitud biolgica por medio de un mecanismo
fisiolgico, farmacolgico o toxicolgico. Este trmino representa una parte de los efectos
secundarios inesperados, deseables o indeseables de los medicamentos.

Caso 1
Hombre de 55 aos hospitalizado con potasio srico de 6,9 mmol/l en una
muestra no hemolizada obtenida en un laboratorio externo a la clnica.
El resto de las pruebas son normales. Durante la hospitalizacin los valores de

potasio srico varan de 3,9 a 4,5 mmol/l (normal 3,5 a 5 mmol/l).

Se pudo determinar que en la clnica externa la extraccin se realiz con

aplicacin de torniquete y contraccin del puo.

En el hospital se realiz la extraccin por medio de un catter.
La causa de esta pseudo hiperkalemia result ser la repetida contraccin del

puo durante la aplicacin del torniquete.

La contraccin de los msculos del antebrazo caus una liberacin de potasio

debido a la reduccin de la negatividad intracelular durante la depolarizacin de

las fibras musculares, causando un eflujo de potasio.
Este efecto puede llevar a un aumento de 1-2 mmol/l de potasio lo que se

traduce en un aumento de 2,7 mmol/l.

CASO 2
Un hombre de 40 aos hospitalizado con potasio srico de 8.0 mmol/l (normal 3,5

a 5 mmol/l) obtenido sobre una muestra no hemolizada.

El tratamiento administrado para reducir el nivel de potasio no result exitoso,

debido a que una nueva determinacin sobre muestra no hemolizada dio un

resultado de 7,0 mmol/l.

Para entonces el paciente se mostraba confuso, desarroll calambres y vmito. Se

pidi entonces una determinacin de potasio en sangre total, que dio como
resultado 2,7 mmol/l.

Inmediatamente se suspendi la terapia para disminuir el potasio.

Al examinar los resultados de hematologa se vio que el recuento de glbulos

blancos era de 20.000/mm3 y el recuento de plaquetas de 480.000/mm3.

En este caso el incremento de potasio en la muestra no hemolizada se debi a la

liberacin de potasio por lisis de las plaquetas en el proceso de centrifugacin.

En sangre total, sin embargo las plaquetas estaban intactas y los valores de

potasio obtenidos por electrodo ion selectivo reflejaron el valor real.

El paciente en realidad tena un valor de potasio normal en el momento de iniciar la

terapia basada en un dato errneo.

CASO 3
Una mujer de 75 aos aparentemente confusa es hospitalizada.
El perfil de electrolitos resulta anormal con sodio de 162 mmol/l (normal 134-

145 mmol/l) y cloruro de 125 mmol/l (normal 100- 108 mmol/l).

Tres das despus de la hospitalizacin su sodio y cloruro sricos han

retornado a lo normal y se la ve ms alerta.

Al egreso del hospital, la paciente se queja de la calidad de la comida y

especialmente de su falta de condimento, luego de lo cual pudo

establecerse que dentro de las 10 horas previas a la internacin la paciente
haba ingerido un tipo de comida que haba aportado entre 1338 y 1870
mmol/l de sodio, que an despus de la dilucin por el agua corporal result
en las concentraciones de sodio y cloruro encontradas al ingreso.
Su estado de confusin se deba a un efecto hiperosmtico del sodio que

caus un eflujo de agua de las clulas, entre ellas las cerebrales.

CASO 4
Una mujer anmica de 85 aos presenta al ingreso de la internacin los

siguientes resultados hematolgicos: Hb 10,3 g/dl, leucocitos 9.200/mm3,

plaquetas 354.000 /mm3).
Unos das despus la hemoglobina result de 22.9 g/dl, los leucocitos

3.700/mm3 y las plaquetas 78.000/mm3.

El ensayo fue repetido obtenindose los mismos resultados, pero al

realizarlos una vez ms, se obtuvieron resultados bastante similares a los

del ingreso.
La razn de estas discrepancias fue que el tubo que contena la muestra

para el hemograma estaba lleno hasta el tapn de goma, no dejando

espacio de aire para que se produjera la homogeneizacin de la muestra en
el agitador mecnico.
Cuando se llev a cabo el ltimo ensayo, ya haba sido retirada del tubo

gran cantidad de muestra como para que la burbuja de aire debajo del tapn
de goma se deslizara permitiendo la homogeneizacin de la muestra en el
agitador.

CASO 5
Una mujer de 38 aos, bioqumica, maneja animales en un laboratorio de

investigacin.
Su concentracin de tiroxina en suero es de 180 nmol/l (normal 58-140
nmol/l), la T4 libre es de 19,3 pmol/l (normal 9-24 pmol/l) y la TSH 15
U/l (normal 0,5 - 5 U/l).
La repeticin de la TSH en otro laboratorio y por otro mtodo result en
un valor normal (4,0 U/l)
El incremento de TSH observado en primer trmino se debi a la
presencia de anticuerpos humanos antiratn que pueden interferir en
algunos ensayos inmunolgicos.
El mecanismo de la interferencia puede ser por captura del anticuerpo
indicador, dando una reaccin falsamente positiva, o en caso de que los
anticuerpos antiratn se encuentren en exceso, impidiendo al anticuerpo
marcado formar la unin con el de captura unido al analito, dando una
reaccin falsamente negativa.
Aparentemente el ensayo que sobrestim la TSH, no tena suficiente
cantidad de inmunoglobulinas de ratn en el medio de ensayo como para
absorber los anticuerpos anti-ratn.

CASO 6
Una mujer de 59 aos tratada con inhibidor de la colinesterasa tiene el

siguiente perfil de electrolitos:

Sodio: 240 mmol/l, (normal 135 - 145 mmol/l)
Potasio: 4,2 mmol/l, (normal 3,5 - 5 mmol/l)
Cloruro: 114 mmol/l (normal 100 - 106 mmol/l) y
Bicarbonato: 34 mmol/l (normal 22 -26 mmol/l).

El anion-gap es negativo, lo que tericamente sera imposible.

En una investigacin posterior se vio que el inhibidor de la colinesterasa

administrado a la paciente es bromuro de piridostigmina.

Dado que el electrodo ion selectivo utilizado para efectuar la determinacin

de cloruro es igualmente sensible para bromuro, el cloruro de la muestra fue

sobrestimado, resultando en un anion gap negativo.

CASO 7
Un hombre de 60 aos con debilitamiento de cabello esta tomando un

medicamento para este problema.

Antes del tratamiento con este medicamento, la determinacin de su

antgeno prosttico especfico (PSA) haba dado un resultado de 10 ug/l,

(normal 0-4 ug/l).
Ms tarde, su PSA dio como resultado 4,5 ug/l.
El resto de sus pruebas fueron normales.
La droga de su tratamiento era finasteride que interfiere la conversin de

testosterona a dihidrotestosterona, y en los hombres mayores con

hiperplasia prosttica benigna se ha informado una cada del 50% en la
PSA.

CASO 8
El perfil de electrolitos de un paciente con exceso de glucosa, 55,5 mmol/l

(normal 3,9-6,1 mmol/l) fue el siguiente:

Sodio 81 mmol/l (normal 135 - 145 mmol/l)
Potasio 2,3 mmol/l (normal 3,5 - 5 mmol/l)
Cloruro 48 mmol/l (normal 100 - 106 mmol/l) y
Bicarbonato 18 mmol/l. (normal 22 - 26 mmol/l)

Se determin que el paciente estaba recibiendo solucin de glucosa y la

muestra haba sido recolectada del mismo brazo en que se estaba

recibiendo la infusin, causando un efecto de dilucin en la concentracin de
electrolitos.

CASO 9
Resultados de laboratorio anormales en un hombre de 43 aos:
Fosfatasa alcalina: 5 U/l (normal 45-115 U/l),
Calcio: 0,5 mmol/l (normal 2,1 - 2,6 mmol/l) y
Potasio: 22 mmol/l (normal 3,5 -a 5 mmol/l) en una muestra no

hemolizada.

En una investigacin posterior se encontr que el plasma haba sido

obtenido de sangre recolectada con EDTA tripotsico.

El EDTA produjo un quelato con el magnesio y el zinc requeridos

para la actividad de la fosfatasa alcalina, por lo que el resultado de

la fosfatasa alcalina fue bajo.
El EDTA tambin es complejante del calcio lo que condujo a su

grosera subestimacin.
El potasio en el EDTA, fue responsable de la elevacin de la

concentracin de este ion a un nivel fisiolgicamente imposible

CONCLUSION
ES

La fase preanaltica es crucial en la calidad de los resultados de

Laboratorio
Los esfuerzos para la estandarizacin de los factores que afectan

esta fase han aumentado en la actualidad gracias a la conciencia de

que los mismos pueden ser crticos en el resultado y su
interpretacin
Esto, sumado a la introduccin de estrategias para reconocer estos

errores, con el objetivo de lograr una calidad total en el laboratorio

parece ms cercana.