Antioxidative activity and total

phenolic compounds of leaf, root

and petiole of four accessions of
Centella asiatica Urban
M.K. Zainola, A. Abd-Hamida,*, S.Yusofb, R.
Musec, Department of Food Technology,
Faculty of Food Science and Biotechnology,
Universiti Putra Malaysia, UPM 43400, Serdang,
Selangor, Malaysia
 Introduction
Penyembuhan luka, perbaikan
memori, bronkitis, asma,
disentri, keputihan, masalah
ginjal, uretritis, antialergi,
antikanker, leukorrhea dan
demam toksik (Kan, 1986)
sebagai antioksidan untuk
meningkatkan lama simpan
makanan.
Centella asiatica
Antioksidan sintetis dibatasi dalam Senyawa oksidatif pada makanan yang
Dengan demikian,
penggunaan makanan , karena mengandung lemak bertanggung jawab
tujuan dari penelitian
berbagai penelitian menunjukkan atas bau dan rasa tengik selama
ini adalah untuk
bahwa bersifat karsinogenik . penyimpanan.
mengevaluasi aktivitas
antioksidan dari Meningkatnya kesadaran konsumen
empat aksesi C. terhadap keamanan aditif makanan dan
asiatica dan untuk biaya produksi yang lebih tinggi dan
menentukan senyawa efisisensi yang lebih rendah
fenolik total di dibandingkan antoksidan alami maka
berbagai bagian aksesi diperlukan alternatif Sumber
tanaman yang antioksidan makanan alami yang aman
berbeda. dibuat
 Material and Method
BAHAN
Diperoleh dari
Malaysian Agriculture
Research and
Development
Institute (MARDI),
Serdang, Selangor.
Centella asiatica Digunakan Empat
aksesi yang berbeda
yaitu CA 01, CA 05,
CA 08 dan CA 11
EKSTRASI
Bagian yang berbeda dari C.asiatica
diekstraksi sesuai dengan metode
modifikasi Chang, Ostric-
Matijasevic, Hseih, dan Huang
(1977).
Seluruh sampel dicuci
dengan air keran yang mengalir
dan dipisahkan menjadi 3 bagian
yang berbeda, yaitu daun, akar
dan petiole, siap untuk
diekstraksi.
10 gr tiap bagiannya dibekukan pada
suhu 20 ° C  dikeringkan beku
pada suhu 42 ° C selama 3-4 hari 
diekstraksi dengan metanol absolut
selama 24 jam dalam
inkubator pada suhu 37 ° C
 Penentuan aktivitas antioksidan
• Empat miligram sampel dilarutkan dalam 4 ml etanol 99,5% (b / v) dicampur
dengan asam linoleat (2,51% v / v) pada 99,5% (b / v) etanol (4,1 ml), buffer
fosfat 0,05 M pH7,0 (8 ml) dan air suling (3,9 ml) dan disimpan dalam suhu
40°C.
• 0,1 ml larutan ini kemudian ditambahkan 9,7 ml etanol 75% (v / v) dan 0,1 ml
Metode ferit 30% (b / v) amonium tiosianat. 3 menit setelah penambahan 0,1 ml 20 mM
tiosianat (FTC) ferrous chloride pada asam hidroklorida 3,5% (v / v) ke dalam campuran reaksi,
absorbansi warna merah yang dihasilkan diukur pada 500 nm setiap 24 jam
sampai hari setelah absorbansi kontrol mencapai nilai maksimal.

• Satu mililiter sampel dari metode FTC ditambahkan ke asam trichioroacetic (2

ml) dan larutan asam tiobarbiturat (2 ml). Campuran ini kemudian dimasukkan
ke dalam bak air mendidih pada suhu 100 ° C selama 10 menit.
Tes thiobarbituric • Setelah pendinginan, disentrifugasi pada 3000 rpm selama 20 menit dan
acid (TBA) absorbansi supernatan kemudian diukur pada 532 nm.
 • ditambahkan ke 10 ml air deionisasi dan 2,0 ml pereaksi fenol
Folin-Ciocalteu (Merck-Schuchardt, Hohenbrun, Jerman).
• 2,0 ml natrium karbonat ditambahkan ke dalam campuran.
Penentuan Kompleks biru yang dihasilkan kemudian diukur pada 680
senyawa fenolik nm.
total

• dengan menggunakan analisis varians (ANOVA) dan

perbedaan yang signifikan antara mean dari analisis rangkap
tiga pada (P <0,05) ditentukan dengan uji (DMRT)
menggunakan Statistical Analysis System (SAS, 1990).
Analisis statistik
Result and Discuss
Aktivitas antioksidan bagian tanaman berasal
dari senyawa aktif yang ada di dalamnya. Dalam
penelitian ini, aktivitas antioksidan C. asiatica
diukur dengan menggunakan metode FTC dan
TBA. Dalam metode FTC,peroksida yang
terbentuk selama tahap awal oksidasi lipid
diukur. Sebagai hasil oksidasi, peroksida secara
bertahap didekomposisi menjadi senyawa
molekul yang lebih rendah dan diukur dengan
reagen TBA.
 Gambar 1

Menunjukkan senyawa fenolik total yang

ditemukan pada akar, daun dan petioles dari
empat aksesi C. asiatica bahwa ekstrak daun
terkandung jumlah tertinggi senyawa fenolik di
semua aksesi yang diuji (8.13-11.7 g Hsieh
(1998) Tingkat yang berbeda yang dilaporkan
dalam penelitian ini dapat dikaitkan dengan
berbagai jenis tanaman dan metode yang
digunakan.
 Dalam penelitian Wang, Nair, Strasburg,
dan Booren (1999) dan Hertog, Hollman,
dan Vennema (1992) melaporkan bahwa
sifat antioksidan beberapa sayuran dan
buah-buahan sebagian disebabkan oleh
senyawa fenolik, terutama flavonoid, yang
dikenal sebagai antioksidan kuat.
 Gambar 2
Menunjukkan aktivitas antioksidan daun, akar dan tangkai
daun dari akses C. asiatica yang berbeda, yang diukur
dengan menggunakan TBA. Hasil menunjukkan pola yang
agak berbeda dari metode FTC, dimana ekstrak akar dan
daun dari semua aksesi C. asiatica menunjukkan aktivitas
antioksidan tinggi, yang tidak signifikan (P <0,05) berbeda
dengan BHT dan a-tocopherol, kecuali akar CA 08.
Perbedaan aktivitas antioksidan yang diamati di sini dapat
terjadi karena beberapa faktor, termasuk mekanisme yang
berbeda yang terlibat dalam dua metode penentuan,
struktur dari senyawa fenolik yang berbeda, mekanisme
antioksidan yang ditunjukkan oleh senyawa dan mungkin
juga akibat efek sinergis dari senyawa yang berbeda.
Asosiasi antara aktivitas antioksidan
dan senyawa fenolik

Gambar 3 menunjukkan senyawa fenolik
total yang ditemukan pada akar, daun dan
tangkai daun dari empat aksesi Centella
asiatica, bahwa jumlah tertinggi senyawa
fenolik terdapat pada ekstrak daun di
semua aksesi yang diuji (8.13–11.7
g/100g), pada akar (6.46–10.5 g/100 g),
pada tangkai daun (3.23–4.91 g/100 g),
 Gambar 4 menunjukkan korelasi antara aktivitas
antioksidan dan senyawa fenolik pada daun, akar
dan tangkai daun dari aksesi C. asiatica . Hasil
menunjukkan hubungan yang kuat antara aktivitas
antioksidan dan senyawa fenolik (r2 = 0,90),
menunjukkan bahwa senyawa fenolik mungkin
bertanggung jawab atas aktivitas antioksidan C.
asiatica. Temuan serupa dilaporkan oleh Gardner,
White, McPhail, dan Duthie (2000), yang
menyarankan bahwa senyawa fenolik adalah
kontributor utama untuk aktivitas antioksidan
apel, nanas dan jus sayuran.
 Conclusion
Hasilnya menunjukkan bahwa daun, akar dan
petiol memiliki aksesi berbeda dari C. asiatica
memiliki berbagai aktivitas antioksidan,dengan
CA 05 dan CA 01 menunjukkan aktivitas
antioksidan lebih tinggi daripada aksesi lainnya
yang diuji bahwa senyawa fenolik merupakan
kontributor utama aktivitas antioksidan C.
asiatica.