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DE IDENTIFICACIN
TSI (TRIPLE AZCAR HIERRO AGAR)
Medio universalmente empleado para la
diferenciacin de enterobacterias, en base a la
fermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa y a la
produccin de cido sulfhdrico.
TSI (TRIPLE AZCAR HIERRO
AGAR)
Fundamento: Sirve para detectar la fermentacin
de hidratos de carbono. El medio contiene: glucosa
al 0.1%, lactosa 1%, sacarosa al 1% y peptonas;
tambin tiene un indicador rojo de fenol y El
tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la
produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro
y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se
combinan con el cido sulfhdrico y producen
sulfuro de hierro, de color negro.
Procedimiento: El medio se fracciona en picos de
flauta con una capa basal profunda (2 cm. por lo
menos). Con el ansa en punta se siembra por
puncin y estra.
El medio no inoculado es anaranjado-rojizo o rojo
plido. Incubar 24 hs a 35 C.
TRIPLE AZCAR HIERRO
TSI (TRIPLE AZCAR HIERRO AGAR)
Interpretacin:
Fermentacin de la glucosa (alcalino/cido)
Primero los microorganismos empiezan a fermentar la glucosa,
produciendo cidos y virando totalmente el medio a color amarillo.
Como solamente utilizan la glucosa, no pueden usar la sacarosa ni la
lactosa, cuando la glucosa que se halla en baja concentracin se
consume (antes de las 24hs) los microorganismos comienzan a
utilizar la peptonas con produccin de amonaco que alcaliniza el
medio dando un color rojo, pero solamente en el pico, quedando el
fondo cido.
Fermentacin de glucosa, lactosa y sacarosa (cido/cido)
Como la lactosa y sacarosa estn en una proporcin 10 veces mayor
que la glucosa, en un perodo de 24hs., la lactosa y sacarosa, an no
se consumen quedando cido el medio o sea totalmente amarillo.
No fermentacin de lactosa, sacarosa ni glucosa (alcalino/alcalino).
Un microorganismo incapaz de obtener sus nutrientes de los hidratos
de carbono, lo obtiene de las peptonas. Cuando las peptonas son
degradadas libran amonaco y alcalinizan el medio. Producindose
entonces intensificacin del color.
CONSIDERACIONES DEL TSI
1- Decarboxilacin de la lisina:
-Prueba Positiva: Pico violeta/fondo violeta.
-Prueba Negativa: Pico violeta/fondo amarillo.
2-Desaminacin de la lisina:
Pico rojizo/fondo amarillo. Esto sucede con cepas
del gnero Proteus, Providencia y alguna cepas de
Morganella spp.
3-Produccin de cido sulfhdrico:
-Prueba positiva: Ennegrecimiento del medio
(especialmente en el lmite del pico y fondo)
AGAR SIM
FUNDAMENTO:
TRIPTOFANASA
H2O + TRIPTOFANO INDOL + AC. PIRUVICO + NH3
INTERPRETACIN:
NEGATIVO POSITIVO
POSITIVO NEGATIVO
CITRATO DE SIMMONS AGAR