Fed-batch culture

Didefinisikan sebagai sistem batch culture dimana nutrisi (fed)

diberikan secara kontinyu bersama medium, Tanpa penghilangan
fluida kultur
fed-batch culture awalnya dibentuk dalam mode batch dan
kemudian diberi fed sesuai dengan salah satu strategi umpan
berikut:
1. Media yang sama yang digunakan untuk membangun kultur batch
ditambahkan, menghasilkan peningkatan volume.
2. Larutan substrat pembatas pada konsentrasi yang sama seperti
pada media awal ditambahkan, menghasilkan peningkatan volume.
3. Larutan terkonsentrasi dari substrat pembatas ditambahkan pada
laju kurang dari pada (1) dan (2), menghasilkan peningkatan
volume.
4. Larutan yang sangat terkonsentrasi dari substrat pembatas
ditambahkan pada laju kurang dari (1), (2) dan (3), menghasilkan
peningkatan volume yang tidak signifikan.
 Sistem Fed-batch menggunakan strategi (1) dan (2) digambarkan
sebagai volume variabel,
sedangkan sistem yang menggunakan strategi (4) digambarkan
sebagai volume tetap.
Penggunaan strategi (3) memberi kultur antara dua variabel ekstrem
dan volume tetap.
Kinetika dari dua tipe dasar kultur batch, volume variabel dan volume
tetap, sekarang akan dijelaskan.
Variable Volume fed-batch culture
Pertumbuhan batch culture dibatasi oleh konsentrasi satu substrat;
biomassa pada setiap titik waktu akan dijelaskan oleh persamaan:
xt= x0+Y (SR-s)
Dimana xt= konsentrasi biomassa setelah waktu, t jam
x0 = konsentrasi inokulum.
Konsentrasi biomassa terakhir dihasilkan bila s = 0 dapat digambarkan
sebagai xmax dan, jika Xo kecil dibandingkan dengan xmax:
 Jika, pada saat x = xmax 'umpan medium dimulai sedemikian rupa
sehingga tingkat pengencerannya kurang dari max, hampir semua
substrat akan dikonsumsi secepat memasuki culture, jadi:

masukan substrat sama dengan konsumsi substrat oleh sel

Jadi, (ds/dt) = 0
Meskipun total biomassa dalam kultur (X) meningkat seiring
waktu, konsentrasi sel (x) tetap konstan
Situasi ini disebut quasi steady state
 Seiring berjalannya waktu, tingkat pengenceran akan menurun saat
volume meningkat dan D menggunakan persamaan :

dimana V0 = volume aslinya

 Pirt (1979) telah menyatakan perubahan konsentrasi produk dalam
kultur batch-batch variabel dengan cara yang sama seperti untuk
kultur kontinu
Dengan pertumbuhan yang ketat maka akan
berubah seiring perubahan Jh dengan D dan,
dengan demikian, konsentrasi produk akan
tetap konstan. Namun, jika qp konstan dan
independen dari Jh, maka konsentrasi produk
akan menurun pada awal siklus ketika Dp lebih
besar dari qp x akan meningkat seiring waktu
karena D menurun dan qpx menjadi lebih besar
dari Dp. Hubungan ini ditunjukkan pada
gambar 2.14a. Jika qp berhubungan dengan Jh
secara kompleks, konsentrasi produk akan
bervariasi sesuai dengan hubungan tersebut.
Dengan demikian, strategi pakan dari sistem
umpan balik akan dioptimalkan sesuai dengan
hubungan antara qp dan Jh
Cyclic fed-batch culture
Kehidupan fermentasi variable volume fed-batch dapat diperpanjang
melebihi waktu yang dibutuhkan untuk mengisi fermentor dengan
menarik sebagian dari budaya dan menggunakan budaya sisa sebagai
titik awal untuk proses fed-batch selanjutnya. Penurunan volume
menyebabkan kenaikan tingkat pengenceran yang signifikan (dengan
asumsi laju alir tetap konstan) dan dengan demikian, pada akhirnya,
dalam peningkatan laju pertumbuhan spesifik. Kenaikan JL kemudian
diikuti oleh penurunan bertahap karena kondisi mapan kuasi kembali
terbentuk. Siklus semacam itu dapat diulang beberapa kali sehingga
menghasilkan serangkaian fermentasi umpan balik. Dengan demikian,
organisme akan mengalami pergeseran periodik dalam tingkat
pertumbuhan diikuti oleh pergeseran bertahap.
 Periodisitas dalam tingkat pertumbuhan ini dapat dicapai dalam
sistem batch-batch volume tetap dengan mengencerkan kultur ketika
biomassa mencapai konsentrasi yang tidak dapat dipertahankan
dalam kondisi aerobik. Pengenceran menghasilkan penurunan x dan,
oleh karena itu, sesuai dengan persamaan (2.35) peningkatan JL.
Selanjutnya, saat menyusui berlanjut, tingkat pertumbuhan akan
menurun secara bertahap seiring dengan meningkatnya biomassa dan
mendekati jumlah maksimum yang berkelanjutan di kapal sekali lagi,
pada saat mana kultur dapat diencerkan lagi. Pengenceran akan
dicapai dengan menarik kultur dan mengisi kembali ke tingkat aslinya
dengan air steril atau medium yang tidak mengandung substrat
umpan.
Aplication of fed-batch culture
Penggunaan kultur umpan-batch oleh industri fermentasi mengambil
keuntungan dari fakta bahwa konsentrasi substrat pembatas dapat
dipertahankan pada tingkat yang sangat rendah, sehingga menghindari
efek represif dari konsentrasi substrat tinggi Selanjutnya, sistem fedbatch
juga memberi sedikit kontrol terhadap tingkat pertumbuhan organisme,
yang juga terkait dengan tingkat penyerapan oksigen spesifik yang
memberikan beberapa kontrol atas permintaan oksigen fermentasi (lihat
Bab 9). Kedua variabel dan sistem volume tetap menghasilkan konsentrasi
substrat yang membatasi rendah, namun keadaan steady kuasi dari sistem
volume variabel memiliki keuntungan untuk mempertahankan konsentrasi
biomassa dan nutrisi yang tidak membatasi konstan. Pirt (1979) mengutip
ini sebagai fitur penting karena konsentrasi substrat selain yang membatasi
pertumbuhan dapat memiliki pengaruh yang signifikan terhadap komposisi
biomassa dan pembentukan produk
 . Keuntungan nyata dari kultur umpan batch siklik adalah fase produktif
suatu proses dapat diperpanjang dalam kondisi terkendali. Namun,
keuntungan lebih lanjut terletak pada pergeseran periodik yang
dikendalikan dalam tingkat pertumbuhan yang dapat memberi kesempatan
untuk mengoptimalkan sintesis produk. Dunn dan Mor (1975)
menunjukkan bahwa perubahan tingkat proses kimia dapat menyebabkan
kenaikan konsentrasi menengah dan efek yang serupa dapat terjadi pada
sistem mikroba. Pengamatan ini sangat relevan dengan produksi metabolit
sekunder yang maksimal dalam kultur batch selama fase perlambatan.
Bushell (1989) mengemukakan bahwa kondisi optimum untuk sintesis
metabolit sekunder dapat terjadi selama fase transisi setelah penarikan
volume kaldu dari kapal dan sebelum pembentukan kembali keadaan
mapan setelah dimulainya kembali pakan nutrisi.
 Selama periode ini tingkat pengenceran akan lebih besar daripada tingkat
pertumbuhan, namun menurut Bushell, laju serapan substrat pembatas
pertumbuhan harus segera merespons konsentrasi substrat yang meningkat.
Dengan demikian, ketidakseimbangan hasil antara tingkat pengambilan substrat
dan tingkat pertumbuhan spesifik - ketidakseimbangan ini kemudian
berkontribusi terhadap pengalihan zat antara menjadi metabolisme sekunder.
Keuntungan dari kultur umpan batch siklik harus dipertimbangkan terhadap
kesulitan yang melekat pada sistem. Perhatian harus dilakukan dalam desain
proses batch-siklik siklik untuk memastikan bahwa racun tidak berakumulasi pada
tingkat hambat dan bahwa nutrisi selain yang dimasukkan ke dalam media umpan
menjadi membatasi (Queener dan Swartz, 1979). Juga, rangkaian siklus batch
batch yang berkepanjangan dapat menyebabkan akumulasi varian yang tidak
memproduksi atau menghasilkan rendah. Sistem batch-batch awal yang
dikembangkan tidak memasukkan bentuk kontrol feedbaek dan bergantung pada
keadaan mapan kuasi yang melekat untuk menjaga stabilitas proses. Namun,
penggunaan terkonsentrasi
Example of the use of fed-batch culture
Fermentasi ragi roti
Produksi protein rekombinan, contohnya produksi hepatitis B surface
antigen (HBsAg)
Produksi penisilin, yang merupakan salah satu contoh penggunaan feed
system untuk memproduksi metabolit sekunder
Mencegah fermentasi enzim yang dengan cepat menghabiskan sumber
karbon, karena enzim bersifat represi katabolit, contohnya Produksi lipase
dari Pseudomonas fluorescens menggunakan CO2 sebagai kontrol pada
penambahan oil feed
Ph feedback fed-batch system untuk produksi thiostrepton dari
Streptomyces laurentii