A - 3 - Métodos Cromatograficos - Cromatografia de Gases

UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
ANÁLISIS INSTRUMENTAL (II)

Cromatografía de Gases
Q.F. Michael Rendón Morán
Guayaquil, Julio de 2017
Facultad de Ciencias Químicas
U n i ver s idad de G u a y a quil
PROGRAMA DE LA ASIGNATURA
SEGUNDA UNIDAD
II. MÉTODOS DE SEPARACIÓN
II.I Introducción a la Cromatografía
 Separaciones cromatográficas, nomenclatura. Parámetros de cromatografía.
Cuantificación en cromatografía. Descripción de la separación cromatográfica.
Ensanchamiento de banda – ecuación de van Deemter. Mejora de las
separaciones. Picos asimétricos.
II.II Cromatografía de Gases
 Introducción. Muestras analizables. Introducción de muestras, divisores y
columnas-fases estacionarias, temperatura y caudal. Detectores de GC.
Cromatografía de fluidos supercríticos, comparación GC vs CFS.
II.III Cromatografía Líquida
 Tipos de LC. Fase normal. Fase reversa. De intercambio iónico. Por exclusión de
tamaños. Gradientes. Efecto de la fase móvil. Tamaño de partícula, de columna.
Detectores para columnas LC. Separaciones en continuo.
PLAN DE CLASE
ACTIVIDADES DE ORGANIZACIÓN DEL APRENDIZAJE AMBIENTES DE APRENDIZAJE
CONTENIDOS: CONOCIMIENTOS A TIEMPO DE
DESARROLLAR INTERACCIÓN DIRECTA CON EL APLICACIÓN Y TRABAJO AUTÓNOMO - APRENDIZAJE MÉTODOS, TECNICAS
TIPO
PROFESOR EXPERIMENTACIÓN COLABORATIVO E INSTRUMENTOS
Principio de la cromatografía,
parámetros de cromatografía, fase
- Clases teóricas 5
móvil y estacionaria. Tipos de
cromatografía.
Cuantificación en cromatografía.
Descripción de la separación - Clases teóricas - Clase magistral
cromatográfica. Ensanchamiento de 4 - Vocabulario,
- Resolución de ejercicios
banda, ecuación de van Deemter. - Exposición
- Estudio de caso
Mejoramiento de las separaciones. -Resolución de
Picos asimétricos. - Clases teóricas 4
ejercicios
- Vocabulario
Cromatografía líquida. Tipos de LC. - Re construcción - Cuestionario. -
- Estudio de caso o
Fase normal, reversa, de intercambio de Taller
- Clases teóricas - Clase práctica en el Ejemplos
iónico, por exclusión de tamaños. 5 conocimientos - Interpretación de
- Exposición Laboratorio - Cuestionario - Lección
Gradientes, efecto de la temp., tamaño - Aplicación de artículos
- Análisis de artículos y/o
de partícula, de columna. aprendizaje - Implementación de
textos
Cromatografía líquida. Detectores para protocolos de
- Clases teóricas técnicas e
columnas LC. Separaciones en 2
- Taller instrumentación
contínuo. Aplicaciones.
Cromatografía de gases. Introducción analítica -
de muestras, gas de arrastre, inyector - Clases teóricas Elaboración de
5 informes de lab
y columnas - fases estacionarias. Temp. - Exposición
y caudal.
Cromatografía de gases. Detectores de
GC. Aplicaciones. Cromatografía de - Clases teóricas
2
fluidos supercríticos. - Taller
• Sílaboo de Análisis Instrumental II

PLAN DE CLASE
EVALUACIÓN DE LOS APRENDIZAJES UNIDAD # 2
PRODUCTOS RESULTADOS Y ESTÁNDARES DE GESTIÓN ACREDITACIÓN Y
CONTENIDOS GESTIÓN PRÁCTICA
ACADÉMICOS ESPERADOS PRESENTACIÓN FORMATIVA VALIDACIÓN
El reporte de vocabulario
contendrá la terminología y
definiciones respectivas de la
Unidad.
Participación en clase El informe de análisis de
Cromatografía de gases. Reporte de artículo, y de estudio de caso, EVALUACIÓN DE LOS APRENDIZAJES DE LA UNIDAD
Introducción de muestras, vocabulario incluirá los fundamentos Proyecto Formativo 2
divisores y columnas - fases Reporte de ejercicios químico analíticos del trabajo
GESTIÓN FORMATIVA (30%)
Gestión Áulica 1
estacionarias. Temperatura y Informe de análisis de realizado.
caudal. artículo El informe de exposición 30% 30%
Trabajo Colaborativo 40%
1
Cromatografía de gases. Informe de estudio de consistirá en la explicación de PRÁCTICA (30%)
GESTIÓN Trabajo Autónomo 1
Detectores de GC. Aplicaciones. caso la técnica instrumental objeto
Portafolio 1
Cromatografía de fluidos Informe de taller de estudio y su aplicación.ACREDITACIÓN Y VALIDACIÓN
supercríticos. Informe de exposición La respuesta al cuestionario(40%)
Examen 4
Prueba (cuestionario) constituye un tipo de lección
en la cual el estudiante
demostrará el nivel de los
conocimientos adquiridos
sobre la Unidad.

PLAN DE CLASE
EVALUACIÓN - SEGUNDO PARCIAL
GESTIÓN FORMATIVA GESTIÓN PRÁCTICA ACREDITACIÓN
PIS AÚLICO COLABORATIVOS AUTÓNOMOS L+PORTAFOLIO EVALUACIÓN
EXPOSICIÓN PREP
MANUAL BPM LECCIÓN ESCRITA VOCABULARIO (1) LECCIÓN ESCRITA EXAMEN TEÓRICO
MUESTRAS
TALLER ESPECTRO SELECCIÓN CONDIC
EJERCICIO FASE ESTAC. GC INFORMES PRÁCTICA EXAMEN PRÁCTICO
MASAS ANALITICAS
TALLER DETECTORES GC - LC

Universidad de Guayaquil
Métodos Cromatográficos.- Clasificación
• Ref. Skoog, D. A. (2008), Principios del Análisis Instrumental, Cengage Learning Editores, México
Universidad de Guayaquil
CROMATOGRAFÍA DE GASES
Introducción - GC
¿QUÉ ES LA CROMATOGRAFÍA DE GASES?
 LA CROMATOGRAFÍA ES LA SEPARACIÓN DE UNA MEZCLA DE
COMPUESTOS ( SOLUTOS ) EN COMPONENTES INDIVIDUALES PARA
FACILITAR LA IDENTIFICACIÓN ( DETERMINACIÓN CUALITATIVA ) Y LA
MEDICIÓN ( DETERMINACIÓN CUANTITATIVA ) DE CADA COMPONENTE .
• Las cromatografía de gases (GC) es una de las técnicas cromatográficas

disponibles y más adecuada para analizar entre el 10 y el 20% de los
compuestos conocidos.
• Para poder analizar un compuesto mediante cromatografía de gases, debe tener
un nivel suficiente de volatilidad y estabilidad térmica.
• Moléculas que se encuentran en la fase gaseosa o de vapor a una temperatura
400 °C o inferior, y no se descomponen a estas temperaturas, es probable que el
compuesto se pueda analizar mediante cromatografía de gases.
Referencia: Agilent, |https://www.agilent.com/cs/library/selectionguide/Public/5990-5488ES.pdf
Introducción - GC
FASE MÓVIL:
CROMATOGRAFÍA
La muestra a resolver + gas portador GAS-SÓLIDO O DE
(gas inerte para empujar la mezcla) ADSORCIÓN
FASE ESTACIONARIA: CROMATOGRAFÍA
Sólido, o líquido sobre soporte sólido DE GAS-LÍQUIDO
en donde ocurre fenómenos de O DE ABSORCIÓN
adsorción o absorción,
respectivamente

COMPUESTOS ANALIZABLES POR GC
Introducción - GC
¿QUÉ TIPO DE COMPUESTOS SON FACTIBLES DE ANÁLSIS POR GC?

 La estructura del compuesto, su peso molecular, volatilidad y características de
polaridad son indicadores de la factibilidad de análisis por GC para dicha
molécula.
• Compuestos con volatilidades muy bajas podrían no ser adecuados para el
análisis de GC, ya que no se vaporizan fácilmente.
• Cuanto mayor es el peso molecular o la polaridad de un compuesto, menor es
su volatilidad.
• Sin embargo, hay muchos compuestos con un alto punto de ebullición que
pueden ser analizados por GC.
• Un compuesto grande no polar puede ser más volátil que un pequeño
compuesto polar. Un grupo polar en una molécula grande tiene menor
influencia que un grupo polar en una molécula pequeña.
Introducción - GC

 Método de separación para analizar tanto compuestos
orgánicos que tienen un punto de ebullición por
debajo de los 300°C, así como gases. Ambos grupos
poseen presiones de vapor suficientemente altas como
para ser transportados en la fase móvil gaseosa.
Introducción - GC

 Lo que limita el uso de la GC no son las presiones de
vapor bajas, sino la descomposición. Los compuestos
pueden descomponerse en la columna a la
temperatura necesaria para obtener un cromatograma
en un tiempo razonable. La descomposición térmica
realizada antes de la GC puede ser útil en la
comparación de materias complejas como pinturas,
fracciones pesadas de petróleo o plásticos.
Introducción - GC

 La columna de GC puede enfriarse para efectuar la
separación de sustancias con puntos de ebullición
bajos, como el metano o H2. Para estas sustancias es
factible el análisis sin inconvenientes desde las
condiciones ambientales.
Introducción - GC

 Dado que GC requiere muestras volátiles, algunos
compuestos como azúcares, ácidos grasos,
aminoácidos deben ser derivatizados, es decir
transformar químicamente grupos químicos que
originan presiones de vapor bajas (puntos de ebullición
altos) en compuestos más volátiles. También se
justifica la derivatización para dar compuestos que
proporcionen una fuerte respuesta en el detector
elegido.
Análisis de ácidos grasos por GC
• Punto de ebullición ácido Oleico
360 °C
• Punto de ebullición de Oleato de metilo

206 °C
Introducción - GC
HIDROCARBUROS

Introducción - GC
NOMBRE ÁCIDO NÚMERO
ESTRUCTURA
ORGÁNICO LIPÍDICO
Ácido esteárico CH3(CH2)16COOH C18:0
Ácido oleico CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH C18:1
Ácido linoleico CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CH(CH2)7COOH C18:2
Ácido α-Linolénico CH3CH2CH=CHCH2CH=CHCH2CH=CH(CH2)7COOH C18:3
DERFIVATIZACIÓN:
TRANSESTERIFICACIÓN DE ÁCIDOS
GRASOS (FAMES)
Gas-liquid chromatographic analysis of soybean oil before and after

frying. Éster de ac. graso presenta menor pto. eb.
Introducción - GC

 Hidrocarburos con peso molecular del orden de 500 suelen
analizarse rutinariamente por GC. Incluso hidrocarburos con
mayor peso molecular pueden ser analizados bajo
condiciones adecuadas o específicas.
 La presencia de grupos funcionales polares como hidroxilos o
aminas disminuyen la volatilidad del compuesto. Por lo que,
algunas pequeñas moléculas de azúcares o ácidos aminos no
son fácilmente analizados por GC.
Introducción - GC

 Los compuestos inorgánicos no son factibles del análisis por
GC, puesto que los metales y sales no poseen la volatilidad
requerida.
 Muchos compuestos organometálicos tienen una volatilidad
suficiente debido al alto contenido de orgánico en su
molécula.
 Muchas biomoléculas o compuestos farmacéuticos presentan
termolabilidad y se degradan a las temperaturas aplicadas en
el análisis cromatográfico.
Introducción - GC
HIDROCARBUROS
HALOGENADOS
cloroformo
Hexaclorociclo
pentadieno
COMPONENTES DE GC
ESQUEMA DEL SISTEMA DE

CROMATOGRAAFÍA DE GASES
Cromatógrafo de Gases
Gas de arrastre
Automuestreador
Inyector
Detector
Columna
Cromatográfica
Sistema de
Análisis de Datos
MECÁNICA Y PROCEDIMIENTOS GENERALES DE

LA CROMATOGRAFÍA DE GASES
 Primer paso del proceso de GC es suministrar uno o

varios gases de alta pureza (gas portador) en el
cromatógrafo de gases. El gas portador fluye hacia el
interior del inyector, pasa por la columna y se introduce en
el detector.
 Se introduce una muestra en el inyector, la cual se
calienta normalmente hasta 150 - 250 °C, lo que tiene como
resultado la vaporización de los solutos volátiles de la
muestra.

 Estos solutos vaporizados se introducen posteriormente en la

columna mediante el gas portador y la columna se mantiene en un
horno con control de temperatura. Los solutos pasan por la columna
a velocidades variables, lo cual está determinado principalmente
por sus propiedades físicas y por la temperatura y composición de la
columna.

 El soluto más rápido sale (se eluye) de la columna en primer lugar,

seguido de los solutos restantes en el orden correspondiente. A
medida que se eluye cada soluto, se introduce en el detector
calentado, donde se genera una señal electrónica basada en la
interacción del soluto con el detector.
 El tamaño de la señal se registra en un sistema de datos (software)

y se representa gráficamente según el tiempo transcurrido para
generar un cromatograma.
FACTORES QUE INTERVIENEN EN LA

SEPARACIÓN
 LA DISTRIBUCIÓN DE MOLÉCULAS DEL COMPUESTO DEPENDE DE LA FASE ESTACIONARIA, DEL
COMPUESTO Y LA TEMPERATURA DE LA COLUMNA.
 Estos tres factores influyen directamente en el nivel de separación de picos.
 Otros factores como dimensiones de la columna y el gas portador tienen un efecto indirecto
sobre la separación.
FASE Los compuestos se distribuyen en la fase estacionaria, alcanzando una disolución

mayor en un tipo de fase que en otra. Esta distribución diferente conlleva la
ESTACIONARIA obtención de retenciones diferentes en cada fase estacionara.
ESTRUCTURA
DEL
COMPUESTO
TEMPERATURA
DE LA
COLUMNA

SEPARACIÓN
FASE
ESTACIONARIA
ESTRUCTURA Las moléculas se distribuyen en una proporción diferente en la misma fase

estacionaria. Diferentes compuestos tienen diferentes solubilidades en la misma
DEL fase estacionaria; según ello se obtiene la separación entre picos. Si dos
COMPUESTO compuestos tienen la misma distribución en la fase estacionaria, pueden coeluir.
TEMPERATURA
DE LA
COLUMNA

SEPARACIÓN
FASE
ESTACIONARIA
ESTRUCTURA
DEL
COMPUESTO
TEMPERATURA A temperatura más alta de la columna, hay menos moléculas en la fase estacionaria
y más en la fase móvil. A menor número de moléculas en la fase estacionaria, se
DE LA produce la migración más rápida del compuesto con tiempos de retención más
COLUMNA cortos. Y tiempos de retención más largos a bajas temperaturas.
GAS PORTADOR E INYECCION DE LA MUESTRA
GAS PORTADOR
GAS PORTADOR O
FASE MÓVIL GAS DE ARRASTRE
• Debe ser químicamente inerte para evitar interacciones

• Debe ser capaz de minimizar la difusión gaseosa
• Fácilmente disponible y de alta pureza (99,999%)
• Económico
• Adecuado al detector a utilizar
GAS PORTADOR
 El sistema del gas portador contiene a menudo un tamiz
molecular para eliminar el agua (humedad) y otras
impurezas (O2 y compuestos orgánicos).
 Se requieren reguladores de presión, manómetros y
medidores de flujo para controlar la corriente del gas.
 Las presiones de entrada oscilan entre 10 y 50 psi, lo
que ocasiona flujos aprox de 20 a 100 mL/min con
columnas empacadas y de 0,5 a 10 mL/min en columnas
capilares. Los flujos serán constantes si la presión de
entrada permanece constante.
 Cromatógrafos de gases modernos disponen de
medidores de flujo electrónicos que se pueden regular
para mantener el flujo en un nivel deseado.
GAS PORTADOR  Hidrógeno

 Helio
 Nitrógeno
 Argón
Características mas importantes de
gases de arrastres:
 masa molar, densidad, viscosidad
• Los gases H2, He y N2 dan alturas de plato

óptimas a caudales significativamente
diferentes.
• Aunque el N2 requiere caudales relativamente
bajos para conseguir los mejores resultados,
el rendimiento del H2 apenas baja a caudales
altos.
• El H2 y el He dan mejor resolución que el N2 a
CURVA DE VAN DEEMTER caudales altos, porque los solutos se difunden
más rápidamente en H2 y en He que en N2.
QUÉ GAS PORTADOR USAR?

COLUMNAS EMPACADAS
COLUMNAS CAPILARES
El HELIO, gas portador más
El helio, el nitrógeno, y el argón comúnmente empleado porque es
pueden usarse como gases inerte y no inflamable. Posee
portadores de columna propiedades físicas que permiten
empacada. una GC de alta resolución,
programada con temperatura.
El nitrógeno tiene la ventaja de
ser menos caro que los dos gases El HIDRÓGENO es inflamable, pero
nobles. su alta dispersión permite
velocidades lineales más rápidas y
El argón se puede emplear en los análisis más cortos con la misma
gases de análisis para el contenido eficiencia de separación que la del
de hidrógeno y helio por helio. Los análisis más cortos se
detección de conductividad traducen en costos más bajos por
térmica. muestra.
Las mezclas argón/metano han Aunque no se recomienda el uso de
sido usadas como el gas portador NITRÓGENO en los GC de
para el GC isotérmico con capilaridad programada con
detección por captura de temperatura, se trata de un gas más
electrones. fácilmente disponible a un costo
menor que los antes descritos.
QUÉ GAS PORTADOR USAR?
EFECTO DEL GAS PORTADOR SOBRE EL TIEMPO DE RESOLUCIÓN Y DE ANÁLISIS

INYECTOR
 En GC, los líquidos se inyectan mediante
una jeringa, a través de un disco (septo)
de goma, en un inyector caliente que
contiene un tubo de vidrio silanizado.
 La cámara del inyector está casi siempre
a unos 50°C por encima del punto de
ebullición del componente menos volátil
de la muestra.
 El volumen de muestra liquida que se
inyecta suele ser de 0,1-2 mL.
 En sistema de GC con columna capilar se
emplea un sistema divisor de la muestra
que permite introducir una pequeña
fracción conocida de la muestra
inyectada y el resto se desecha (1:50 a
1:500).
 Inyección con y sin división, e inyección
en columna.
INYECTOR
JERINGAS PARA GC
HORNO DE LA COLUMNA
CROMATOGRÁFICA
Esquema que representa el diseño de horno para columna de cromatografía de gases.

Temperaturas de trabajo habituales: desde temperatura ambiente hasta 450°C
EFECTO DE LA
TEMPERATURA
Efecto de la temperatura en los

cromatogramas de gases: a) isotérmica a
45°C, b) isotérmica a 145°C, c) programada de
30°C a 180°C
EFECTO DE LA
TEMPERATURA
PROGRAMACIÓN DE TEMPERATURA:
• 1. Display the Status / Settings / Oven Screen.
• 2. Enter the starting conditions—Initial temperature (50°C) and Initial time (2 min).
• 3. Enter the rate (10°C/min) at which the oven temperature is to increase.
• 4. Enter the Final temperature and Final time (150°C for 5 min).
COLUMNAS CROMATOGRÁFICAS
 La columna es un elemento fundamental de un GC

para la separación de los componentes de una
mezcla. (Los demás accesorios serán los apropiados
para dirigir dicha separación).
 Una columna para GC está formada por un tubo
que puede ser de diferentes materiales (cobre,
acero inoxidable, vidrio, sílice, etc.) dentro del cual
se dispone la fase estacionaria.
 La fase estacionaria puede ser un sólido que puede
estar sencillamente rellenando la columna o bien
dispuesto en forma de recubrimiento, sobre otro
sólido que hará de soporte.
 La fase estacionaria más frecuente es un líquido
que se encuentra dispuesto sobre un sólido
portador. En este caso el sólido portador puede ser
un relleno (columna empacada) o bien la propia
pared, en su cara interior de un tubo más o menos
capilar (columnas de tubo abierto).
COLUMNAS CROMAOTGRÁFICAS
C. Empacadas o de De pared recubierta

Relleno (WCOT)
COLUMNAS PARA
CROMATOGRAFÍA
DE GASES
C. Tubulares De soporte
Abiertas o Capilares recubierto (SCOT)
De capa porosa
 WCOT: Wall Coated Open Tubular
(PLOT)
 SCOT: Support Coated Open Tubular
 PLOT: Porous Layer Open Tubular
COLUMNAS C APILARES
COLUMNA TUBULAR COLUMNA TUBULARES

COLUMNA TUBULAR
ABIERTA DE PARED ABIERTAS RECUBIERTAS
ABIERTA DE CAPA
RECUBIERTA (WCOT), la DE SOPORTE (SCOT), la
POROSA (PLOT), la
pared interior de la fase estacionaria
pared interior está
columna está líquida recubre un
recubierta de una
recubierta de una soporte sólido unido
fase estacionaria
fase estacionaria a la pared interior de
sólida.
líquida. la columna.
• COLUMNAS TUBULARES O CAPILARES • COLUMNAS EMPACADAS
COMPARADAS CON LAS COLUMNAS EMPACADAS, LAS COLUMNAS CAPILARES SE CARACTERIZAN POR:
 Mayor resolución
 Más rapidez de análisis
 Mayor sensibilidad
 Menor capacidad de muestra
COLUMNAS EMPACADAS
• Las columnas empacadas contienen un soporte sólido fino

recubierto de una fase estacionaria líquida no volátil, o el sólido
mismo es la fase estacionaria.
• A pesar de una menor resolución, las columnas empacadas son
útiles para separaciones preparativas en las que se precisa una
gran cantidad de fase estacionaria o para separar gases que no
son muy retenidos.
Rubinson, K. A., Rubinson, J.F. (2001), Análisis Instrumental, Pearson Educación, Madrid-España.
COLUMNAS EMPACADAS
• Las columnas son de acero inoxidable, cobre, incluso níquel o

vidrio, y sus dimensiones típicas son 3-6 mm de diámetro y 1-5
m de longitud.
• El soporte sólido frecuentemente son tierras diatomeas que se
silanizan para reducir los puentes de enlace de hidrógeno con
compuestos polares.
• El tamaño de las partículas se expresa en micrómetros o en
tamaño de malla (indica el tamaño de malla a través del cual
deja pasar las partículas).
SOPORTES SÓLIDOS:
• Alúmina
• Gel de sílice
• Carbono, grafito
• Zeolitas
• Polímeros orgánicos porosos
PROPIEDADES Y CARACTERÍSTICAS DE LAS COLUMNAS PARA CROMATOGRAFÍA DE GASES
Tipo de columna
PLOT WCOT SCOT Empacada
Longitud (m) 10-100 10-100 10-100 1-5
Diámetro interno (mm) 0.1-0.53 0.25-0.75 0.5 3-6
Diámetro de partícula (um) - - - 120-185
Eficacia (N) 25000-200000 25000-200000 25000-200000 1000-5000
Capacidad total (ug) 0.05-5 0.05-5 0.05-5 100
Presión relativa Baja Baja Baja Alta

Caudal (mL/min) 5-10 0.5-5 0.5-5 20-100
Nombre comercial Temp máx
Fase estacionaria Polaridad Aplicaciones comunes
o común (°C)
De uso general, hidrocarburos
• Polidimetilsiloxano X-1, OV-1, SE-30 350 NO POLAR aromáticos, esteroides, bifenilos
policlorados
• Fenil-
Alcaloides, fármacos, compuestos
polidimetilsiloxano X-5, OV-3, SE-52 350 NO POLAR
halogenados
5%
• Fenil-
POLARIDAD Fármacos, esteroides, pesticidas,
polidimetilsiloxano X-17, OV-17 250
MEDIA glicoles
50%
• Trifluoropropil- Aromáticos clorados,
POLARIDAD
polidimetilsiloxano, X-210, OV-210 200
MEDIA
nitroaromáticos, bencenos
50% alquilsustituidos
X-WAX, Carbowax Ácidos libres, alcoholes, éteres,

• Polietilenglicol 20M
250 POLAR
aceites esecnciales, glicoles
• Cianopropil-
ALTAMENTE Ácidos grasos poliinsaturados,
polidimetilsiloxano X-23, OV-275 240
POLAR ácidos libres, alcoholes
50% Skoog, D. A. (2008), Principios del Análisis Instrumental, Cengage Learning Editores, México
STATIONARY PHASE FOR WALL COATED OPEN TUBULAR (WCOT) COLUMNS
Structure of side
Stationary Equivalent
chains of the poly- Polarity Applications
phase packed column
siloxane
Solvents, petroleum pro-ducts,
volatile organic com-pounds,
X-1 OV-101, SE-30 100% methyl Non-polar
environmental con-taminants,
amines, drugs
PAHs, perfume components,
5% phenyl, 95% me-
X-5 SE-54 Non-polar environmental contaminants,
thyl
drugs,
14% Cyanopropyl, 86% Moderately Pesticides, alcohols, phenols,
X-1701, X-10 OV-1701
methyl, 50% phenyl polar esters, ketones
Moderately Drugs esters, ketones, plas-

X-17 OV-17 50% phenyl
polar ticizers, organochlor com-pounds
Selective for compounds with
50% trifluoropropyl, free electron pairs, ste-roids,
X-200, X-210 OV-210 Polar
50% methyl esters, ketones, drugs, alcohols,
freons
Alcohols, methylesters of fatty
X-WAX Carbowax 20M polyethyleneglycol Polar acids, solvents, fatty acids,
amines
N O P O L AR P O L A R IDA D M ED I A POLAR
100% 50% PHENYL-50% DIMETHYL 50% CYANOPROPYL-50%

DIMETHYLPOLYSILOXANE POLYSILOXANE METHYLPOLYSILOXANE
• Las fases no polares son más estables y cromatográficamente robusta que las
fases polares que tienden a tener una tolerancia a la temperatura más baja y
son más susceptibles al daño oxidativo, si se introduce aire en la columna.
• FASE ESTACIONARIA
• DIÁMETRO INTERNO DE LA
COLUMNA
SELECCIÓN DE • ESPESOR DE PELÍCULA
• LONGITUD DE LA COLUMNA
LA COLUMNA:
 Se recomienda uso de Pre-Columnas

Columna
empacada
inyección
Comparación de un mismo
componente
Columna
capilar
inyección TIEMPO
Separación por cromatografía de gases de un aceite esencial utilizando una columna empacada de
2 mm de diámetro x 15 m de longitud, y una columna capilar de 0.25 mm de diámetro y 30 m de
longitud; usando ambas como fase estacionaria Carbowax 20 M.
DETECTORES
DETECTORES
UNIVERSALES:
ofrecen la ventaja SELECTIVOS:
de responder responden
prácticamente únicamente
ante cualquier frente a un grupo
compuesto que limitado de
puede eluir de la compuestos
columna.
DETECTORES
RESPUESTA SELECTIVA Y
SENSIBILIDAD ALTA CONFIABILIDAD Y ALTAMENTE PREDECIBLE
ADECUADA MANEJO SENCILLO PARA CADA TIPO DE
SOLUTO
TIEMPO DE RESPUESTA
BUENA ESTABILIDAD Y NO DEBE DESTRUIR LA
CORTO, INDEPENDIENTE
REPRODUCIBILIDAD MUESTRA
DE LA TASA DE FLUJO
Los detectores son sensibles a los

INTERVALO DE cambios de temp.
RESPUESTA LINEAL PARA TEMPERATURAS: Requieren de aplicación de temp
LOS SOLUTOS AMBIENTE HASTA LA para evitar efectos de
MENOS 400°C contaminación, perdida de señal y
desviación del rango de linealidad
DETECTORES
DETECTORES CARACTERÍSTICOS DE CROMATOGRAFÍA DE GASES
TIPO MUESTRAS APLICABLES LÍMITE DE DETECCIÓN
• Ionización por llama (FID) Hidrocarburos 1 pg/s
• Conductividad térmica (TCD) Detector universidad 500 pg/mL
• Captura de electrones (ECD) Compuestos halogenados 5 fg/s

• Espectrómetro de masas Sintonizable para cualquier
0.25 a 100 pg
(MS) especie
• Infrarrojo de transformada
Compuestos orgánicos 0.2 a 40 ng
de Fourier (FTIR)
Compuestos de nitrógeno, y
• Termoiónico 0.1 pg/s (P), 1 pg/s (N)
de fósforo
DETECTORES
SENSIBILIDAD DE LOS DETECTORES DE GC
TCD
FID
ECD
NPD (N)
NPD (P)
FPD (S)
FPD (P)
MS (SIM) MS (SCAN)
10-15g 10-12g 10-9g 10-6g 10-3g
DETECTOR DE IONIZACIÓN POR LLAMA (FID)

EL DETECTOR FID RESPONDE A LA CANTIDAD DE ÁTOMOS
DE CARBONO QUE ENTRA EN EL DETECTOR POR UNIDAD
DE TIEMPO, POR LO QUE ES MÁS UN DETECTOR SENSIBLE
 Responde rápidamente a los componentesA LA MASAque
QUEcontienen carbono
UN DISPOSITIVO e
SENSIBLE A LA
hidrógeno. CONCENTRACIÓN.
EL NÚMERO DE IONES QUE SE PRODUCE ES
 Es insensible al agua, aire y a la mayoría de los gases
RELATIVAMENTE portadores.AL NÚMERO DE
PROPORCIONAL
 Los gases empleados deben estar ÁTOMOS
libresDE
deCARBONO
impurezasQUE
de SE REDUCEN EN LA LLAMA.
hidrocarburos
 La comprobación de la presencia de vapor de agua es el mejor método para
comprobar el encendido de la llama.
 El funcionamiento correcto depende de la elección adecuada de gas
portador, H2 y aire.
 Los iones se recogen en un electrodo y producen una pequeña corriente.
LA MUESTRA ES QUEMADA EN UNA MEZCLA RICA EN

COMBUSTIBLE, PRODUCIENDO ASÍ IONES.
IONES O ELECTRONES GENERADOS SE RECOGEN EN UN

ELECTRODO Y PRODUCE UNA PEQUEÑA CORRIENTE.
LA CORRIENTE SE CONVIERTE EN UN VOLTAJE, SE

AMPLIFICA PARA DAR UNA SEÑAL.
 La corriente resultante (~10-12 A) se mide con un

picoamperímetro de alta impedancia
Grupos funcionales como carbonilo, alcohol, halógeno y amina, originan

pocos iones en la llama. Y el detector es insensible a los gases no
combustibles como H2, CO2, SO2, CO, gases nobles, NO2.
Estas propiedades hacen del detector de ionización por llama uno de los que
más se utiliza para el análisis de la mayoría de compuestos orgánicos.
El detector FID presenta elevada sensibilidad, un gran intervalo de respuesta

lineal (~107) y bajo ruido.
Las desventajas de este detector son la destrucción de la muestra durante el

paso de la combustión y la necesidad de gases adicionales y controladores.

APLICACIONES
Cromatograma de una mezcla de alcoholes obtenido con una columna empaquetada (2 mm d.i.
y 76 cm longitud) de Carbowax 20 M al 20% sobre soporte Gas-Chrom R con detector FID

APLICACIONES
Picos máximos de identificación y cuantificación de cannabinoides de GC-FID


APLICACIONES
DETECTOR CONDUCTIVIDAD TÉRMICA (TCD)
 MIDE LA CONDUCTIVIDAD TÉRMICA ENTRE DOS

GASES.
 Este dispositivo contiene una fuente que se
calienta mediante electricidad, y cuya
temperatura a una potencia eléctrica constante
depende de la conductividad térmica del gas
circundante.
 El elemento calentado puede ser un hilo fino de
platino, oro o tungsteno.
 La resistencia eléctrica de este elemento
depende de la conductividad térmica del gas.
 Por lo general se usan detectores gemelos. Los
elementos del detector se denominan “muestra
y referencia”.
Esquema de las celdas de

muestra y de referencia del TCD
Consiste en 4 filamentos: 2 están inmersos en una corriente de gas de

referencia; y los otros 2 se sumergen en la corriente de gas eluido.
Con un flujo constante de gas portador puro a través de los filamentos,

se tiene una transferencia de calor constante desde los filamentos hacia
el gas.
La sensibilidad incrementa a medida que la diferencia de temperatura

entre le filamento y la pared del detector incrementa.
Ventajas del TCD: Sencillez, amplio intervalo dinámico lineal (~105), respuesta general
tanto a especies orgánicas como a inorgánicas y su carácter no destructivo.
La limitación principal es su sensibilidad relativamente baja, lo que imposibilita su uso con

columnas capilares si las cantidades de muestra son muy pequeñas.
Las conductividades térmicas del helio y del hidrógeno son de alrededor de 6 a 10 veces
mayores que las de la mayoría de los compuestos orgánicos.
La detección es menos satisfactoria con gases portadores cuyas conductividades térmicas

son muy parecidas a las de la mayoría de los compuestos de la muestra.
Es una técnica utilizada para analizar gases inorgánicos (argón, nitrógeno, hidrógeno,
dióxido de carbono, etc.) y pequeñas moléculas de hidrocarburos. Determinación de
contaminantes en el aire. Separación y cuantificación de gases nobles

APLICACIONES

APLICACIONES
If a big separation of CO and N2 is desired then a micropacked column with a TCD is shown below:
2 meter 1mm ID SS column packed with MS 5A 80/100 mesh is shown below: oven 70Â°C,
11cc/min. Helium carrier 100ÂµL loop HP6890 ÂµTCD
DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES (ECD)
• EL detector ECD, ha llegado a ser uno de los más ampliamente

utilizados para el análisis de muestras ambientales porque es
sensible a compuestos orgánicos que contienen halógenos, como
plaguicidas, bifenilos policlorados.
• El detector es sensible, selectivo y presentan la ventaja de no
destruir completamente la muestra. Presenta pequeño intervalo
de respuesta lineal.
• Emplea nitrógeno o, argón como gas portador con un 5 % de
metano.
• Insensible a grupos aminos, alcoholes e hidrocarburos. Una
aplicación importante es la determinación de insecticidas clorados.

• EL ELUYENTE DE LA MUESTRA
PROCEDENTE DE LA COLUMNA PASA
POR UN EMISOR B RADIACTIVO, CASI
SIEMPRE DE Ni63.
Deshecho
• UN ELECTRÓN DEL EMISOR PROVOCA LA
Columna
IONIZACIÓN DEL GAS PORTADOR, CON
FRECUENCIA NITRÓGENO, Y LA
PRODUCCIÓN DE UNA RÁFAGA DE
ELECTRONES, QUE IONIZA LOS
COMPONENTES DE ANÁLISIS.
• AL APLICAR UNA DIFERENCIA DE
POTENCIAL SE CREA UNA CORRIENTE
ELÉCTRICA QUE CONSTITUYE LA SEÑAL.
• EN PRESENCIA DE COMPUESTOS
ORGÁNICOS LA CORRIENTE DISMINUYE
POR SU TENDENCIA A CAPTAR
ELECTRONES
• Se debe tener cuidado de no saturar el
detector

APLICACIONES
DETECTOR DE NITRÓGENO FÓSFORO (NPD)

• La cromatografía de gases-detector de nitrógeno-
fósforo o GC-NPD, también conocido como Detector
termoiónico específico o TSD, es una técnica
empleada para analizar el nitrógeno o el fósforo que
contienen compuestos orgánicos.
• Una perla de rubidio se ubica arriba del jet, la cual
es electrónicamente calentada de 600 a 800°C.
• Un plasma se genera en la zona de la perla por la
adición de H2 y aire.
• Los compuestos con N o P reaccionan en la nube
gaseosa alrededor de la superficie de la perla
produciendo iones específicos.
• Una pequeña corriente es producida por el
movimiento de estos iones desde el plasma hasta el
colector. Esta corriente es medida como la señal que
se genera en el detector.
• La introducción de compuestos que contienen N o P
resulta en su ionización y en un incremento de la
corriente del detector por encima del nivel de fondo
(línea de base).
La eficiencia de ionización del NPD es El NPD es extremadamente sensible a

cerca de 10.000 veces mayor o mejor las impurezas de hidrocarburo (en gas
que la del FID. Sin embargo la H2 y aire de la llama), pudiendo
respuesta para N es 10 veces menor aumentar el ruido de línea base y
que para la de P. reducir la sensibilidad del detector
Temperaturas de 275 a 325°C son

La selectividad y sensibilidad del NPD
propias para el NPD. Altas
es muy dependiente del rango de flujo
temperaturas ayudan a estabilizar el
de H2, el flujo de aire es menos crítico.
sistema de detección.
El He es el gas portador habitual

El Nitrógeno también puede ser
porque proporciona una mejor
utilizado como gas portador,
sensibilidad. Flujos bajos generan
proporcionando adecuada estabilidad
pobres formas de pico y mala
al sistema de NPD.
sensibilidad.

APLICACIONES
GC-NPD Chromatogram of (a) standard solution of 17 pesticides (0.5 mg/L). (b) spiked mango sample
(0.10 mg/kg) and (c) blank mango sample
BIBLIOGRAFÍA
• Libros
 Harris, D. (2001), Análisis Químico Cuantitativo, Editorial Reverté S.A.,
Barcelona-España.
 Rubinson, K. A., Rubinson, J.F. (2001), Análisis Instrumental, Pearson
Educación, Madrid-España.
 Skoog, D. A. (2008), Principios del Análisis Instrumental, Cengage Learning
Editores, México
DRA. TATIANA ZAMORA ZAMORA

A - 3 - Métodos Cromatograficos - Cromatografia de Gases

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Capacidad total (ug) 0.05-5 0.05-5 0.05-5 100

Presión relativa Baja Baja Baja Alta

X-WAX, Carbowax Ácidos libres, alcoholes, éteres,

Moderately Drugs esters, ketones, plas-

100% 50% PHENYL-50% DIMETHYL 50% CYANOPROPYL-50%

 Se recomienda uso de Pre-Columnas

Los detectores son sensibles a los

DETECTORES CARACTERÍSTICOS DE CROMATOGRAFÍA DE GASES

TIPO MUESTRAS APLICABLES LÍMITE DE DETECCIÓN

• Ionización por llama (FID) Hidrocarburos 1 pg/s

• Conductividad térmica (TCD) Detector universidad 500 pg/mL

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DETECTOR DE IONIZACIÓN POR LLAMA (FID)

DETECTOR DE IONIZACIÓN POR LLAMA (FID)

LA MUESTRA ES QUEMADA EN UNA MEZCLA RICA EN