FUSIN DE PROTOPLASTOS

Participantes:
-Diego Rodrguez
-Omar Rodrguez
-Ricardo Soto

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PROTOPLASTOS
Los protoplastos son clulas de cualquier tejido
vegetal a las que se les ha liberado de la pared celular
que es la barrera que impide el paso de grandes
molculas como el ADN. De esta manera queda
eliminada la barrera principal para la introduccin de
genes forneos

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Puede realizarse una transferencia directa de genes por

medio de la fusin de protoplastos, mediante qumicos
como el PEG (polietilenglicol), de donde se obtienen
hbridos nucleares y luego clulas transgnicas por
recombinacin.
Con esta tcnica, se consigui por primera vez
cereales transgnicos en 1988.

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Es una tcnica de biotecnologa en la cual se produce

la fusin de las membranas de dos o ms clulas
dando lugar a un hbrido somtico.

Tpicamente

se

realiza

mediante

protoplastos

vegetales, esto es, clulas vegetales desprovistas

de pared celular.

La fusin de protoplastos se emplea en programas de

mejora de vegetales.

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Beneficios:

Permite obtener combinaciones de genes nucleares y

citoplasmticos.

Sirve tambin para incorporar caractersticas como

resistencia a herbicidas, resistencia a estreses abiticos,
resistencia a enfermedades.

Permite transferir caracteres sin necesidad de contar con

un conocimiento detallado de los mecanismos
moleculares que determinan la expresin de dichos
caracteres.
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La tcnica podra ayudar mucho en la generacin de

nuevas variedades. La fusin de protoplastos no est
considerada como parte de la Ingeniera gentica, pero
ha sido un gran avance en la obtencin de hbridos y
variedades, en plantas que se dificulta sta prctica por
sus condiciones de partenocarpias (no producen
semillas).

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Mtodos para la fusin de protoplastos

Mtodo qumico: con soluciones de NaAO3 o

polietilenglicol (PEG); con lo cual se logra por agregacin
celular y fusin al azar.

Mtodo fsico: usando electroporacin o electrofucin; con

lo cual se descarga temporalmente la carga negativa
interna debajo de la membrana, la cual impide la fusin
natural, este proceso no es utilizado.

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Mtodos qumico

Se seleccionan dos plantas que se deseen fusionar.

Separadamente se aslan un grupo de clulas.
A cada cultivo de clulas se le agregan la enzima
pectinasa para eliminar la pared celular dejando el
protoplasto descubierto.
Se coloca ambos tipos de clulas en un cultivo especial
de polietilenglicol que favorece la fusin de las
membranas celulares.
Entre 24 y 48 horas el ncleo de la clula se ha fusionado
pero sus organelos permanecen separados.
Si continua el cultivo la clula empezara a reproducirse y
se obtendr el hibrido vegetal.
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Materiales utilizados para la fusin de protoplastos:
Semillas de ambas frutas o vegetales que se desean
fusionar.
Hipoclorito de sodio.
Agua destilada.
Enzima polietilenglicol.
Capsulas de Pietri.
Centrifugadora.
Tamiz.
Enzima Pectinasa.
Bisturi.
Pinzas.
Micropipetas.
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Uso ms frecuentes de la fusin de protoplastos
Estudios de fitomejoramiento e hibridacin somtica.
Estudios bsicos de embriologa vegetal
Cada protoplasto puede ser usado como un sistema
celular individual.
Manipulacin gentica.
Estudios bsicos de fisiologa, biofsica, bioqumica

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Problemas que pueden traer la fusin de protoplastos
El resultado de la fusin de protoplastos, son
productos vegetales transgnicos.
Son tan beneficiosos como los productos naturales?
Si bien la tecnologa permite el mejoramiento de ciertas
caractersticas de las plantas, se debe tener en consideracin
que los productos transgnicos son artificiales, por lo tanto, aun
queda por establecer si constituyen un riesgo para nuestra salud.

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Problemas que pueden traer la fusin de protoplastos
El resultado de la fusin de protoplastos, son productos vegetales
transgnicos.
Son tan beneficiosos como los productos naturales?
Si bien la tecnologa permite el mejoramiento de ciertas caractersticas de las
plantas, se debe tener en consideracin que los productos transgnicos son
artificiales, por lo tanto, aun queda por establecer si constituyen un riesgo para
nuestra salud.

Si bien presentan aspectos muy positivos, como la alta

produccin y la calidad a menor costo, hoy se sabe que entre sus
efectos existen protenas que pueden ser dainas, como es el
caso de los priones, que son partculas patgenas
y
transmisibles que producen enfermedades que afectan el sistema
nervioso central.
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Es til a largo plazo?
Si es til debido a que:
Pueden
multiplicarse
y
desarrollar estructuras
similares a embriones y desde ellos, plantas adultas.
Permite chequear clulas en vez de plantas enteras
para seleccionar una caracterstica ventajosa
(ej. Resistencia o tolerancia a un herbicida).

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Es til a largo plazo?
Si es til debido a que:
Las clulas vegetales se pueden hacer crecer en un
medio lquido en el laboratorio o en grandes
biorreactores,
como fuentes
de productos
secundarios tales como medicamentos u otros
productos industriales.

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Es til a largo plazo?
Si es til debido a que:
Pueden fusionarse con protoplastos de otros tipos o
especies, obteniendo hbridos somticos incluso de
especies
sexualmente
incompatibles.
La fusin de
protoplastos tambin permite el intercambio de orgnulos
citoplasmticos y la recombinacin gnica entre genomas
mitocondriales o diferentes.
Pueden incorporar nuevos genes mediante vectores
adecuados.

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Es til a largo plazo?
Si es til debido a que:
Podemos chequear el resultado del constructo gnico en
el protoplasto o regenerar la planta. Estos transgenes
permiten a las plantas modificar y mejorar sus
caractersticas (Ej. Mayor resistencia a plagas, rango de
salinidad ms amplio, mejores caractersticas,..).

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