ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL

EAP de Ingeniera Qumica UNJBG

MSc. Luz Mendoza Rodas

Ing. Qumico
 ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL

Introduccin

Componentes de un instrumento de medida para el

anlisis.

Clasificacin de las tcnicas analticas.

Eleccin de un mtodo analtico.

Medida de la propiedad observable: curvas de

calibrado, adicin estndar, patrn interno.

Validacin
 INTRODUCCIN
Los mtodos que utiliza la Qumica Analtica para la
caracterizacin de la materia suelen clasificarse en :
QUMICOS E INSTRUMENTALES.
Los mtodos qumicos estn basados en INTERACCIONES
MATERIA MATERIA, esto es, en reacciones qumicas: El analto
se determina por medidas gravimtricas o volumtricas

Los mtodos instrumentales, basados en INTERACCIONES

MATERIA ENERGA, utilizan un instrumento ms o menos
complejo para evaluar una propiedad fsica o fsico-qumica del
sistema objeto de anlisis.

Un mtodo analtico se considera fsico cuando no incluye

reaccin qumica alguna y la operacin de medida no modifica
la composicin qumica del sistema
 CLASIFICACIN MTODOS DE ANLISIS

CUALITATIVOS los que de la medida de una propiedad

se puede indicar la presencia de un analito en una
matriz.

CUANTITATIVOS la magnitud de la propiedad medida

es proporcional a la concentracin del analito en la
matriz
Frecuentemente, el mismo mtodo instrumental es
usado para el anlisis cualitativo y cuantitativo
CLASIFICACIN MTODOS DE ANLISIS
ESQUEMA GENERAL DE TCNICA INSTRUMENTAL
METODOS INSTRUMENTALES
 ELECCIN MTODO ANALTICO
Un primer paso que debe preceder al mtodo analtico,
es una definicin clara del problema analtico
El mtodo de trabajo seleccionado dependa de la
respuesta a las siguientes cuestiones:

Intervalo de concentracin de trabajo

Qu grado de exactitud se requiere
Que otros componentes hay en la muestra
Que propiedades fsico-qumicas tiene la muestra
Cuantas muestras se analizan
CLASIFICACIN: TAMAO DE MUESTRA
MEDIDA PROPIEDAD OBSERVABLE

Cmo realizar una buena medida?

Es reproducible? : Precisin

Cmo conseguir el valor verdadero? : Exactitud

Cual es la cantidad ms pequea que

puede ser medida? Sensibilidad

En que rango de cantidad? - Rango

Dinmico o lineal

Existen interferencias?- Selectividad

 PARAMETROS CARACTERISTICOS
Limites de deteccin y cuantificacin
El limite de deteccin de un analito se define como:
aquella [ ] que proporciona una seal instrumental
significativamente diferente de la seal de una muestra en
blanco, o la seal de fondo

La sensibilidad de un instrumento o mtodo se define como,

su capacidad para discriminar entre pequeas diferencias en la [
] de un analito.
La sensibilidad viene limitada por la pendiente de la curva de
calibracin y la reproducibilidad o precisin del sistema de
medida,
Para dos mtodos que tengan igual precisin, el que presente
mayor pendiente en la curva de calibracin ser el ms sensible
 La selectividad de un mtodo analtico indica el grado
de ausencia de interferencias, debidas a otras especies
contenidas en la matriz de la muestra

Eliminacin de Interferencias.
Quimicamente: Usando agentes enmascarantes ( sustancia
que reacciona con el interferente para formar una especie que no
produce la misma seal del analito). Se consigue mediante un
ajuste de pH , un cambio en el estado de oxidacin, formacin de
complejos,
Fisicamente: Separndolas previamente a la determinacin.
mediante precipitacin, extraccin, cromatografas o destilacin,
volatilizacin.
 Medida Analtica
Los mtodos qumicos cuantitativos tienen carcter
absoluto.
La propiedad medida es funcin directa de la concentracin o de
la cantidad,
P = kC
P representa la magnitud de la propiedad medida,
C es la concentracin,
k es nica, tiene un valor perfectamente definido, deducible
de las leyes estequiomtricas

Los mtodos instrumentales tienen carcter relativo

P=KC.
La constante de proporcionalidad no es nica, al depender de las
condiciones experimentales.
 ERRORES

La medida siempre debe estar guiada por los

principios de exactitud y precisin

Se debe realizar, cualquier experimento o medida, de

acuerdo con las directrices que marca la estadstica.

En los anlisis cuantitativos, los errores que

aparezcan en ellos son de gran importancia.

No existen resultados cuantitativos vlidos, si no van

acompaados de una estimacin de los errores
inherentes a ellos
 TIPOS DE ERRORES
Errores Accidentales
Perdida de parte de muestra, contaminacin, o avera
de instrumento .Esto lleva a comenzar de nuevo

Errores Sistemticos o Determinados

Aquellos que pueden determinarse y probablemente
evitarse o corregirse

Errores aleatorios o indeterminados

Errores fortuitos cuya magnitud y signo no pueden
predecirse ni calcularse
CALIBRACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL
Segn la ISO (International Estndar Office), la calibracin se
define como el conjunto de operaciones que permiten
establecer, en determinadas condiciones experimentales, la
relacin existente entre los valores indicados por el aparato,
con los valores obtenidos en la medida de un valor conocido.
El procedimiento operatorio en anlisis instrumental para la
calibracin es :
Se prepara una serie de muestras (9 10) con [ ] conocidas de
analito.
Se miden en el instrumento en iguales condiciones
seguidamente se medir las muestras problema.
A partir de la seal obtenida para cada patrn de [ ]
conocida, se construye la grfica de calibracin.
A partir de ella se obtiene la [ ] de analito en las muestras
problema por interpolacin.
preguntas estadsticas
Es lineal la grfica de calibracin?

Cul es la mejor recta que pasa por esos puntos?

Suponiendo que la calibracin es lineal, cules son los

errores estimados y los limites de confianza para la
pendiente y la ordenada en el origen?

Cundo la grfica se usa para el anlisis de una muestra

problema, cules son los errores y los limites de
confianza para una [ ] determinada?

Cul es l limite de deteccin del mtodo, es decir, la

menor [ ] de analito que se puede detectar con un nivel
de confianza predeterminado?
METODOS FISICO QUIMICOS O INSTRUMENTALES

Se basan en la medida de una propiedad analtica

relacionada con la masa o la concentracin de la
especie a analizar, se clasifican en:
 METODOS ESPECTROSCPICOS
Dan lugar a la obtencin de un espectro caracterstico de los constituyentes de la muestra
que se produce como resultado de la excitacin de los tomos o molculas con energa
trmica, radiacin electromagntica o choques con partculas (electrones, iones o
neutrones)

FUENTES DE Energa Energa Choques con

EXCITACIN Trmica Electromagntica partculas

Campos
magnticos

MUESTRA A ANALIZAR

MEDIDA DE FOTONES ELECTRONES IONES

Espectrometra Espectrometra Espectrometra

ptica de electrones de masas
 METODOS PTICOS
Mtodos que miden la radiacin electromagntica que emana de la
materia o que interacciona con ella

ESPECTROSCPICOS
Se basan en la medida de la intensidad de los fotones (electrones e
iones) en funcin de la longitud de onda de la energa radiante (espectros)
debida a transiciones entre los estados de energa caracterstica de los
componentes de la muestra
Pueden ser de tres tipos :
De Absorcin : La muestra se somete a una radiacin y se
determina la fraccin de radiacin absorbida
De Emisin: La muestra se expone a una fuente que hace aumentar
su contenido energtico en el estado de alta energa (excitado) y parte
de la energa en exceso se pierde en forma de radiacin
De Dispersin (Scattering) : Se mide la fraccin transmitida en
todas las direcciones a partir de la trayectoria inicial
 NO ESPECTROSCPICOS

Se basan en interaccin entre la radiacin

electromagntica y la materia cuando la radiacin
es considerada nicamente como una onda
 MTODOS ESPECTROSCPICOS
BASADOS EN LA MEDIDA DE LA RADIACIN ELECTROMAGNTICA

INTERVALO
TIPOS DE HABITUAL DE TIPO DE TRANSICIN
ESPECTROSCOPIA LONGITUDES DE CUNTICA
ONDA
Emisin de rayos
0.005 1.4 Nuclear
gamma
Absorcin y emisin de
0.1 100 Electrones internos
rayos X
Absorcin UV de vaco 10 180 nm Electrones de valencia
Absorcin y emisin Electrones de valencia
180 780 nm
ultravioleta-visible
Absorcin infrarroja
0.78- 300 m Vibracin de molculas
Dispersin Raman
Absorcin de
0.75 3.75 mm Rotacin de molculas
microondas
Resonancia de espn Espn de los electrones en
3 cm
electrnico un campo magntico
Resonancia magntica Espn de los ncleos en un
0.6 10 m
nuclear campo magntico
METODOS PTICOS
 OTROS METODOS
TRMICOS
El grupo de tcnicas en las que se mide una propiedad fsica de una
sustancia y/o de sus productos de reaccin mientras se somete a un programa
de temperaturas controlado.
Se basan en la medida de la relacin dinmica entre la temperatura y alguna
otra propiedad de un sistema como la masa, calor de reaccin, volumen. ect..
TECNICA FUNDAMENTO APLICACIONES

ANLISIS TERMO- El calentamiento provoca Anlisis cuantitativo.

cambios qumicos con variacin Estabilidad trmica.
GRAVIMETRICO de la masa Estudios de corrosin

Diferencia de temperatura Identificacin de

ANLISIS entre muestra y material polmeros.
TRMICO trmicamente inerte, al someter a Puntos de fusin,
DIFERENCIAL un programa de temperatura ebullicin y
controlado descomposicin

Diferencia de la cantidad de Anlisis de pureza

CALORIMETRA calor entre una sustancia y una de (Drogas).
DE BARRIDO referencia en funcin de la Cintica de reacciones.
temperatura, cuando se someten Puntos de fusin.
DIFERENCIAL a un programa de temperatura Envejecimiento de
controlado polmeros
 OTROS METODOS

CINETICOS
Basados en la velocidad con que transcurre una reaccin qumica.
Se basan en una medida relativa , por lo que solo es necesario medir el
cambio en funcin del tiempo.

TECNICA FUNDAMENTO APLICACIONES

Modificacin de la velocidad de Determinacin de trazas y
reaccin en presencia de trazas de ultratrazas.
MTODOS un catalizador. Anlisis enzimtico:
CATALTICOS El analito puede ser un determinacin de compuestos
catalizador, un activador o un bioqumicos.
inhibidor Determinacin de enzimas

MTODOS Determinacin de
Se basan en la relacin entre la
compuestos orgnicos
NO velocidad de reaccin y las
Determinacin de
CATALTICOS concentraciones de los reactivos
compuestos inorgnicos
 METODOS DE SEPARACIN Y/O PRECONCENTRACIN
Los mtodos de anlisis no son lo suficientemente selectivos en su aplicacin
directa a muestras reales, de modo que es necesario realizar etapas previas con el
fin de separar la especie a analizar del resto de los componentes.

SOLIDO/FS QUMICAS
SOLIDO/LIQUIDO FISICAS
SOLIDO /GAS MECANICAS
LIQUIDO/LIQUIDO
LIQUIDO/GAS

SEGN LAS
SEGN LA
FUERZAS
INTERFASE
CLASIFICACIONES DE PUESTAS EN JUEGO
LAS TCNICAS
ANALITICAS DE
SEPARACION SEGN
SEGN EL CONTROL DE
EL MODO PROCESOS
DE OPERACIN
CROMATOGRAFICAS

DISCONTINUAS CONTINUAS TERMODINAMICO

CINTICO
NO CROMATOGRAFICAS AMBOS
METODOS DE SEPARACIN Y/O PRECONCENTRACIN
Los mtodos continuos de separacin se dividen en dos
grandes bloques:

los cromatogrficos y los no cromatogrficos

TECNICAS CROMATOGRFICAS

La cromatografa se define como la separacin de una

mezcla de solutos basndose en la velocidad de
desplazamiento diferencial de los mismos que se establece a
ser arrastrados por una fase mvil a travs de un lecho
cromatogrfico que contiene una fase estacionaria.

En la tabla se recogen las fechas de inicio de algunas

tcnicas cromatogrficas y los autores de las mismas
 DESARROLLO DE LAS TCNICAS
CROMATOGRFICAS

Tipo de cromatografa Autores Ao

En columna (adsorcin) Tswett 1903

En capa fina Izmailov 1938

En columna (particin) Martin y Synge 1941

En papel Consden 1944

En fase inversa Howard y Martin 1950

De gases James y Martin 1952

Fluidos supercrticos Klesper 1962

De geles Determan 1964

HPLC Horvath 1964
METODOS CROMATOGRFICOS
 METODOS NO CROMATOGRFICOS
Si atendemos a la clasificacin segn las fuerzas implicadas en el proceso,
estas pueden ser mecnicas (filtracin o centrifugacin), qumicas
(precipitacin fraccionada ) o fsicas como la destilacin fraccionada y las que
siguen a continuacin siendo todas ellas tcnicas de separacin/preconcentracin
que no tienen un fundamento cromatogrfico
Extraccin lquido-lquido
Es una tcnica de preconcentracin muy utilizada y que se aplica a
compuestos mayoritarios y a trazas.
Una de sus limitaciones es la dificultad de automatizacin del
proceso. Estas dificultades se minimizan con la extraccin con fluidos
supercriticos (sustancias a temperatura y presin por encima de su
temperatura y presin crtica (punto crtico) , con propiedades
intermedias entre las que tienen como gases o como lquidos).Un
campo muy importante de esta tcnica en la actualidad es la extraccin
con fluidos supercriticos
Extraccin lquido-slido
Es una tcnica por retencin en un slido mediante procesos de
intercambio inico, adsorcin, quelacin, ect. , que se conecta a
sistemas continuos de introduccin de muestra , como seria la
incorporacin en lnea a detectores de naturaleza atmica, la integracin
del proceso de retencin y deteccin en los sensores de flujo o el
acoplamiento en lnea a sistemas cromatogrficos .
 METODOS NO CROMATOGRFICOS
Extraccin lquido-slido
Es una tcnica por retencin en un slido mediante procesos de intercambio
inico, adsorcin, quelacin, ect. , que se conecta a sistemas continuos de
introduccin de muestra , como seria la incorporacin en lnea a detectores de
naturaleza atmica, la integracin del proceso de retencin y deteccin en los
sensores de flujo o el acoplamiento en lnea a sistemas cromatogrficos
Electroforesis capilar
Es una tcnica que se basa en la diferente velocidad de migracin de las
especies cargadas, en el seno de una disolucin amortiguadora a travs de la
cual se aplica un campo elctrico constante.
Sus principales ventajas son su sensibilidad (poca cantidad de muestra
(nL)) y su acoplamiento en lnea a detectores de todo tipo (usados en HPLC)
Existen diversas tcnicas :
electroforesis capilar de zona : la muestra migra en un electrolito de
fondo de composicin constante
isotacoelectroforesis: las muestra se desplaza en el interior del capilar
de separacin entre dos componentes de diferente conductividad
elctrica.
Electroforesis micelar : los compuestos neutros se introducen en el
interior de micelas cargadas, lo que permite su separacin .