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Universidade Federal do Piauí – UFPI

Campus de Parnaíba
Bacharelado em Biomedicina – 7º Período
Microbiologia Médica – 2014.1
Profº. Drº. Gustavo Pereira

Doenças microbianas do TGI

Ana Caroline - Ana Patrícia - Bruna Souza - Renata


Paiva- Simone de Araújo- Walkássia Kelle
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Sistema digestivo
do TGI

 Órgãos do TGI + órgãos acessórios


 Funções: movimento, secreção, digestão,
absorção, eliminação
 Mucina

 Boca
 Estômago
 Intestino delgado
 Intestino grosso

 Microbiota normal do TGI

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


 Infecção- patógeno penetra no trato GI e se
multiplica

 Intoxicação- ingestão da toxina pré-formada

 Disenteria- diarreia intensa com sangue ou muco

 Gastrenterite- doenças que causam inflamação


na mucosa gástrica e intestinal

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


Vírus

Protozoários

Helmintos/cestóides

Toxinas
fúngicas

Bactérias
Doenças
Doenças
microbianas
Patógenos causadores de doenças
microbianas
do TGI
do TGI gastrointestinais
VÍRUS- Rotavírus

 RNA dupla fita


 Transmissão oro-fecal
 Enterite viral –RN e crianças novas
 Diarreia aquosa dentro de 48h
 Maior causa de morbidade e mortalidade infantil
 Epidemiologia
 Diagnóstico Imunológico (ELISA)
 Reposição de líquidos

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


Doenças
Doenças
microbianas
Patógenos causadores de doenças
microbianas
do TGI
do TGI gastrointestinais
VÍRUS- Norovírus

 Transmissão oro-fecal
 Causa mais frequente de gastroenterite –
80% Holanda e 67% EUA

 Período de incubação: 10 - 48 horas


Sintomas: 24 - 48 horas: Náuseas e vômitos; cólicas
abdominais, diarreia e enxaqueca
Surtos:
locais com grande concentração de pessoas (ex: cruzeiros)
MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009
Vírus

Protozoários

Helmintos/cestóides

Toxinas
fúngicas

Bactérias
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Microbiota normal do TGI
do TGI

Estômago:
Lactobacillus, Streptococcus
Helicobacter pylori

Intestino delgado:
Salmonella sp

Intestino grosso:
Enterococcus, E. coli

Shigella: patógeno entérico

MURRAY, P. R; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, RJ, 2011


Doenças
microbianas Microrganismos e doenças do TGI
do TGI

Toxiinfecção alimentar
Doenças
microbianas
do TGI
Intoxicação alimentar por bactérias
Doenças
Doenças
microbianas
Meios de cultura para transporte e
microbianas
do TGI
do TGI conservação
Amostra: fezes
Meio Stuart Swab Cary Blair
Modificação do Meio de
Sem fonte de nitrogênio
Stuart
Sobrevivência de microrganismos
Com solução salina
Conservação de microorganismos
balanceada de
patogênicos como: Haemophilus
tampão fosfato inorgânico
spp., Pneumococcus,
Salmonella spp., Shigella spp
Cor original do meio: Branco
opalescente

ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Staphylococcus aureus
do TGI

 Cocos Gram-positivos, anaeróbios facultativos, não


S. aureus esporulados

 Enterotoxinas (A-I) - A e D
C. perfringens
 Termoestáveis (100°C - 30’).

 Cremes, bolos e coberturas de bolo, produtos feitos com


B. cereus ovos, carnes, frangos, atum e maionese
 Não há destruição com cozimento
 Atuam sobre o SNC – vômitos e náuseas estimulam o
V. cholereae peristaltismo intestinal
 Imunidade não duradoura

 Manipulador - infecção por Estafilococos


Testes - Metade é assintomático

BARRETO, J.R; INTOXICAÇÕES ALIMENTARES , capítulo 24; 2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Staphylococcus aureus
S. aureus
Amostra: alimento contaminado

C. perfringens

B. cereus

V. cholereae

Testes
Colônias Ágar Hipertônico Manitol
MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Staphylococcus aureus
S. aureus
Amostra: alimento contaminado

C. perfringens

B. cereus

V. cholereae

Testes
Ágar Baird-Parker
MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Clostridium perfringens
do TGI

S. aureus  Bacilos Gram-positivos, esporulados, anaeróbios estritos,


capazes de produzir toxinas (Exotoxinas)
C. perfringens
 Dor abdominal, diarreia
 Maioria casos – leve, autolimitada
B. cereus
 Diagnóstico:
- Isolamento e identificação – patógeno (fezes)
- Provas sorológicas – Kits específicos
V. cholereae

Testes

BARRETO, J.R; INTOXICAÇÕES ALIMENTARES , capítulo 24; 2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Clostridium perfringens
S. aureus
• Produção de lecitinase e lipases.
C. perfringens • Composição: gema de ovo de galinha,
fosfato, glicose, ágar, proteose,
peptona.
B. cereus  Interpretação:
- lecitinase+ :forma halo branco ao
redor da colônia
V. cholereae - lecitinase- : não muda o meio
- lipase+ : cresc de colônias com brilho
perolado
Testes - lipase- : cresc de colônias sem brilho
Ágar Gema de Ovo (EYA)
EQUINE GRASS SICKNESS FUND; 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Bacillus cereus
do TGI

S. aureus  Bacilos Gram-positivos, aeróbio, produtores de


esporos.
 Solo
C. perfringens
 Gastroenterite de formas distintas
 síndrome diarréica - Enterotoxina termolábil –
B. cereus  12-24h; diarréias intensas, dores abdominais,
tenesmos retais

 síndrome emética - Enterotoxina termoestável


V. cholereae
vômitos, náuseas, mal estar, diarreia com 6-24h
de duração

Testes  Vegetais crus e cozidos, leite, cereais (arroz),


farinha, amido
BARRETO, J.R; INTOXICAÇÕES ALIMENTARES , capítulo 24; 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Bacillus cereus
S. aureus

C. perfringens
• Cultura de alimentos

• Fezes – microbiota
B. cereus
Meio seletivo (ágar MYP)
• Testes para toxinas – laboratório de
V. cholereae referência

Resultado: sem fermentação do manitol com


Testes precipitado branco em volta da colônia

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Bacillus cereus
S. aureus

C. perfringens

B. cereus

V. cholereae

Testes

Disponível em> http://www.fda.gov, acesso em 25/07/14


Colônias, largas, irregulares e
achatadas
com margens onduladas
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Vibrio cholereae
do TGI

S. aureus Bacilos Gram-negativos, anaeróbios facultativos, não


esporulados
C. perfringens
Patogênicos - V.cholerae - toxina colérica
- Penetra no organismo humano via oral,
B. cereus
responsável pela cólera, produz exotoxina que atua nas
células da mucosa intestinal

Período de incubação: De 6h a três dias


V. cholereae
Diarreia moderada, aquosa e profunda – “fezes de
água de arroz”
Testes
... Ingestão de peixes, moluscos e crustáceos
contaminados
BARRETO, J.R; INTOXICAÇÕES ALIMENTARES , capítulo 24; 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Características
do TGI

S. aureus Fezes com aspecto de “água de arroz”, característica


do paciente com cólera
C. perfringens

B. cereus

V. cholereae

Baixas condições sanitárias


Testes
...

BARRETO, J.R; INTOXICAÇÕES ALIMENTARES , capítulo 24; 2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Ocorrência
do TGI

Cria saúde, 2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Ocorrência
do TGI
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Ocorrência
do TGI

RTP noitícias, 2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

S. aureus Fezes

C. perfringens Semeadura direta em


ágar TCBS Enriquecimento
Ágar TCBS

B. cereus
Teste da oxidase

V. cholereae

Aglutinação em lâmina
com anti-soro polivalente
Testes

E & O LABORATORIES LTDA - Manufacturs of Microbiological Culture Media ,2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Vibrio cholereae
S. aureus
Ágar TCBS
C. perfringens

Tiossulfato-Citrato-Bile-Sacarose
B. cereus
Fermentadores da sacarose

Leitura: aparecem como colónias


V. cholereae amarelas de média dimensão, lisas e
opacas.

Testes

E & O LABORATORIES LTDA - Manufacturs of Microbiological Culture Media ,2014


Enterobactérias
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Enterobacteriaceae
do TGI

 Bacilos Gram-negativos, aeróbios e anaeróbios


Enterobactérias facultativos

E.coli  Móveis (flagelos peritríquios) ou imóveis (Klebsiella,


Shigella, Yersinia spp)
Salmonella
 Não formam esporos
Fermentam glicose
Shigella  Necessidade nutricionais simples Catalase positivas
Oxidase negativas
O + : P. shigelloides
Yersinia
 Ausência de citocromo oxidase

Diagnóstico Ubiquitárias: Resistências a sais biliares


diferencial • Cosmopolita; solo, água e vegetação Fermentação da lactose

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Enterobacteriaceae
do TGI

Enterobactérias
 Fermentação da lactose

E.coli

LACTOSE + : Escherichia, Klebsiella,


Salmonella Enterobacter, Citrobacter, Serratia spp

Shigella

Yersinia
LACTOSE - : Proteus, Salmonella,
Shigella, Yersinia spp
Diagnóstico
diferencial

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Enterobacteriaceae
do TGI

Enterobactérias
 Espécies sempre patogênicas:
- Salmonella typhi; Shigella, Yersinia pestis
E.coli

 Espécies comensais  Infecções oportunistas:


Salmonella
- E.coli; Klebsiella pneumoniae; Proteus mirabilis

Shigella
 Formas de Infecção:
- Reservatório animal
Yersinia
- Carreador humano
Diagnóstico - Transmissão endógena - susceptibilidade
diferencial

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Enterobacteriaceae
do TGI

Enterobactérias
 Classificação epidemiológica (sorológica)

E.coli - Polissacarídeo somático (O)


- Antígeno capsular (K) Antígenos
Salmonella
- Proteínas flagelares (H)
Shigella
Exemplo: O26:K60:H11

Yersinia

Diagnóstico
diferencial

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Enterobacteriaceae
do TGI

Fatores de Virulência

Endotoxina
Cápsula
Variação de fase antigênica
Sistema de secreção tipo III
Seques. de fatores de cresc
Resist. ao soro bactericida
Resist. aos antimicrobianos

Estrutura antigênica das Enterobactérias


MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Enterobacteriaceae
do TGI

Escherichia spp Salmonella sp

Shigella sp Yersinia sp

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


Escherichia coli
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Características gerais
do TGI

Enterobactérias
 Possuem fatores de virulência especializados
E.coli
- Adesinas
- Exotoxinas
Salmonella
 Doenças
- Bacteremia
Shigella
- Infecção do trato urinário
- Prostatite
Yersinia - Meningite neonatal
- Infecções intra-abdominais
Diagnóstico
diferencial - Gastroenterite

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Características gerais
do TGI

Enterobactérias  Sorotipo associado a virulência: O157 / Adesinas e Exotoxinas

E.coli - Anti-soros preparados contra antígenos O, K e H.


- 174 antígenos O, 100 antígenos K e 57 antígenos H.
Salmonella
Exemplo: O26:K60:H11

Shigella  6 patotipos: diferentes mecanismos de patogenicidade


E.coli enterotoxigênica - ETEC
Intestino delgado
E.coli enteropatogênica- EPEC Diarreia aquosa
Yersinia
E.coli enteroagregativa – EAEC
Diagnóstico E.coli entero-hemorrágica - EHEC
diferencial Intestino grosso
E.coli. Enteroinvasora - EIEC

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Características gerais
do TGI

Enterobactérias

E.coli

Salmonella

Shigella

Yersinia

Diagnóstico
diferencial

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI

Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli enterotoxigênica (ETEC)
 Aspectos Clínicos
E.coli
- Diarreia aquosa

Salmonella
 Aspectos epidemiológicos
- Diarreia da infância em países em desenvolvimento;
diarreia do viajante
Shigella

 Aspectos relativos à virulência


Yersinia - Fímbrias
- Enterotoxinas termolábeis (LT-I e LT-II)
Diagnóstico - Enterotoxina s termoestáveis (Sta e Stb)
diferencial

....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Diarreia causada por E. coli enterotoxigênica (ETEC)
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI

Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli enteropatogênica (EPEC)

E.coli
 Aspectos Clínicos
- Diarreia aquosa, vômitos e febre
Salmonella
 Aspectos epidemiológicos
- Principal causa de diarreia infantil em países pobres
Shigella

 Aspectos relativos à virulência


Yersinia - Fímbrias formadoras de feixes, com efeito de
fixação e ofuscamento
Diagnóstico
diferencial

....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Diarreia causada por E. coli enteropatogênica (EPEC)
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI

Enterobactérias Diarreia causada por E. coli enteroagregadora


(EAEC)
E.coli
 Aspectos Clínicos
Salmonella - Diarreia crônica e crescimento retardado- crianças

 Aspectos epidemiológicos
Shigella
- Diarreia da infância; diarreia do viajante

Yersinia
 Aspectos relativos à virulência
Diagnóstico - Fímbrias, citotoxinas (toxina termoestável
diferencial
enteroagregativa)

....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI

Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli êntero-hemorrágica e
outras cepas produtoras de toxina Shiga
E.coli  Aspectos Clínicos
- Diarreia aquosa, colite hemorrágica, Sorotipo O157:H7
Salmonella síndrome hemolítica- urêmica

Shigella  Aspectos epidemiológicos


- Surtos transmissíveis via alimentos e água
em países em desenvolvimento
Yersinia

 Aspectos relativos à virulência


Diagnóstico
diferencial - Toxinas Shiga, efeito de fixação e
ofuscamento
....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Diarreia causada por E. coli êntero-hemorrágica e outras cepas produtoras de
toxina Shiga
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI

Enterobactérias
Diarreia causada por E. coli enteroinvasora
E.coli Aspectos Clínicos
- Infiltrado inflamatório  ulceração do cólon
Salmonella

 Aspectos epidemiológicos
Shigella - Rara nos Estados Unidos e em países desenvolvidos

Yersinia  Aspectos relativos à virulência


- Sorotipos O: O124; O143 e O164
Diagnóstico
diferencial

....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI

Enterobactérias
Infecções extraintestinais
E.coli  Aspectos Clínicos
- ITU, meningite neonatal, infecções nosocomiais
Salmonella

 Aspectos epidemiológicos
Shigella - Sorogrupo (Ag K) presente no TGI de grávidas e RN

Yersinia  Aspectos relativos à virulência


- Fímbrias de tipos 1 e P, entre outros; hemolisina; cápsula;
Diagnóstico sistemas de aquisição de ferro
diferencial

....... MEDICINANET, Infecções causadas por Escherichia coli e outros bacilos entéricos gram-negativos , 2014
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Escherichia coli
do TGI

Meio EMB Meio SSA Meio MacConkey

Colônias pequenas , Colônias pequenas, Colônias de cor rosa


de cor verde metálico brilhante redondas de cor rósea avermelhada Lactose +

ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Salmonella spp
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Características gerais
do TGI

Enterobactérias
 Morfologia e identificação
 São móveis
E.coli  Possuem flagelos peritríquios
 Não fermentam a lactose.
Salmonella sp  Formam ácido , algumas vezes gás, a partir da glicose
 Produzem H2S

Shigella sp Doenças
 Febre tifóide - Salmonella Typhi
 Febres entéricas - Salmonella Paratyphi (A, B, C)
Diagnóstico  Enterocolites (ou salmoneloses) – S. Ryphimurium, S. Enteritidis
diferencial
 Sintomas - diarreias, febre, dores abdominais, vômitos 12-36h

NUNES, O.C; , ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE Salmonella sp. DE JABUTIS-PIRANGA


....... (Chelonoidis carbonaria) ORIUNDOS DO TRÁFICO
DE ANIMAIS SILVESTRES 2010
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Características gerais
do TGI

Enterobactérias
 Estrutura antigênica
- Antígenos O Capacidade de invasão
E.coli
- Antígenos H
Salmonella sp - Antígenos K ( capsulares - Vi )

Fatores de Virulência:
Shigella sp
- fímbrias
- proteínas efetoras
Diagnóstico - os lipopolissacarídeos
diferencial
- antígenos de superfície

....... MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Transmissão
do TGI

Enterobactérias

E.coli

Salmonella sp

Shigella sp

Diagnóstico
diferencial

Typhoid Mary

....... SHINOHARA, N. K. S. Salmonella spp., importante agente patogênico veiculado em alimentos . Ciênc. saúde coletiva Rj, 2008.
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Patogenia
do TGI

NUNES, O.C; , ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DE Salmonella sp. DE JABUTIS-PIRANGA (Chelonoidis carbonaria) ORIUNDOS DO TRÁFICO
DE ANIMAIS SILVESTRES 2010
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Ocorrência
do TGI

Enterobactérias

E.coli

Salmonella

Shigella

Yersinia

Diagnóstico
diferencial

....... Disponível em >http://foodsafetybrazil.com, acesso em 26/07/14


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Ocorrência
do TGI

Enterobactérias

E.coli

Salmonella

Shigella

Yersinia

Diagnóstico
diferencial

....... Disponível em >http://biosafelab.com.br, acesso em 24/07/14


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Colônias de Salmonella spp
do TGI

Meio EMB Meio SSA Meio MacConkey

Colônias pequenas Colônias transparentes, Colônias transparentes,


e transparentes podem ter núcleo central Amareladas, Lactose -

ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Colônias de Salmonella spp
do TGI

Meio EMB Meio SSA Meio MacConkey


Shigella spp
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Shigella spp
do TGI

Enterobactérias
 Bacilos Gram-negativos, não formadores de esporos,
anaeróbios facultativos
E.coli
 S. dysenteriae (A), S. flexneri (B), S.boydii (C) e S. sonnei (D)
 Shigelose- Disenteria bacilar
Salmonella
- Fezes com sangue e muco

Shigella  Sintomas
- Infecção assintomática sem febre
Yersinia - Disenteria, tenesmos e convulsões

Diagnóstico  Criança menores que 4 anos


diferencial
 Contaminação: ostras, camarão, leite, etc

....... BARRY, E.M; Progress and pitfalls in Shigella vaccine research; Nuture Reviews,, 2013
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Shigella spp
do TGI

Enterobactérias
Morfologia e identificação

E.coli
 São imóveis
Salmonella  Não fermentam a lactose
 Não produzem H2S
 Nunca produz gás
Shigella
 Bactéria de fácil degradação
* Meio de transporte – Salina tamponada
Yersinia * Caldo de enriquecimento

Diagnóstico
diferencial

....... BARRY, E.M; Progress and pitfalls in Shigella vaccine research; Nuture Reviews,, 2013
Ação da Shigella na mucosa intestinal
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Shigella spp
do TGI

Meio EMB Meio SSA Meio MacConkey

Colônias pequenas Colônias transparentes,


Colônias transparentes
e transparentes Amareladas, Lactose -

ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Yersinia spp
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Yersinia spp
do TGI

Enterobactérias
 Bacilos Gram-negativos, não formadores de esporos,
 Espécies patogênicas para o homem:
E.coli  Y. pestis, Y. enterocoliticai, Y. pseudotuberculosis

Salmonella
 Causa de infecção associada a alimentação

 Mais comum nos EUA e Europa. Menos frequente no Brasil


Shigella
 Crescimento entre 22-25ºC, podendo crescer lentamente a
4ºC
Yersinia
 Infecção zoonótica: reservatórios animais (roedores, porcos,
carneiros, bovinos, cavalos e animais domésticos)
Diagnóstico
diferencial
 Diarréia sanguinolenta, cólicas abdominais e febre

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Yersinia spp
do TGI

Enterobactérias
Y. enterocoliticai
 Enterocolites
E.coli
 Pseudoapendicite
Salmonella  Bacteremia relacionada a transfusão sanguínea

Y. pestis
Shigella
 Peste bubônica
 Peste pneumônica
Yersinia

Diagnóstico
diferencial

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


.......
Diagnóstico diferencial
*Enterobactérias
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Tipos de testes
do TGI

Testes
bioquímicos

Biologia Testes
molecular sorológicos
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Primeiros procedimentos
do TGI

Semeadura
direta
Fezes ou Swab
fecal Isolamento
Enriquecimento
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Meios de Enriquecimento
do TGI

Caldo Selenito

Enriquecimento e isolamento de Salmonella


spp. e Shigella spp. em amostras de fezes,
urina e alimentos.

Caldo Tetrationato

Sais de bile =inibem microrganismos Gram


positivos
Solução de iodo= inibe a microbiota normal de
espécies fecais
Para enriquecimento de Salmonella spp.
ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Primeiros procedimentos
do TGI

Amostra

Semeadura
Enriquecimento
Direta

MacConkey Caldo Selentito Caldo


EMB
Cistina Tetrationato
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Primeiros procedimentos
do TGI

Isolamento

Ágar Verde Ágar sulfito


Hektoen Ágar SS
brilhante bismuto
Microrganismo Meio EMB Meio SS Meio MacConkey

Colônias pequenas , Colônias pequenas, Colônias de cor rosa


de cor verde metálico redondas de cor rósea avermelhada Lactose +
Escherichia coli brilhante

Colônias pequenas Colônias transparentes, Colônias transparentes,


e transparentes podem ter núcleo central Amareladas, Lactose -
Salmonella sp

Colônias pequenas Colônias incolores colônias transparente


Shigella sp e transparentes s á incolores , Lactose -
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Ágar Hektoen
do TGI

Meio levemente seletivo, diferencial,


utilizado para o isolamento de
enterobactérias, especialmente,
Shigella e Salmonella. Shigella spp

Forma: Gel de viscosidade firme


Cor: Âmbar a verde

pH: 7,5 ± 0,2 a 25°C

Salmonella spp E. coli

ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Ágar Salmonella-Shigella
do TGI

Componentes (sais de bile, verde


brilhante e citrato de sódio) que
inibem microrg Gram positivos)

Lactose
Tissulfato de sódio e citrato férrico
permitem a detecção de H²S

Cor original do meio: vermelho


alaranjado

ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Ágar Verde Brilhante
do TGI

Bactérias fermentadoras de lactose


(colônias amarelas a amarelas-acinzentadas
rodeadas por intensa zona amarelo-
esverdeada no meio Ex: E.coli, Klebsiella spp,
grupo Enterobacter spp)

Bactérias não fermentadoras de lactose


(colônias rosas/vermelhas claras, opacas,
rodeadas por zonas vermelhas brilhantes; Ex:
Salmonella spp, que não S.typhi ou S.
paratyphi, Proteus spp- fermentação variável.

ANVISA, Descrição dos Meios de Cultura Empregados nos Exames Microbiológicos, Módulo IV
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
Ágar XLD/Bismuto Sulfito/ Verde
microbianas
Enterobactérias
do TGI Brilhante
XLD (Xilose, Lisina, Desoxicolato)

Meio moderadamente seletivo,


recomendado para isolamento e
diferenciação de enterobactérias,
especialmente Shigella spp

Ágar Bismuto Sulfito: isolamento e


diferenciação de Salmonella spp.,
particularmente Salmonella typhi

Ágar Verde Brilhante:


Meio altamente seletivo para a isolamento de
Salmonella spp. exceto S. typhi

PLAST LABOR, Microbiologia, 2014


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Ágar Rambach- Salmonella
do TGI

Meio diferencial para a identificação de espécies de Salmonella em alimentos


e amostras clínicas
Desoxicolato de sódio inibe: as bactérias Gram-positivas
Meio contém propileno glicol

Salmonella Rambach Agar Escherichia coli em agar Rambach

PLAST LABOR, Microbiologia, 2014


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Testes IMViC
do TGI

IMViC

I: Indol
M: Vermelho de Metila
V: Voges-Proskauer Indol Vermelho de Metila
C: Citrato de Simmons

Voges-Proskauer Citrato de Simmons

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Escherichia Shigella Salmonella Citrobacter Klebsiella Enterobacter Proteus Yersinia

Lactose + - - D + + - -

Gás (glicose) + - + + D + + -

H2S - - + D - - D -

Urease - - - D + D + +

L-TD - - - - - - + -

Motilidade D - + + - + D D

Indol + D - D - - D D

Lisina + - + - + D + -

Citrato de - + + + + D D
Simmons

Voges-Proskauer - - - - - + D D
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Teste do Indol (reativo de Kovacs)
do TGI

• Enzima triptofanase
• Degradação do aminoácido L-triptofano
• Indol+ reativo de Kovacs (p-dimetil aminobenzaldeído)
• Anel rosa

Reação Reação
positiva negativa

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Teste de MR – Vermelho de metila
do TGI

- O Vermelho de Metila é o indicador de pH;


- O teste é utilizado na verificação da produção de grandes
quantidades de ácidos, como o ácido pirúvico no metabolismo
da glicose;
- As enterobactérias usam o ácido pirúvico para produzir outros
ácidos como ác.lático, ác.acético e ác.fórmico.

MR +: E.coli, Shigella,
Salmonella,
Klebsiella e Proteus

Reação Reação
pH >6,2 – Amarelo (negativo)
negativa positiva
pH< 4,4 – Vermelho (positivo)

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Teste de Voges-Proskauer
do TGI

 (produção de acetoína)

 Verifica a capacidade do microrganismo em produzir ácidos


como o Acetilmetilcarbinol (acetoína) como um precursor da
síntese de 2,3 butanediol. Adiciona-se NaOH que reage com a
acetoína produzindo um composto vermelho.

Reação Reação
negativa positiva

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Citrato de Simmons
do TGI

 Diferencia os microrganismos pela capacidade de usarem o Citrato


como única fonte de carbono. Azul de bromotimol como indicador de
pH

 Para que a bactéria possa utilizar o citrato é necessário que ela tenha
a Citrato permease, que vai permitir a entrada desse composto no
interior da célula

 Uma vez incorporado, o citrato será degradado pela enzima Citrase,


produzindo compostos alcalinos

A: Controle não inoculado (Verde)


B: Negativo (Verde)
C: Positivo (Azul)
VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Teste da Lactose
do TGI

Indicador: Vermelho de Fenol

Fonte de açúcar: glicose

Resultados do teste de utilização de carboidrato. A: açúcar +/gás +. B: açúcar


+/gás - . C: Tubo controle não inoculado. D e E: açúcar -/gás -.

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Produção de urease
do TGI

Determinar a habilidade do microrganismo de


degradar a ureia em duas moléculas de amônia
pela ação da enzima urease, resultando na
alcalinização do meio.

Interpretação

Cor original do meio: amarelo palha


Positivo: alteração do meio para cor de rosa, pink
Negativo: sem alteração de cor do meio
VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164
Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
Meio SIM (Teste de motilidade e
microbianas
Enterobactérias
do TGI produção de H2S)

Tubo A: controle não inoculado. Tubo B: Resultado de motilidade negativo,


apenas no local inoculado. Tubo C: motilidade positivo (turvação do meio)

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Ágar TSI (Triple sugar iron)
do TGI

Cor púrpura = alcalino. Salmonella spp


Cor amarelo = ácido.
• Lactose (1%) ;
• Sacarose (1%); Carboidratos
• Glicose (01%);

• Vermelho de fenol; Indicador


de pH
24h
ou • Tiossulfato de sódio; Indicador
• Sulfato ferroso; de H2S

• Cloreto de sódio;
• Extrato de carne;
• Extrato de levedura; Nutrientes
• Peptona

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Enterotube II- Multitestes (12 provas)
do TGI

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Diagnóstico
Doenças
Diferencial de
microbianas
Enterobactérias
Enterotube II- Multitestes (12 provas)
do TGI

O nº de identificação é dado a partir de cada prova bioquímica individualmente , à qual é


atribuído em nº separado. O nº final de 5 dígitos é comparado a uma tabela-padrão que
corresponde a um único microrganismo

VERMELHO, A.B; Práticas de Microbiologia, Guanabara Koogan, Rj, 2006, p.164


Outras bactérias
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Campylobacter jejuni
do TGI

C. jejuni Bacilos Gram-negativos, não esporulados,


microaerófilos
H. pylori
 Gastroenterite humana - C. jejuni e C. coli.
Testes
 A doença é causada por diarréia, dores abdominais
 são carnes suínas e bovinas, leite cru

CONCLUSÃO

MURRAY, P. R. et al; Microbiologia Médica, 6ª edição, Elsevier, SP, 2009


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Compylobacter jejuni
C. jejuni Ágar Skirrow

H. pylori Amostra: fezes

Composição: sangue de cavalo,


solução de antibióticos, meio
Testes ágar-sangue

Resultado +: Colônias pequenas,


CONCLUSÃO sem hemólise, achatadas, com
centro elevado e mucoide; com
coloração âmbar ou levemente
rosada

E & O LABORATORIES LTDA - Manufacturs of Microbiological Culture Media ,2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Compylobacter jejuni
C. jejuni Ágar Karmali

H. pylori
Amostra: fezes

Composição: Sangue de carneiro,


Testes
carvão ativado , suplemento
antibiótico

CONCLUSÃO Leitura: colônia de C.jejuni


acinzentada e irregular

E & O LABORATORIES LTDA - Manufacturs of Microbiological Culture Media ,2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

Compylobacter jejuni
C. jejuni
Ágar Campy

H. pylori
Amostra: fezes

Testes Meio com antibióticos


(vancomicina, anfotericina B)

CONCLUSÃO Interpretação: colônias


acinzentadas, brilhantes e
irregulares após período de
inoculação.

E & O LABORATORIES LTDA - Manufacturs of Microbiological Culture Media ,2014


Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Helicobacter pylori
do TGI

C. jejuni  Bastonete gram-negativo espiralado


 Distribuição cosmopolita
 Prevalência -questão de saúde pública
H. pylori  Transmissão: Oro-fecal, oral-oral, etc

Testes  Fatores de Virulência:


- Urease, proteína de choque térmico, mucinase, catalase

CONCLUSÃO Mecanismos de injúria no tecido:


- Úlcera péptica
- Gastrite
- Carcinoma e linfoma gástrico

TORTORA, G. R; MICROBIOLOGIA; 10ª edição, Artmed, Porto Alegre, 2012


Infecção por Helicobacter pylori, levando à ulceração da parede do
estômago.
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Helicobacter pylori
do TGI

C. jejuni

H. pylori

Testes

CONCLUSÃO

Imagens endoscópicas de úlcera duodenal (A) e úlcera


gástrica (B)

PINTO, A.C.R; Helicobacter pylori: uma revisão; CENTRO UNIVERSITÁRIO DAS FACULDADES METROPOLITANAS UNIDAS, SP, 2007
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Identificação
do TGI

H. pylori
C. jejuni
Ágar BHM (Belo Horizonte Medium)

H. pylori Teste da urease


Composição: sangue de carneiro,
Testes ágar, antimicrobianos (Vancomicina,
anfotericina B)

Amostras: fragmentos de biópsias


CONCLUSÃO inoculadas no centro da cultura.

Cultivo de H. pylori em placa de ágar sangue


(colônias puntiformes translúcidas e não pigmentadas, com o diâmetro de 1-2mm)

PINTO, A.C.R; Helicobacter pylori: uma revisão; CENTRO UNIVERSITÁRIO DAS FACULDADES METROPOLITANAS UNIDAS, SP, 2007
Doenças
Doenças
microbianas
microbianas
do TGI
Conclusão
do TGI

C. jejuni

H. pylori

Testes

CONCLUSÃO

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