Experimentos de M.

Delbrck
Y
S. Luria
Experimento de Hersey
y Chase

P* DNA

S* Protenas
Modelo de DNA en base
Apareamiento de bases en el DNA
Replicacin semiconservativa
del DNA
aorquillas de replicacin en clulas embrionarias
de Drosophila m.
Experimento de Beadle y Tatum

Mutantes de neurospora
=lujo de la informacin en los organismos.
urocarionte

Eucarionte
 Mecnica de la Replicacin

a enzima ADN helicasa separa las dos cadenas complementarias formando

"horquillas de replicacin".

as hebras separadas son antiparalelas (5' 3' y la otra 3' 5').

a ADN polimerasa slo cataliza la adicin de nucletidos en el extremo

hidroxilo 3'.

a hebra 5' 3', crece normalmente por la accin catalizadora de la ADN

polimerasa.

a hebra 3' 5' copia una secuencia de ARN denominado "primer ARN" que
inicia la hebra 5' y permite que la ADN polimerasa adicione un nucletido en el
extremo 3', para continuar de manera similar a la hebra 5' 3'.

a ADN polimerasa remueve el "primer ARN" y el hueco dejado es llenado por

base nitrogenadas complementarias catalizadas por enzimas denominadas ligasas.
Mecnica de la Replicacin
 Mecanismo de la transcripcin del ARN mensajero.

a enzima ARN polimerasa se une a la regin promotora del ADN cercana al inicio
de un gen.

a doble hlice de ADN se desenrolla.

a ARN polimerasa viaja a lo largo de la cadena patrn, catalizando la formacin

de una cadena continua de ARNm a partir de los nucletidos libres de ARN.

a ARN polimerasa contina hasta el extremo final del gen.

Al final del gen, la ARN polimerasa abandona el ADN que vuelve a enrollarse y la
molcula de ARNm es liberada
 ranscripcin de la informacin
Regiones promotoras de la transcripcin
Regin de inicio de la traduccin
 ntesis de RNA

Distintas enzimas actan en la sntesis de los diferentes tipos de RNA

RNA pol I Genes rRNA

RNA pol II Genes mRNA

RNA pol III Genes tRNA

Mecanismo de la transcripcin del ARN mensajero.
Edicin
de la informacin
transcrita al
mRNA


Cdigo
gentico
 Mecanismo de Traduccin.

1. Activacin de los aminocidos. a s ntesis de una prote na demanda

dos requerimientos qu micos fundamentales:

.- el grupo carboxilo de los aminocidos debe ser activado para permitir

la formacin del enlace pept dico.

.- una interaccin o interrelacin entre cada aminocido y el mensaje

codificado en el mRNA.



  

  
     


   
  
 
 


  
 Mecanismo de Traduccin.

2. Iniciacin. El mRNA se une a la subunidad menor del ribosoma junto

al aminoacil tRNA iniciador.

e une la subunidad mayor formndose el denominado Complejo de

Iniciacin.

El aminoacil-tRNA iniciador interacta con el codn AUG que indica

el inicio del mensaje. Este proceso requiere de Gu y de una serie de
prote nas llamadas =actores de Iniciacin.

3. Elongacin. a cadena del polipptido comienza a alongarse a

travs de la unin covalente y secuencial de cada aminocido.

os aminocidos son transportados al ribosoma por sus respectivos

tRNA.

Durante este proceso participa una serie factores de elongacin y

tambin se requiere Gu para facilitar la entrada de cada aminoacil-
tRNA al ribosoma y el movimiento del ribosoma sobre el mRNA.
 Mecanismo de Traduccin.

4. Terminacin. a finalizacin de la s ntesis de la prote na

(polipptido) est codificada en el mRNA mediante los Codones
de Trmino.

El trmino de la traduccin es facilitada por la participacin de

los factores de liberacin y tambin se requiere de ATP.

5. Plegamiento y procesamiento post-traduccional. uara que

la prote na pueda cumplir su funcin biolgica debe plegarse y
as alcanzar su estructura nativa tridimensional.

Antes y despus de plegarse la prote na puede sufrir una serie

de modificaciones que son necesarias para alcanzar tanto su
destino final en la clula como su funcin biolgica.
 Mecanismo de Traduccin.
6. Destinacin.

a ubicacin de la prote na en compartimentos celulares o

extracelulares definidos depender a de un cdigo de seales no del
todo descifrado.

Diferentes mecanismos que operan durante y despus de la

traduccin parecen participar en la distribucin diferencial de las
prote nas (sorting o destinacin).

ales mecanismos en bacterias y eucariontes presentan

semejanzas y diferencias.
 Sntesis de protenas

El ARNm transcrito, a partir de un gen, sale del ncleo y se une al

ribosoma en el citosol.

El ARNm se une a la subunidad menor de un ribosoma.

El ARNt que lleva el aminocido (metionina) reconoce el codn de

iniciacin en el ARNm y se une a l.

a subunidad mayor encaja en el complejo: subunidad menor,

ARNm y ARNt. Esta subunidad contiene los sitios A u y el catal tico.

En el inicio el ARNt con el aminocido respectivo ocupan el sitio u.

Cuando se produce el alargamiento de la cadena de aminocido, el

segundo ARNt reconoce al segundo codn y se liga ocupando el
sitio A de la subunidad mayor.
 Sntesis de protenas

El ARNt que ocupaba el sitio u es desalojado y su lugar es ocupado

por el ARNt que contiene en el extremo libre los dos aminocidos
unidos.

En el sitio catal tico de la subunidad mayor del ribosoma, se une el

primer aminocido con el segundo a travs de un enlace pept dico.

Este proceso se repite hasta que se encuentra con el codn de

terminacin en el ARNm.

as subunidades ribosmicas quedan separadas y el ARNm es

liberado.
Entrecruzamiento
O
Croccing - over
Secuencia de DNA

reconocidas por

enzimas de restriccin:

HpaI

EcoRI

Hind III
Infeccin de una clula animal
por un retrovirus
Enzima de restriccin Eco RI

Extremos pegajosos GAAC

 Amplificacin del DNA reaccin en cadena de la polimerasa

PCR
 Transformacin bacteriana
Y
localizacin de un segmento de DNA
(sonda radioactiva)
 Hibridacin in situ
de ADN
Cromosomas humanos
Proyecto de la somastotatina
Regulacin de la expresin
pern inducible
pern represible