Aula Prtica II

Solubilidade de
Protenas
(14/06/2016)

OBJETIVO
O objetivo da Aula Prtica II foi
de compreender como a
solubilidade das protenas
afetada pela polaridade do
solvente e pelo pH do meio.

SOLUBILIDADE
As propriedades funcionais das
Protenas costumam ser afetadas
pela solubilidade das mesmas. A
solubilidade de uma protena
uma manifestao termodinmica
do equilbrio entre interaes
protena-protena e protenasolvente.

A Solubilidade uma propriedade

que depende de um conjunto de
fatores:
Peso Molecular
Densidade e Distribuio das
Cargas Eltricas
pH
Natureza e Concentrao de ons
e Fora Inica
Temperatura

Com base na Solubilidade, as Protenas

so divididas em 4 categorias:
Albuminas Solveis em gua em pH
6,6
Globulinas Solveis em solues
salinas diludas em um pH de 7,0
Glutelinas Solveis apenas em
solues cidas de pH 2,0 e alcalinas
de pH 12,0
Prolaminas Solveis em etanol a
70%

MATERIAL

Clara de Ovo
Tubos de Ensaio
Pipetas
Etanol a 95%
Acetona
Soluo de HCl (1N) e NaOH
(1N)

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
Tubos de Ensaio foram numerados de 1 a 5, de
acordo com a propriedade que se pretendia
analisar.
Tubo 1 Efeito do pH (Meio gua Destilada)
Tubo 2 Efeito da Polaridade do Solvente
(Etanol)
Tubo 3 Efeito da Polaridade do Solvente
(Acetona)
Tubo 4 Efeito do pH (Meio cido HCl 1N)
Tubo 5 Efeito do pH (Meio Bsico NaOH
1N)

Com o auxlio de uma proveta, foram

adicionados no Tubo 1: 5 mL da Clara
de Ovo e 5 mL de gua Destilada:

O contedo do tubo foi misturado por

inverso, e logo em seguida observouse o seguinte aspecto:

No Tubo 2, foram adicionados 5 mL da Clara de Ovo e

em seguida 5 mL de Etanol, sendo que este ltimo
foi adicionado de modo a permitir que o solvente
escorresse pelas paredes do recipiente:

Em seguida, misturou-se o contedo do tubo

por inverso e foi constatada uma mudana
completa no aspecto visual da soluo
contida no recipiente:

O procedimento para o Tubo 3 foi similar ao anterior,

porem neste caso o solvente utilizado foi a Acetona. 5
mL da Clara de Ovo foram adicionados ao tubo e em
seguida acrescentou-se 5 mL de Acetona, deixando o
solvente escorrer pelas paredes do tubo de ensaio.

Ao realizar a agitao do tubo por inverso, o

aspecto visual da soluo, tal qual ocorrido na
etapa anterior, tambm sofreu modificao
em seu aspecto visual:

No Tubo 4, foram adicionadas alquotas

de 0,5 mL de HCl 1 N. A cada alquota
adicionada o pH da soluo foi
verificado (pH = 4).

No tubo 5, o procedimento foi similar ao da

etapa anterior, porm neste caso pretendiase avaliar o efeito da solubilidade das
protenas em meio alcalino, com a adio
de alquotas de 0,5 mL de NaOH 1N. O pH
da soluo foi verificado. (pH = 10)

RESULTADOS E
DISCUSSO

Ao final de cada procedimento, os 5 tubos

foram dispostos lado a lado de modo que se
pudesse visualizar e comparar cada variao
sofrida.

Tubo 1 Meio Neutro

Em meio neutro, a solubilidade das
protenas no afetada.

Tubo 2 Solvente Apolar

No caso do Tubo 2, a adio de um solvente
orgnico apolar ocasionou a desnaturao
das protenas, ou seja, modificaes na
estrutura nativa da Protena.

Tubo 3 Solvente Polar

No caso do Solvente Polar, ocorreu
uma desnaturao parcial do
contedo proteico do tubo, com a
formao de duas fases.

Tubos 4 e 5 pH cido e pH Bsico

No caso dos tubos 4 e 5, as protenas se
solubilizaram. Em valores de pH baixos (4) e
elevados (10), as protenas tendem a se solubilizar
por conta do excesso de cargas de mesmo sinal,
gerando um efeito de repulso entre as molculas e
favorecendo a solubilidade