MICOLOGA

* Tambin llamada micetologa, es

la ciencia que se dedica al estudio
de los hongos
 un grupo de organismos
eucariotas entre los que se
encuentran los mohos, las
levaduras y las setas. Estos
pueden ser de virulencia alta
 LOS HONGOS MICROSCPICOS COMPRENDEN
LAS LEVADURAS, HONGOS FILAMENTOSOS Y
MOHOS
 EXISTEN APROXIMADAMENTE 100,000 ESPECIES
DE HONGOS MICROSCOPICOS
VIVEN COMO SAPROFITOS
50 ESPECIES PRODUCEN ENFERMEDADES EN EL
HOMBRE Y ANIMALES
8000 ESPECIES CAUSAN
ENFERMEDADES EN PLANTAS
 EN EL AREA DE LA INDUSTRIA FARMACEUTICA
ALGUNOS HONGOS SON UTILIZADOS PARA
OBTENER ANTIBIOTICOS, COMO LA
PENICILINA DEL GENERO PENICILLIUM.
 PUEDEN USARSE EN LA DEGRADACION DE
HIDROCARBUROS
CRECEN TANTO EN AGUA DULCE COMO EN
AGUA SALADA
ALGUNOS HONGOS PRODUCEN SUSTANCIAS
TOXICAS EN ALIMENTOS
*Los hongos son muy
abundantes y ubicuos en la
naturaleza.
* Son excelentes
degradadores de materia
orgnica
Los hongos son diferentes a otros
organismos vivos, carecen de clorofila, no
pueden ser auttrofos, por tanto,
necesitan obtener sus requerimientos
nutricionales de material orgnico ya
formado.
*Son organismos eucariotas.
*Son quimio hetertrofos.
*Son inmviles.
*Pueden ser unicelulares o pluricelulares.
ANATOMA DE LA CLULA
FNGICA
 ANATOMA
La clula fngica es una de las menos
conocidas. Posee organizacin eucariota
tambin.

Se suele decir a menudo que este tipo de

clula se parece a la clula animal.
 ANATOMA
ELEMENTOS DE LA ENVOLTURA:
Cpsula
Pared celular
Membrana plasmtica
ELEMENTOS INTERNOS:
Ncleo
Sistema endomembranal
Ribosomas
 CPSULA
Situada fuera de la pared
celular (en pocas especies)
Del gnero Cryptococcus,
como el Cryptococcus
neoformans.
 CPSULA
Compuesta por polisacridos
(glucoroxidomananos) que brinda proteccin
frente a las defensas del hospedero.

En hongos unicelulares tiene polisacridos

mucilaginosos, con capacidad inmungena y
accin antifagocitaria.
 PARED CELULAR
Tiene crecimiento
constate.

Protege a la clula.

Le da su forma caracterstica.

Tiene nutricin absortiva.

 PARED CELULAR
Est formada por capas (polmeros
polisacridos fibrilares) como la quitina y la
celulosa.
Contiene protenas asociadas con
polisacridos y lpidos (antgenos).
Por ejemplo: CANDIDA.
 MEMBRANA PLSMATICA
Se ubica debajo de la pared celular.
Integrada por fosfolpidos y protenas.
Mesosomas.
Transporta sustancias de un lugar de la
membrana a otro. (regulacin)
Permite la permeabilidad y es selectiva.
Rica en sistemas enzimticos. Por ejemplo:
citocromo P450.
Proteccin y forma.
MEMBRANA PLSMATICA
 NCLEO
Posee membrana porosa que permite la
comunicacin con el citoplasma.
Tiene entre 2 y 4 cromosomas y un nuclolo.
Forma esfrica
u ovalada.
Contiene la
mayor parte del
material gentico.
 NCLEO
Funciones:
Replicacin y transcripcin de cidos
nucleicos.
Almacena la informacin
gentica, pasndola a las
clulas hijas en el
momento de la divisin
celular.
 SISTEMA ENDOMEMBRANAL
Es un sistema de membranas interconectadas
que recorren el citoplasma desde el ncleo hasta
la membrana plasmtica.
Se divide en:
Envoltura nuclear.
Retculo endoplsmatico liso y rugoso.
Aparato de Golgi.
Lisosomas.
Vacuolas.
 SISTEMA ENDOMEMBRANAL
Envoltura nuclear:
doble unidad de
membrana porosa que
delimita al ncleo.
Por los poros entran
al ncleo las protenas,
fabricadas por los
ribosomas

Retculo endoplsmatico: red membranosa comunica a la

membrana con el ncleo.
 SISTEMA ENDOMEMBRANAL
RER: Transporta sustancia y en su superficie
representa ribosomas las cuales
sintetizan protenas que
posteriormente son
modificadas por el
RER.
 SISTEMA ENDOMEMBRANAL
REL: su funcin es la
sntesis de lpidos.
No posee ribosomas.
 SISTEMA ENDOMEMBRANAL
Aparato de golgi: continuacin del R.E. el cual
modifica protenas
y lpidos producidos
en el RE , es un
sistema de
empaquetado
y de entrega de
molculas.
 SISTEMA ENDOMEMBRANAL
Lisosomas: organelos esfricos que efectan la
degradacin o digestin.
Vacuolas: almacenan aceite o almidn y
bombean el exceso de agua.
 RIBOSOMAS
Orgnulos pequeos que producen protenas
propias (sntesis de protenas).
Formados de ARN y protenas.
Lugar donde se ensamblan los aminocidos
para formar protenas.
MORFOLOGA

MACROSCPICA
Y
MICROSCPICA
 Morfologa
Disciplina encargada del estudio de la
reproduccin y estructura de un
organismo o sistema.
Se les llama tambin Eumicetos, no producen
Flagelos (son inmviles la mayor parte de ellos.)
Los hongos microscpicos pueden ser:

Hongos Unicelulares

Hongos Filamentosos
 Hongos Unicelulares
Se llaman hongos levaduriformes o
levaduras
 Hongos Filamentosos
Se llaman mohos y cada organismo
tiene
muchas clulas.
Tanto las levaduras como los mohos
presentan clulas eucariontes, es decir,
con cromosomas mltiples, membrana
nuclear bien definida, mitocondrias,
retculo endoplsmico y pared celular.
Son microorganismos que contienen paredes
celulares rgidas hechas de glucgeno, de
celulosa, de quitina, o mananas.
La membrana celular fngica, a diferencia dela
bacteriana, presenta esteroles (esteroides con
27 a 29 tomos de carbono).
Estos microorganismos carecen de clorofila, y
son hetertrofos. Algunas levaduras algunas
especies de Candidas tienen capsula , la cual
es antifagoctica.
El conjunto celular de los mohos es
llamado micelio.

Hifa Micelio Talo

Aspecto de las colonias de Mohos:
Tipo aterciopelado
Algodonoso o polvoso
Diversas coloraciones que abarcan toda
la gama de color
Los hongos poseen hifas multinucleadas y estas
pueden tener septos o carecer de ellos; con
base a esta caracterstica, se clasifican en:

Hongos con micelio cenoctico: son los que

carecen de septos o tabicaciones

Hongos con micelio septado: son los que

presentan septos o tabicaciones entre las
clulas
 Formacin de blastoconidos Fisin Seudohifas

Hifas cenocticas Hifas tabicadas Hifas tabicadas con conexiones

en Pinza

Morfologa de la clula fngica A. Levaduras que se reproducen formando

blastoconidios B. Levaduras que se dividen por fisin C. Desarrollo de seudohifas D.
Hifas cenociticas E. Hifas tabicadas F. Hifas tabicadas con conexiones en pinza.
Tomado de Murray P. (19)
En cuanto a su funcin, las hifas y
micelios se clasifican en 2 tipos:

1. Hifa o Micelio Vegetativo: Es el que penetra

al sustrato para absorber las sustancias
nutritivas.

2. Hifa o Micelio Aereo o Reproductivo: Es el

que se proyecta sobre el sustrato y produce
las estructuras de reproduccin.
Los hongos se reproducen principalmente por
medio de esporas, que son, estructuras
especializadas para la propagacin del hongo,
y estn capacitadas para soportar condiciones
adversas del medio ambiente.
Clasificacin de las esporas fngicas
a) Artroconidios
b) Blastoconidios
c) Clamidoconidios
Asexuales D) Mitocondrias
E) Macroconidias
F) Esporangiosporas

Esporas fngicas

I. Cigosporas (zigospora)
II. Ascospora
Sexuales
III. Basidiospora
IV. Oospora
 Esporas asexuales
Son generalmente resistentes a la
sequedad o a la radiacin pero no
especialmente al calor, y no presentan un
periodo de latencia

Son capaces de germinar cuando hay

humedad y a menudo en ausencia de
nutrientes
 Esporas sexuales
Son por lo general mas al calor que las
asexuales , aunque ninguna espora de hongos
muestra la extrema resistencia al calor como
la endospora bacteriana

Las esporas sexuales presentan a menudo

latencia, germinando solo cuando han sido
activadas de alguna manera.
a) Artroconidios
b) Blastoconidios
c) Clamidoconidios
*****************
d) Microconidias
e) Macroconidias
f) Esporangiosporas
 Artroconidios
Se forman por fragmentacin de hifas,
generalmente son rectangulares con
doble pared gruesa
Anteriormente llamadas artrosporas
 Blastoconidios
Se forman en las levaduras por la gemacin a
partir de una clula preexistente.
Anteriormente llamado blastosporas
 Clamidoconidios
Se forma cuando las condiciones del medio se
tornan adversas, las clulas aumentan de
tamao y se hinchan.
Anteriormente se llamaban clamidosporas
 Las siguientes son esporas
producidas libremente, por
segmentacin de las puntas de las
hifas especializadas, llamadas
conidioforos
 Microconidias
Son esporas unicelulares que se presentan en
una variedad de tamaos, formas y colores
Son producidos por los conidioforos, mediante
el estrangulamiento sucesivo en el punto de
unin.
 Macroconidias
Son esporas multicelulares, las hay de diversas
formas
Las Macroconidias pueden dividir en dos o
mas clulas por tabiques transversales y
pueden adoptar formar de huso o de clava
 Esporangiosporas
Son esporas producidas dentro de estructuras
especializadas llamadas esporangios, que son
sacos redondos unidos al micelio vegetativo
por una estructura especial llamada
esporangiforo
 Esporas sexuales
I. Cigosporas o Zigosporas
II. Ascosporas
Diferentes tipos de
III. Basidiosporas esporas sexuales de
mohos (a) Zigospora
IV. Oosporas de un Zigomiceto (b)
Ascosporas en el
asca de un
ascomiceto
Basidiosporas en la
basidia de un
basidiomiceto
 Zigosporas

Las zigosporas se forman al combinarse dos

clulas sexuales similares entre s.
 Ascosporas
La ascospora (fruto de la reproduccin sexual)
genera un micelio, que genera a su vez un
conidio fruto de la reproduccin asexual y que
tambin genera micelio
 Basiodiosporas
Las basiodiosporas son las esporas sexuales
producidas en grandes cantidades por los
basidiomicetos
 Oosporas
Una osporo es una espora sexual de pared
celular gruesa que se desarrolla a partir de
una oosfera fertilizada en algunos protista,
algas y hongos. Es una estructura de
supervivencia que puede resistir durante
varios aos.
FACTORES DE NUTRICIN

CRECIMIENTO
 FUENTES DE ENERGIA
Los hongos son hetertrofos, es decir que
requieren de compuestos orgnicos
preformados como fuente de carbono. La
mayora de los hongos son saprofitos, slo
algunas especies son patgenas para el hombre
y los animales
Fuente de carbono: pueden ser hidratos de
carbono como glucosa, que adens acta
como fuente de energa.
Fuente de nitrgeno: pueden utilizar
compuestos inorgnicos de nitrgeno como
cloruro de amonio, sulfato de amonio, nitrato
de potasio o compuestos orgnicos simples
como urea.
 Oligoelementos:Los oligoelementos son
bioelementos presentes en pequeas cantidades
( menos de un 0,05%) en los seres vivos (Zn, Fe
Ca).
Ph ptimo de crecimiento:oscila entre 4,5 a 5,5.
este Ph confiere al medio un carcter seletivo
sobre todo cuando se quiere cultivar hongos y
stos se hallan acompaados de bacterias.
Temperatura: creen entre 37 y 38 C, algunos
desarrollan a temperatura ambiente.
 FACTORES FISICO-QUIMICOS.
Pueden afectar el crecimiento de
bacterias y homgos
TEMPERATURA:
-Psicrofilicas. -menor de 10C
-Psicrofilas. 10 20C
-Mesofilas. 21 40c
-Termofilas. Mayor a 41C

PH:
-Hongos patogenos pH de 5.5 a 5.7
 Presin osmtica. Mantienen una presin de
turgencia positiva, porque la presin osmtica de
su contenido celular es mayor que la presin
osmtica del medio ambiente La presin de
turgencia suministra la fuerza a la clula para
crecer
Presin hidrosttica. La mayora de levaduras no
pueden crecer a presiones superiores a 8 atmsferas,
una presin muy baja a diferencia de las bacteria que
crecen a menos de una atmosfera.
HUMEDAD:
-70% A 80%
ATMOSFERA:
-Anaerobios obligados. Oxigeno es letal
(clostridium, bacteroides)
-Anaerobios aerotolerantes. Pueden
permanecer en oxigeno
-Aerobias facultativas, Capaces de crecer en
anaerobiosis y aerobiosis (enterobacterias).
-Aerobias obligadas. El oxigeno es
indispensables para su crecimiento (la mayoria
de los hongos).
RESPIRACION - ANAEROBIA -
GLUCOLISIS Y FERMENTACION

2 cidos
Glucosa 2 Gliceraldehido
glicridos

Ciclo de Proceso 2 cidos

Krebs aerobio Pirvicos

2 Alcoholes 2 cidos
2 Acetaldehdos
etlicos Lcticos
 Tipos de metabolismo
Metabolismo primario y secundario.
Primario usa la clula para mantenerla
viva (reacciones anablicas y catablicas
necesarias para el mantenimiento y
crecimiento de la clula).
 Secundario rutas metablicas
alternativas de sustancias no tiles
para las clulas.

Son vas fundamentalmente anablicas.

La estructura qumica es inusual para la clula
y sin ninguna funcin celular.
Las vas son especficas por un grupo de
hongos o hongo concreto.
 Fermentacin
La fermentacin es un proceso catablico
de oxidacin incompleta,
totalmente anaerbico, siendo el producto
final un compuesto orgnico.
 En los seres vivos, la fermentacin es un
proceso anaerbico y en l no interviene
la mitocondria ni la cadena respiratoria.
Son propias de los microrganismos como
algunas bacterias y levaduras.
 Tambin se produce la fermentacin en la
mayora de las clulas de los animales;
algunas clulas, como los eritrocitos, carecen
de mitocondrias y se ven obligadas a
fermentar;
 el tejido muscular de los animales realiza
la fermentacin lctica cuando el aporte
de oxgeno a las clulas musculares no es
suficiente para el metabolismo aerobio y
la contraccin muscular.
 Tipos de fermentaciones

Fermentacin actica
es la fermentacin bacteriana por Acetobacter.
 Fermentacin alcohlica
Ausencia de aire originado por la actividad de
algunos microorganismos que procesan
los hidratos de carbono para obtener:
un alcohol en forma de etanol dixido de
carbono en forma de gas y unas molculas
de ATP que consumen los propios
microorganismos en su metabolismo celular
energtico anaerbico.
 Fermentacin butrica
Es la conversin de los glcidos en cido
butrico por accin de bacterias de la
especie Clostridium butyricum en ausencia de
oxgeno. Es caracterstica de las bacterias del
gnero Clostridium y se caracteriza por la
aparicin de olores ptridos y desagradables.
 Fermentacin lctica
Es una ruta metablica anaerbica que ocurre
en el citosol de la clula, en la cual
se oxida parcialmente la glucosa para obtener
energa y donde el producto de desecho es
el cido lctico.
 Alimentacin

Realizan una digestin externa de sus

alimentos, secretando enzimas, que
absorben luego las molculas disueltas
resultantes de la digestin.
A esta forma de alimentacin se le llama
osmotrofia, la cual es similar a la que se
da en las plantas pero, a diferencia de
aqullas, los nutrientes que toman son
orgnicos.
Los hongos son los descomponedores
primarios de la materia muerta de plantas
y de animales en muchos ecosistemas.
 Es la intoxicacin o envenenamiento causado
por la ingestin de macromicetos que
contengan o produzcan sustancias que no
pueden ser descompuestas por los procesos
digestivos y metablicos que al ser absorbidas,
provocan reacciones txicas que causan desde
un cuadro diarreico sin complicaciones hasta
la muerte por destruccin heptica y/o renal.
Micetismo Periodo de Caractersticas
incubacin
Floidiano 8 a 12 h hasta FASE Pirosis, gastralgias, vmitos, clicos,
24 h COLERIFORME: diarrea abundante y ftida
Cefaleas, vrtigos y calambres. Agitacin,
convulsiones y colapso
circulatorio.
FASE Hepatomegalia, ictericia, necrosis
HEPATORRENAL hemorrgica de los hepatocitos,
dolor en hipocondrio derecho,
albuminuria, hematuria y anuria.
Muerte entre 40 y 48 h despus de la
ingestin del hongo.
FASE Trastornos de la conciencia, desde
NEUROLGICA: confusin hasta coma profundo.
Trastornos del comportamiento, euforia
paradjica y agitacin.
Signo de Babinsky, arreflexia total, parlisis
a diferentes niveles.
Micetismo Periodo de Caractersticas
incubacin

Parafaloidian 12 h hasta Sequedad de mucosa oral, signos de nefritis, azoemia y

17 das albuminuria. Hematomas, cefalea,
somnolencia, espasmos musculares y convulsiones. Coma
urmico. Muerte solamente en el
15% de los casos.
Muscarnico 2a3h SNDROME SUDORIANO
SNDROME PANTERINIANO
Gastrointestinal 30 min a 6 Nuseas, vmitos, diarreas, dolor abdominal intenso.
h
Inconstante o Muy SNDROME GIROMITRIANO
condicionad variable SNDROME COPRINIANO
Cerebra 1a4 Hipotensin, taquicardia e hipertermia. Cfalea, mialgias y
sntomas psicotrpicos:
cambios en la percepcin, translacin de estmulos sensoriales
,cambios en la comprensin, alucinaciones y prdida de la
relacin espacio-tiempo.Pueden presentarse alteraciones en
la transmisin de los impulsos cardacos, arritmias e
infarto al miocardio. Depresin y angustia a la salida del
trance.
Los efectos incluyen enfermedades y
problemas de salud, depresin del
sistema inmunolgico, irritacin, alergias
y en algunos casos, la muerte.
Las mico toxinas causan efectos mediante
su ingestin, contacto con la piel o
inhalacin. Pueden inhibir la sntesis de
protenas, daar el sistema inmunitario, Aspergillus
los pulmones e incrementar la
sensibilidad a las toxinas bacterianas

Ejemplo de Micotoxicosis: ergotismo

gangrenoso. causado
fundamentalmente por Claviceps
purpurea que contamina el centeno
 ALGUNOS HONGOS TOXICOS PRODUCEN
MICOTOXINAS (EXOTOCINAS EXCRETADAS POR
HONGOS).

CRECEN EN GRANOS CON CIERTA HUMEDAD

PROVOCANDO MICOTOXICOSIS:
AFLATOXINAS: DAO EPATICO
FUSARINAS: EFECTOS NEUROLOGICOS Y
ABORTIVOS.
 Reproduccin de los hongos:

La gran mayora de los hongos producen esporas como

medio para asegurar la dispersin de la especie y su
supervivencia en condiciones ambientales extremas. As,
la espora es la unidad reproductiva del hongo y contiene
toda la informacin gentica necesaria para el desarrollo
de un nuevo individuo.
Existen dos tipos de esporas:

Las asexuales, que suelen ser resistentes a la sequedad

y a la radiacin, pero no al calor, por lo cual no tienen
perodo de latencia. Pueden germinar cuando hay
humedad, incluso en ausencia de nutrientes.

Las sexuales, ms resistentes al calor que las asexuales,

aunque no tanto como las endosporas bacterianas;
suelen presentar latencia, germinando slo cuando son
activadas (por ejemplo por calor suave o alguna
sustancia qumica)..
En los hongos hay dos formas de reproduccin: sexual y
asexual, aunque en algunas especies coexisten ambas
formas en el mismo organismo (holomorfo),
denominndose estado perfecto o teleomorfo a la
forma sexual y estado imperfecto o anamorfo a la
asexual.

De esta forma, los hongos que presentan reproduccin

sexual se denominan hongos perfectos y los que slo
tienen (o slo se les conoce) reproduccin asexual se
denominan hongos imperfectos
Reproduccin asexual:

Los elementos de propagacin asexual (esporas asexuales)

pueden generarse de forma interna, redondendose la
clula del interior de la hifa y quedando rodeada por una
gruesa pared para luego desprenderse (clamidiosporas) o
bien formndose en el interior de una estructura
denominada esporangio que al madurar se rompe
liberando las esporas (esporangiosporas).
Tambin pueden generarse de forma externa, como una
produccin de la hifa en vez de como una
transformacin (conidiosporas) y suelen formarse en
estructuras diferenciadas de la hifa (conidiforos). La
variedad de las estructuras productoras de conidios es
inmensa y se utilizan como caracterstica fundamental
en la clasificacin.
Reproduccin sexual:

En la formacin de esporas sexuales intervienen una gran

variedad de estructuras y la reproduccin sexual difiere
notablemente entre los diversos grupos de hongos. As,
en los Zygomycetes es por medio de unas hifas
especializadas llamadas gametangios, en los Ascomycetes
se producen a travs de unas clulas con aspecto de saco
denominadas saco, en los Basidiomycetes intervienen
clulas especializadas denominadas basidios, etc.
En lneas generales dos ncleos haploides de dos
clulas (gametos) se unen formando un huevo (cigoto)
diploide que por meiosis da lugar a cuatro ncleos
haploides. En este proceso suele haber recombinacin
gentica (existe un intercambio de genes).
Si los hongos poseen en el mismo micelio ncleos
complementarios capaces de conjugarse se llaman
hongos homotlicos y si necesitan ncleos
procedentes de micelios diferentes se llaman hongos
heterotlicos.
Hongos Dimrficos

Algunos hongos y especialmente, las especies patgenas,

muestran dimorfismo, es decir, dos formas de
crecimiento. Estos hongos pueden crecer como moho o
como levadura. A menudo, este dimorfismo depende de
la temperatura de incubacin: a 37C el hongo es
levaduriforme mientras que a 25C es filamentoso.
.
 Es posible reconocer el genero y especie
de un hongo con reconocer sus formas
de reproduccin; el reconocimiento y
estudio de este, se puede hacer de 3
formas:

A partir de la Cultivos en Microcultivo

fuente laboratorio
Medios De Cultivo

Para el aislamiento primario de los hongos, se utilizan diversos

medios de cultivo. Estos medios hay que seleccionarlos en funcin
del hongo que se sospeche y del tipo de muestra.
Los medios de cultivo se pueden utilizar en tubos cerrados con
tapn de rosca o en placas de petri. La gran superficie de estas
ltimas facilita el aislamiento y la dilucin de sustancias
inhibitorias en las muestras. Es importante que el medio no se
deseque por lo que el espesor de las mismas debe ser por lo
menos de 25 mm, aproximadamente 35-40 mL de medio. Las
placas se contaminan con facilidad durante la incubacin por lo
que es aconsejable sellarlas con cinta adhesiva. Los medios en
tubo tienen la ventaja de que no se deshidratan y se
contaminan menos, pero en cambio tienen menos superficie.
La temperatura de incubacin debe ser seleccionada teniendo
en cuenta el tipo de hongo, en general, los medios deben
incubarse a 25C y a 37C durante 4 semanas antes de
considerarse como negativos. Si se emplean tubos con tapn
de rosca deben estar flojos para permitir la entrada de aire.

Medios ms utilizados

Agar Dextrosado de Saboureaud con Cicloheximida y

Cloranfenicol: se utiliza para el aislamiento e identificacin
de dermatfitos y Cndidas.

Agar Dextrosado con Cloranfenicol sin Cicloheximida: se

utiliza para el aislamiento e identificacin de patgenos
ambientales y oportunitas.
Agar de harina de maz (Corn Meal Agar):
Suplementado con Tween 80: para diferenciar distintas
especies de Cndida y para realizar subcultivos ya que
estimula la esporulacin de hongos miceliales.
Suplementado con 10 gramos de Glucosa: para
diferenciar Trichophyton

Agar de Urea: se utiliza para diferenciar entre levaduras e

identificar diferentes especies de Trichophyton.
Procesamiento

El procesamiento debe ser inmediato. Muchas muestras se

pueden sembrar inmediatamente tras su recogida.
Se debe sembrar la muestra en su totalidad. En caso de
aspirado de abscesos, mdula sea, lquido cefalorraqudeo,
etc, el volumen deber ser de al menos 2 mL.
En el caso de que la muestra proceda de exudados vaginales:
agitar la torunda en 0,5 mL de agua y sembrar, o bien sembrar
con la torunda directamente.
En el caso de lquidos corporales se debern tomar ms de
2 mL y si en los lquidos hay cogulos o material
membranoso, ser necesario fragmentarlos con el bistur y
luego realizar la siembra.

Cuando la muestra son pelos y raspados: depositar

directamente en el medio, presionando para que queden
adheridos. En caso de uas se pueden pulverizar o cortar en
fragmentos.

Por ltimo, cuando se trata de cepillados bronquiales, hay

que mezclar con agua destilada y sembrar el volumen total
(ms de 1 mL).
Siembra con concentracin

Se realizan siempre que la muestra es lquida y se hace por

centrifugacin a 1500-2000 r.p.m. durante 10 minutos. El
sedimento se utiliza para un examen directo o bien para
cultivo.
En lquidos corporales: el volumen tiene que ser mayor de 2
mL. Se fragmenta y se centrfuga. Si las muestras son muy
densas, hay que diluirlas con agua destilada y centrifugar.
En orina: volumen superior a 2 mL
En LCR: centrifugar el LCR durante 10 minutos a 1500-2000
r.p.m. Retirar el sobrenadante con una pipeta estril y
resuspender el sedimento con el lquido que ha quedado.
Sembrar.
Cultivo O Microcultivo

No se alteran las estructuras fngicas. Se utiliza un

medio Saboraud que se vierte sobre una placa de
petri (capa delgada). Una vez solidificado cortamos
cuadrados con un bistur estril de 1-3 cm y los
colocamos en un porta estril o flameado. El porta
estar colocado en una placa de petri estril, sobre
un soporte. En el fondo de la placa aadiremos unas
gotas de agua para evitar la desecacin durante la
incubacin.
Inoculamos o bien las esquinas, o bien los bordes del agar
con el hongo a estudiar. Tomamos la muestra con un asa
estril humedecida con agua. Sellamos las placas con
parafilm y llevamos a incubar.

Tcnica Para Confirmar El Dimorfismo

Consiste en incubar la misma muestra a 25C, temperatura

a la que crecen los hongos miceliales, y a 37C temperatura
a la que crecen las levaduras (tejidos o medios especiales).
Las especies ms importantes dimrficas son: Histoplasma
capsulatum, Blastomyces dermatidis, Paracoccidioides
brasiliensis, Coccidiodes imitis. Penicillium marneffei,
Slorothrix schenckii.

Para la confirmacin es necesario convertir la fase filamentosa

en levaduriforme. Para ello incubamos parte de la colonia
micelial en una placa de Agar Sangre (3-4 fragmentos).
Sellamos e incubamos a 37C. Examinamos peridicamente el
crecimiento buscando levaduras. Si crece colonia micelial
repetimos la siembra hasta conseguir fase levaduriforme.
Dentificacin De Levaduras

Test De Filamentacin
Preparamos una suspensin de levaduras en 0.5-1 mL de
suero de conejo e incubamos a 35-37C no ms de 3 horas.
Transcurrido el tiempo observamos al microscopio la
presencia o ausencia de tubos germinales, es decir, de
filamentos que no constrien su punto de origen en la
levadura.
El test ser POSITIVO si se observan los tubos germinales (C.
albicans)

El test ser NEGATIVO cuando no encontremos los tubos

germinales ((otras especies de Cndida).
Medio diferenciador para levaduras

Posee cromgenos que colorean las colonias segn la

especie. En el caso de la Cndida albicans, las colonias son
de color azul.