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metodo di analisi
Validazione
Validazione di un metodo analitico:
Conferma attraverso lesame e lapporto di
evidenza oggettiva che i requisiti particolari
per lutilizzazione prevista siano soddisfatti
(UNI EN ISO 9000:2000)
Quando
validare
un
metodo?
Quando un metodo
non normato
sviluppato e/o progettato dal laboratorio
normato ma utilizzato al di fuori del proprio scopo e campo di
applicazione prefissato
le pi comiuni situazioni sperimentali che impongono la validazione sono
le seguenti:
un nuovo metodo sviluppato per scopi particolari;
un metodo analitico normato deve essere aggiornato, migliorato o esteso
ad un nuovo problema analitico;
il controllo di qualit evidenzia variazioni temporali dei parametri di
qualit;
un metodo stabilito deve essere usato in un diverso laboratorio, da un
diverso analista, con diversa strumentazione;
necessario dimostrare lequivalenza del metodo in esame con un
metodo standard.
Validazione
Il laboratorio che utilizza un metodo
deve avere la documentazione che
dimostri lappropriata validazione del
metodo stesso.
responsabilit dellutilizzatore
assicurare che la validazione
documentata sia sufficientemente
completa
Validazione
Non ci sono linee guida ufficiali per la
sequenza degli esperimenti necessari
per la validazione
La sequenza ottimale pu dipendere
dal metodo stesso
E` sempre necessaria la stima
dellincertezza di misura
Specificit-Selettivit analitica
Specificit: Si riferisce ad un metodo che
produce una singola risposta
Selettivit: si riferisce ad un metodo che
produce pi risposte (metodo separativo)
ABILIT DI MISURARE ACCURATAMENTE
LANALITA IN PRESENZA DI INTERFERENTI
Limite di rilevabilit
Limite di quantizzazione
La Pi bassa concentrazione analitica che
pu essere determinata quantitativamente
con accettabile precisione ed esattezza
nelle condizioni sperimentali del metodo
LdQ = 10*Sb/S
Linearit
La linearit di un metodo analitico la sua
abilit di dare risultati che sono direttamente
proporzionali alla concentrazione degli
analiti nei campioni allinterno di un
determinato campo di validit
la proporzionalit pu essere raggiunta
anche attraverso trasformazioni
matematiche ben definite
Linearit
Deve essere verificata attraverso il calcolo del coefficiente di
correlazione della curva di taratura eseguita, quando possibile,
con aggiunte standard alla matrice da analizzare. Curve di
taratura su matrici diverse o in soluzioni standard (contenenti
soltanto il solvente e l'analita) possono essere utilizzate previa
specificazione delle motivazioni nel metodo di prova. Sono
generalmente accettati coefficienti di correlazione (r secondo il
metodo dei minimi quadrati) pari almeno a 0,99.
Una non-linearit significativa dovrebbe essere corretta
mediante l'utilizzo d funzioni di taratura non lineari o eliminata
restringendo lintervallo di concentrazioni in cui si opera.
Linearit
Si deve effettuare almeno da 3 a 6
repliche di 4 o pi concentrazioni
Nella validazione del metodo devono
essere riportati il coefficiente di
correlazione, la pendenza, lintercetta e
i residui, oltre ad un grafico dei dati
sperimentali e della curva calcolata
Esattezza
Grado di concordanza tra il valore
medio ottenuto a partire da un grande
insieme d risultati di prova, e un valore
d riferimento accettato
Ripetibilit
concordanza tra risultati di prova indipendenti
ottenut con lo stesso metodo su materiali
dentici, nello stesso laboratorio, dallo stesso
operatore, usando la stessa apparecchiatura
e in intervalli di tempo brevi (stessa serie
analitica)
Precisione intermedia
Concordanza tra risultati di prova indipendenti
ottenuti con lo stesso metodo su material
identici, nello stesso laboratorio, dallo stesso
operatore, usando la stessa apparecchiatura e in
intervalli di tempo lunghi (diverse serie analitiche
con possibilit di cambiamento del lotto dei
reattivi e dei materiali di consumo).
Riproducibilit
concordanza tra risultati di prova
indipendenti ottenuti con lo stesso metodo
su materiali identici, in laboratori diversi, da
operatori diversi, usando apparecchiature
diverse e in intervalli di tempo diversi
Incertezza di misura
Robustezza
Insensibilit a piccole variazioni dei
parametri sperimentali
Variazioni deliberate
% solventi organici
pH
temperatura
Flusso