CONSERVACION IN VITRO DE

GERMOPLASMA VEGETAL

ALUMNO: GARCIA BARRIOS, Mic

 LA CONSERVACIÓN IN VITRO
Se encarga de cultivar y procrear germoplasma genéticamente
determinado, en condiciones especificas de laboratorio con el fin de lograr
la producción en masa de una especie en riesgo o altamente necesaria.

En particular, los avances alcanzados en el cultivo in vitro en diferentes

especies vegetales dieron la posibilidad de desarrollar nuevas alternativa para
la conservación ex situ, al permitir disponer de suficientes individuos en
períodos de tiempo relativamente cortos y facilitar la manipulación del material
vegetal al ser plantas con un desarrollo fisiológico homogéneo.
IMPORTANCIA DE LA CONSERVACIÓN IN
VITRO DE GERMOPLASMA VEGETAL

La conservación in vitro constituye parte esencial de la estrategia

general para la conservación y el intercambio de recursos fitogenéticos a
nivel mundial. La misma ofrece la posibilidad de almacenar un elevado
número y variedad de muestras en un área reducida y facilita el acceso a
ellas para su evaluación.
Sus condiciones asépticas garantizan mayor sanidad de las muestras
y en consecuencia permiten incrementar el intercambio de materiales
vegetales sanos. Sin embargo, para establecer cualquier estrategia de
conservación in vitro, se hace indispensable el dominio de una metodología
de propagación que garantice altos porcentajes de supervivencia.
- PROTOCOLO DE CULTIVOS DE TEJIDOS

 Método acorto plazo

En este tipo de conservación los
ex plantes permanecen por
máximo 6 meses en cultivo in
vitro, tiempo en el cual se
retrasa el crecimiento y se
disminuyen los intervalos de
subcultivo, mediante
reducción en la temperatura.
 Método de crecimiento mínimo
Este método constituye una de las
principales variantes que puede
garantizar el éxito de un programa de
conservación, debido a que es
relativamente sencillo y puede ser
establecido con facilidad con el
equipamiento que normalmente existe
en un laboratorio de cultivo de tejidos.
la
 Método de crio conservación
 Método a largo plazo
Para conservar a largo plazo se
Esta técnica permite almacenar
emplea la crio conservación
semillas, meristemos, ápices,
(almacenamiento en nitrógeno
polen, callos y suspensiones
líquido a -196 ºC), ya que se detienen
celulares, considerándose una
todos los procesos metabólicos y la
herramienta útil para evitar
división celular, además, el material
variaciones soma clónales en
vegetal crio conservado se puede
plantas con propagación vegetativa
preservar en espacios reducidos, en
y permitiendo la conservación de
condiciones seguras, sin variabilidad
ex plantes por tiempo de
genética y sin grandes costos de
almacenamiento indefinido
mantenimiento
 VENTAJAS:

 Obtención de material libre de patógenos

 Tasas de multiplicación altas
 Suministro constante de plantas a los productores
 Bajo costo en la producción
 Condiciones de almacenamiento
 Mantenimiento de la fidelidad genética del - Envase - Presión parcial de
material oxigeno
- Luz - Temperatura
 Conserva muchas especies en poco
 Reduce el crecimiento del ex plante modificando
el medio de cultivo espacio
Facilita el intercambio de germoplasma
- Potencial osmótico
- Inhibidores de crecimiento
- Nutrientes
DESVENTAJAS:

 Perdida de material genético por contaminaciones

 Dependencia de mano de obra calificada
 Y que el material puede destruirse en caso de un
siniestro
 - MEDIO DE CULTIVO
Es necesario preparar el medio utilizando agua destilada. Se debe evitar el
almacenamiento prolongado del medio para evitar la acumulación de
contaminantes; todas las sustancias químicas usadas para su preparación deben
ser de un alto grado de pureza.

El procedimiento para la preparación de los medios dependerá, en primera

instancia, del tipo de medio, de su consistencia y de la presencia de componentes
termolábiles. En general, se puede distinguir:
a. Medios semisólidos sin sustancias termolábiles; su preparación consta
de los siguientes pasos:
1) Incorporación del medio basal (MB), de los reguladores de
crecimiento o de otros compuestos. Ajuste del pH.
2) Adición y disolución del agar. Distribución en los recipientes de
cultivo (tubos de ensayo, cajas Petri, etc.).
3) Esterilización en el autoclave.

b. Medios líquidos con o sin sustancias termolábiles. Para su preparación

se sigue el mismo procedimiento de a., pero sin adicionar agar, y haciendo
la esterilización por filtración en el caso de medios que contengan
sustancias termolábiles.
c. Medios semisólidos con una o más sustancias termolábiles; para su
preparación se sugieren las siguientes operaciones:
1) Incorporación de los compuestos que pueden ser esterilizados en el
autoclave (tanto los del MB como los reguladores de crecimiento u otros
compuestos). Ajuste del pH.
2) Adición y disolución del agar.
3) Esterilización en el autoclave.
4) Incorporación (operando la cámara de transferencia) de las sustancias
termolábiles, previamente esterilizadas por filtración. Los componentes
esterilizados se deben mantener a una temperatura entre 40 y 50 °C.
5) Distribución (operando en la cámara de transferencia) del medio en los
recipientes de cultivo (tubos de ensayo, cajas Petri, etc.) previamente
esterilizados en el autoclave.
 EQUIPOS E
INSTRUMENTOS
Para el desarrollo de conservación de cultivos vegetales se requieren de materiales que
permitan la preparación de fórmulas nutritivas con el objetivo de cultivar tejidos,
órganos y células vegetales in vitro.

1. Instrumentos: 2. Equipos:
- Tubos de ensayo - Filtro seitz
- Matraz Erlenmeyer - Hornos para secado
- Cajas de Petri - Cámara de flujo laminar
- Botellas para cultivos - Autoclave
- Botellas para reactivos y soluciones - Refrigeradora y congeladora
- Probetas graduadas - Balanzas
- Matraz aforado - Medidores de pH
- Goteros - Destiladores
- Vasijas de vidrio - Agitador magnético
- Jeringas dispensadoras
REACTIVOS Y EQUIPOS

• Reactivos: • Materiales:
• Carbohidratos • Materiales de vidrio
• Ácido abcisico (ABA) • Bisturí
• Cloruro de magnesio • Tijeras
• Gelificante tés • Recipiente de cristal
• Giberelina • Mechero
• Auxina
• Agitares
• Citoquinina
• Pinzas
• Agar
• Guantes
CONCLUSIÓN
La aplicación de diferentes métodos de conservación in vitro se ha
convertido en una alternativa para la preservación de material vegetal
con fines investigativos, para la propagación masiva de plantas e
intercambio de germoplasma y han permitido el fomento y desarrollo
de bancos de germoplasma in vitro que han tributado a la comunidad
científica y al mantenimiento de una importante biodiversidad.