Neuropeptides activate human mast

cell degranulation and chemokine

production
Marianna Kulka,1 Cecilia H. Sheen,2 Brian P. Tancowny,2 Leslie C.
Grammer2 and Robert P.
Schleimer2
1National Research Council Canada, Room 432, 550 University
Avenue, Charlottetown, PE, Canada and 2Allergy-Immunology
Division, North-western University Feinberg School of Medicine,
Chicago, IL, USA
 Introduccin

Los mastocitos son clulas efectoras en las reacciones alrgicas y

anafilcticas.

En el algunos casos, los Mastocitos se activan cuando la IgE se une al

receptor de Fc epsilon I (Fc RI) que se encuentra en la superficie celular, lo
que provoca degranulacin y sntesis de novo de metabolitos como cido
araquidonico , citocinas y quimiocinas, lo que interacciona con clulas
cercanas e inicia la respuesta alergica

Sin embargo, los Mastocitos pueden responder a estmulos que son

independientes de Fc RI, tales como neuropeptidos.
 En ste estudio se ha caracterizado la respuesta de los
mastocitos humanos a Sustancia P (SP), Factor de crecimiento
Nervioso (NGF), Pptido relacionado a el Gen Calcitonina
(CGRP) y Polipptido regional Vaso activo (VIP)

Pues los Mastocitos se encuentran principalmente en los

espacios musculares y a menudo con neuronas cercanas , lo
cual por stres agudo puede estar en contacto con los
neuropeptidos mencionados.
 Materiales y Mtodos

Crecimiento de
los Mastocitos
Humanos

Ensayo de
Ensayo de la
citocinas y
Degranulacin
quimiocinas

Anlisis de
citometra de RT- PCR
flujo
 Resultados
Los mastocitos humanos degranulan en respuesta a la sustancia P y Vip,
pero no a NGF o CGRP
Neuroppticos que activan la degranulacin en clulas LAD2
Para determinar si la capacidad de respuesta a neuropptido es similar en las clulas
humanas humanas primarias (HUMC) se cultivaron clulas cebadas humanas desde sangre
periferica CD34 por 8 semanas en presencia de SCF e IL-6 y se midi la degranulacin en a
respuesta a los mismos estmulos
VIP activa un perfil similar de degranulacin a complex 48/80 por
que ambos estmulos producen afecto a los 5 min.
La activacin por neuropptidos es sensible a los inhibidores de
protenas G y 3 fosfoinositol-quinasa (PI3)
 Para caracterizar adicionalmente los efectos de SP, estimulamos LAD2 con ocho
construcciones de pptidos SP falta aminocidos del C-terminal

Neuropeptides activate human mast cells

Table 2. Amino acid sequences of substance P

and analogues Substance P (SP) Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2
SP-Arg (spantide I) D-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-D-Trp-Phe-D-Trp-Leu-Leu-NH2
SP-P-T (411) D-Pro-Gln-Gln-D-Trp-Phe-D-Trp-Leu-Met-NH2
SP(211) Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2
SP(311) Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2
SP(411) Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH 2
SP(511) Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2
SP(611) Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2
SP(711) Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH 2
SP(811) Phe-Gly-Leu-Met-NH2
SP(911) Gly-Leu-Met-NH2

IP-10 RANTES
(a)
30 60 MCP-1 IL-8 07
*

MCP-1 (ng/ml)
25 50 MIG ** 06
20 * * 05
* 40
pg/ml

pg/ml
15 30 04
* 03
10 20 02
5 10 01
0 0 0
0 01 1 10 0 00003 0003 003 03
Anti-IgE (g/ml) VIP (M)

-1 (ng/mL)
-1 (ng/ml)

600 10 3000 10
500 * 8 2500 * * 8
400 2000
pg/ml
pg/ml

* 6 6
300 1500 4
200 4 1000
* *
 600
500
400

pg/ml
Produccin de quimioquinas y de TNF inducida por los agonistas 300
200
100
0

(b)
60
50
40

pg/ml
30
20
10
Figure 5. Neuropeptides activate LAD2 cells
0
to produce chemokines. (a) LAD2 cells were
stimulated with IgE/anti-IgE (see legend,
Fig. 4), substance P, VIP, or compound 48/80
300
for 24 hr and IP-10, MCP-1, MIG, RANTES 250
and IL-8 production was measured in cell-free 200

pg/ml
supernatants (n 3, P < 0 01). (b) HuMC 150
were stimulated as above and IP-10, MCP-1, 100
50
MIG, RANTES and IL-8 production was mea-
0
sured in cell free supernatants (n 3,
P < 0 01).

Chemokine and TNF production induced by a

Although some reports have shown that human s
cells produce TNF in response to SP,5 it is
whether human mast cells produce chemokines
cytokines in response to neuropeptides, pa
chemokines involved in the recruitment of ina
Medicin de la produccin de las citoquinas IL-2, IL-3, IL-4, IL-6,
IL-10, TNF, GM-CSF y IFN-
Expresin del receptor por las clulas cebadas humanas
Efecto de la estimulacin de la expresin del receptor del neuropptido de
mastocitos humana
 Conclusin
stos estudios muestran que la activacin de
los mastocitos por neuropptidos no slo
activa la degranulacin y liberacin de
mediadores, sino que tambin puede inducir
produccin de citosinas y quimosinas como
GM-CSF, IL-3, MCP-1,IP-10, RANTES e IL-8, los
cuales pueden reclutar LT, Eosinofilos y otras
clulas de inflamatorias.