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Campus de Parnaíba
Bacharelado em Biomedicina – 7º Período
Microbiologia Médica – 2014.1
Profº. Drº. Gustavo Pereira
Boca
Estômago
Intestino delgado
Intestino grosso
Protozoários
Helmintos/cestóides
Toxinas
fúngicas
Bactérias
Doenças
Doenças
microbianas
Patógenos causadores de doenças
microbianas
do TGI
do TGI gastrointestinais
VÍRUS- Rotavírus
Transmissão oro-fecal
Causa mais frequente de gastroenterite –
80% Holanda e 67% EUA
Protozoários
Helmintos/cestóides
Toxinas
fúngicas
Bactérias
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Microbiota normal do TGI
do TGI
Estômago:
Lactobacillus, Streptococcus
Helicobacter pylori
Intestino delgado:
Salmonella sp
Intestino grosso:
Enterococcus, E. coli
Toxiinfecção alimentar
Doenças
microbianas
do TGI
Intoxicação alimentar por bactérias
Doenças
Doenças
microbianas
Meios de cultura para transporte e
microbianas
do TGI
do TGI conservação
Amostra: fezes
Meio Stuart Swab Cary Blair
Modificação do Meio de
Sem fonte de nitrogênio
Stuart
Sobrevivência de microrganismos
Com solução salina
Conservação de microorganismos
balanceada de
patogênicos como: Haemophilus
tampão fosfato inorgânico
spp., Pneumococcus,
Salmonella spp., Shigella spp
Cor original do meio: Branco
opalescente
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Staphylococcus aureus
do TGI
Enterotoxinas (A-I) - A e D
C. perfringens
Termoestáveis (100°C - 30’).
Staphylococcus aureus
S. aureus
Amostra: alimento contaminado
C. perfringens
B. cereus
V. cholereae
Testes
Colônias Ágar Hipertônico Manitol
MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI
Staphylococcus aureus
S. aureus
Amostra: alimento contaminado
C. perfringens
B. cereus
V. cholereae
Testes
Ágar Baird-Parker
MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Clostridium perfringens
do TGI
Testes
Clostridium perfringens
S. aureus
• Produção de lecitinase e lipases.
C. perfringens • Composição: gema de ovo de galinha,
fosfato, glicose, ágar, proteose,
peptona.
B. cereus Interpretação:
- lecitinase+ :forma halo branco ao
redor da colônia
V. cholereae - lecitinase- : não muda o meio
- lipase+ : cresc de colônias com brilho
perolado
Testes - lipase- : cresc de colônias sem brilho
Ágar Gema de Ovo (EYA)
EQUINE GRASS SICKNESS FUND; 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Bacillus cereus
do TGI
Bacillus cereus
S. aureus
C. perfringens
• Cultura de alimentos
• Fezes – microbiota
B. cereus
Meio seletivo (ágar MYP)
• Testes para toxinas – laboratório de
V. cholereae referência
Bacillus cereus
S. aureus
C. perfringens
B. cereus
V. cholereae
Testes
B. cereus
V. cholereae
S. aureus Fezes
B. cereus
Teste da oxidase
V. cholereae
Aglutinação em lâmina
com anti-soro polivalente
Testes
Vibrio cholereae
S. aureus
Ágar TCBS
C. perfringens
Tiossulfato-Citrato-Bile-Sacarose
B. cereus
Fermentadores da sacarose
Testes
Enterobactérias
Fermentação da lactose
E.coli
Shigella
Yersinia
LACTOSE - : Proteus, Salmonella,
Shigella, Yersinia spp
Diagnóstico
diferencial
Enterobactérias
Espécies sempre patogênicas:
- Salmonella typhi; Shigella, Yersinia pestis
E.coli
Shigella
Formas de Infecção:
- Reservatório animal
Yersinia
- Carreador humano
Diagnóstico - Transmissão endógena - susceptibilidade
diferencial
Enterobactérias
Classificação epidemiológica (sorológica)
Yersinia
Diagnóstico
diferencial
Fatores de Virulência
Endotoxina
Cápsula
Variação de fase antigênica
Sistema de secreção tipo III
Seques. de fatores de cresc
Resist. ao soro bactericida
Resist. aos antimicrobianos
Shigella sp Yersinia sp
Enterobactérias
Possuem fatores de virulência especializados
E.coli
- Adesinas
- Exotoxinas
Salmonella
Doenças
- Bacteremia
Shigella
- Infecção do trato urinário
- Prostatite
Yersinia - Meningite neonatal
- Infecções intra-abdominais
Diagnóstico
diferencial - Gastroenterite
Enterobactérias
E.coli
Salmonella
Shigella
Yersinia
Diagnóstico
diferencial
Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli enterotoxigênica (ETEC)
Aspectos Clínicos
E.coli
- Diarreia aquosa
Salmonella
Aspectos epidemiológicos
- Diarreia da infância em países em desenvolvimento;
diarreia do viajante
Shigella
....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Diarreia causada por E. coli enterotoxigênica (ETEC)
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI
Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli enteropatogênica (EPEC)
E.coli
Aspectos Clínicos
- Diarreia aquosa, vômitos e febre
Salmonella
Aspectos epidemiológicos
- Principal causa de diarreia infantil em países pobres
Shigella
....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Diarreia causada por E. coli enteropatogênica (EPEC)
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI
Aspectos epidemiológicos
Shigella
- Diarreia da infância; diarreia do viajante
Yersinia
Aspectos relativos à virulência
Diagnóstico - Fímbrias, citotoxinas (toxina termoestável
diferencial
enteroagregativa)
....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI
Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli êntero-hemorrágica e
outras cepas produtoras de toxina Shiga
E.coli Aspectos Clínicos
- Diarreia aquosa, colite hemorrágica, Sorotipo O157:H7
Salmonella síndrome hemolítica- urêmica
Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli enteroinvasora
E.coli Aspectos Clínicos
- Infiltrado inflamatório ulceração do cólon
Salmonella
Aspectos epidemiológicos
Shigella - Rara nos Estados Unidos e em países desenvolvidos
....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI
Enterobactérias
Infecções extraintestinais
E.coli Aspectos Clínicos
- ITU, meningite neonatal, infecções nosocomiais
Salmonella
Aspectos epidemiológicos
Shigella - Sorogrupo (Ag K) presente no TGI de grávidas e RN
....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Salmonella spp
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Características gerais
do TGI
Enterobactérias
Morfologia e identificação
São móveis
E.coli Possuem flagelos peritríquios
Não fermentam a lactose.
Salmonella sp Formam ácido , algumas vezes gás, a partir da glicose
Produzem H2S
Shigella sp Doenças
Febre tifóide - Salmonella Typhi
Febres entéricas - Salmonella Paratyphi (A, B, C)
Diagnóstico Enterocolites (ou salmoneloses) – S. Ryphimurium, S. Enteritidis
diferencial
Sintomas - diarreias, febre, dores abdominais, vômitos 12-36h
Enterobactérias
Estrutura antigênica
- Antígenos O Capacidade de invasão
E.coli
- Antígenos H
Salmonella sp - Antígenos K ( capsulares - Vi )
Fatores de Virulência:
Shigella sp
- fímbrias
- proteínas efetoras
Diagnóstico - os lipopolissacarídeos
diferencial
- antígenos de superfície
Enterobactérias
E.coli
Salmonella sp
Shigella sp
Diagnóstico
diferencial
Typhoid Mary
....... SHINOHARA, N. K. S. Salmonella spp., importante agente patogênico veiculado em alimentos . Ciênc. saúde coletiva Rj, 2008.
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Patogenia
do TGI
NUNES, O.C; , ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE Salmonella sp. DE JABUTIS-PIRANGA (Chelonoidis carbonaria) ORIUNDOS DO TRÁFICO
DE ANIMAIS SILVESTRES 2010
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Ocorrência
do TGI
Enterobactérias
E.coli
Salmonella
Shigella
Yersinia
Diagnóstico
diferencial
Enterobactérias
E.coli
Salmonella
Shigella
Yersinia
Diagnóstico
diferencial
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Colônias de Salmonella spp
do TGI
Enterobactérias
Bacilos Gram-negativos, não formadores de esporos,
anaeróbios facultativos
E.coli
S. dysenteriae (A), S. flexneri (B), S.boydii (C) e S. sonnei (D)
Shigelose- Disenteria bacilar
Salmonella
- Fezes com sangue e muco
Shigella Sintomas
- Infecção assintomática sem febre
Yersinia - Disenteria, tenesmos e convulsões
....... BARRY, E.M; Progress and pitfalls in Shigella vaccine research; Nuture Reviews,, 2013
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Shigella spp
do TGI
Enterobactérias
Morfologia e identificação
E.coli
São imóveis
Salmonella Não fermentam a lactose
Não produzem H2S
Nunca produz gás
Shigella
Bactéria de fácil degradação
* Meio de transporte – Salina tamponada
Yersinia * Caldo de enriquecimento
Diagnóstico
diferencial
....... BARRY, E.M; Progress and pitfalls in Shigella vaccine research; Nuture Reviews,, 2013
Ação da Shigella na mucosa intestinal
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Shigella spp
do TGI
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Yersinia spp
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Yersinia spp
do TGI
Enterobactérias
Bacilos Gram-negativos, não formadores de esporos,
Espécies patogênicas para o homem:
E.coli Y. pestis, Y. enterocoliticai, Y. pseudotuberculosis
Salmonella
Causa de infecção associada a alimentação
Enterobactérias
Y. enterocoliticai
Enterocolites
E.coli
Pseudoapendicite
Salmonella Bacteremia relacionada a transfusão sanguínea
Y. pestis
Shigella
Peste bubônica
Peste pneumônica
Yersinia
Diagnóstico
diferencial
Testes
bioquímicos
Biologia Testes
molecular sorológicos
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Primeiros procedimentos
do TGI
Semeadura
direta
Fezes ou Swab
fecal Isolamento
Enriquecimento
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Meios de Enriquecimento
do TGI
Caldo Selenito
Caldo Tetrationato
Amostra
Semeadura
Enriquecimento
Direta
Isolamento
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Ágar Salmonella-Shigella
do TGI
Lactose
Tissulfato de sódio e citrato férrico
permitem a detecção de H²S
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Ágar Verde Brilhante
do TGI
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
Ágar XLD/Bismuto Sulfito/ Verde
microbianas
Enterobactérias
do TGI Brilhante
XLD (Xilose, Lisina, Desoxicolato)
IMViC
I: Indol
M: Vermelho de Metila
V: Voges-Proskauer Indol Vermelho de Metila
C: Citrato de Simmons
Lactose + - - D + + - -
Gás (glicose) + - + + D + + -
H2S - - + D - - D -
Urease - - - D + D + +
L-TD - - - - - - + -
Motilidade D - + + - + D D
Indol + D - D - - D D
Lisina + - + - + D + -
Citrato de - + + + + D D
Simmons
Voges-Proskauer - - - - - + D D
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Teste do Indol (reativo de Kovacs)
do TGI
• Enzima triptofanase
• Degradação do aminoácido L-triptofano
• Indol+ reativo de Kovacs (p-dimetil aminobenzaldeído)
• Anel rosa
Reação Reação
positiva negativa
MR +: E.coli, Shigella,
Salmonella,
Klebsiella e Proteus
Reação Reação
pH >6,2 – Amarelo (negativo)
negativa positiva
pH< 4,4 – Vermelho (positivo)
(produção de acetoína)
Reação Reação
negativa positiva
Para que a bactéria possa utilizar o citrato é necessário que ela tenha
a Citrato permease, que vai permitir a entrada desse composto no
interior da célula
Interpretação
• Cloreto de sódio;
• Extrato de carne;
• Extrato de levedura; Nutrientes
• Peptona
CONCLUSÃO
Compylobacter jejuni
C. jejuni Ágar Skirrow
Compylobacter jejuni
C. jejuni Ágar Karmali
H. pylori
Amostra: fezes
Compylobacter jejuni
C. jejuni
Ágar Campy
H. pylori
Amostra: fezes
C. jejuni
H. pylori
Testes
CONCLUSÃO
PINTO, A.C.R; Helicobacter pylori: uma revisão; CENTRO UNIVERSITÁRIO DAS FACULDADES METROPOLITANAS UNIDAS, SP, 2007
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI
H. pylori
C. jejuni
Ágar BHM (Belo Horizonte Medium)
PINTO, A.C.R; Helicobacter pylori: uma revisão; CENTRO UNIVERSITÁRIO DAS FACULDADES METROPOLITANAS UNIDAS, SP, 2007
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Conclusão
do TGI
C. jejuni
H. pylori
Testes
CONCLUSÃO