Professional Documents
Culture Documents
(PENGEMBANGAN GALUR)
TEKNOLOGI FERMENTASI
Substrat
Metabolit
Mikroorganisme Primer & Sekunder
Pengembangan Galur
Adaptasi yang Waktu
tinggi fermentasi
dengan proses lebih singkat Tidak
fermentasi membentuk
busa
Tingkat TUJUAN
Tingkat
produksi lebih PENGEMBANGAN konsumsi
tinggi
GALUR oksigen lebih
rendah
1.Sel
2.Asam nukleat :
1. DNA (Deoxirybo Nuclei Acid)
2. RNA (Rybo Nuclei Acid)
SEL
Sel merupakan unit terkecil dalam organisme
hidup, baik dalam dunia tumbuhan maupun
hewan.
Sel terbagi menjadi 2 macam :
a. Eukariot
b. Prokariot
c. Archea
Struktur sel
Asam Nukleat
Nukleoprotein
Nukleotida
Asam fosfat
DNA
Purin : Adenin (A), Guanin (G)
Pirimidin : Timin (T), Sitosin (C)
RNA
Purin : Adenin (A), Guanin (G)
Pirimidin : Urasil (U), Sitosin (C)
Perbedaan DNA & RNA
RNA
DNA • Bagian pentosa DNA
• Bagian pentosa DNA adalah ribosa
adalah deoksiribosa • Bentuk single stranded
(untai tunggal yang terlipat
• Bentuk molekul DNA sehingga menyerupai heliks
adalah double ganda
stranded / double • Urutan basa yang berbeda
heliks (heliks ganda) (A dan U, G dan C)
• Urutan basa yang • Jumlah guanin pada
molekul RNA tidak perlu
berbeda (A dan T, G sama dengan Cytosin,
dan C) demikian pula Urasil tidak
perlu sama dengan Adenin
Transkripsi
• Pembuatan RNA dengan menyalin basa DNA
(ekspresi genetik)
• Perubahan basa Timin menjadi Urasil
• Berlangsung dalam mitokondria
• RNA terbagi menjadi 3 bagian, yaitu
tRNA,rRNA dan mRNA
Translasi
• Proses sintesis polipeptida dari mRNA
• Translasi melibatkan ribosom sebagai tempat
penggabungan asam amino-asam amino menjadi
polipeptida
• tRNA sebagai pembawa asam amino ke ribosom
dan "penerjemah" sandi genetika mRNA
• Antibiotika dapat menghambat atau
menghentikan proses translasi pada biosintesis
protein; contohnya antibiotika anisomycin,
cycloheximide, chloramphenicol, dan tetracycline.
ISTILAH
Mutasi
Mutan
Mutagen
MUTASI GENETIK
R P O S DNA
represor
RNA
polimerase
represor
Mekanisme induksi enzim (terdapat inducer)
R P O S DNA
Transkripsi
RNA
polimerase
Translasi
represor
Represor Enzim
inactive
inducer
Mekanisme feed back represion (tanpa co represor)
R P O S DNA
Transkripsi
RNA
polimerase
Translasi
aporepresor
Enzim
Mekanisme feed back represion (terdapat co represor)
R P O S DNA
represor
RNA Corepresor
polimerase
aporepresor
corepresor
Rekayasa Genetik Mikroba Tak Terarah
untuk Kegiatan Industri
– Dapat dilakukan melalui mutasi menggunakan
agensia mutagenik atau radiasi UV
• Contoh: Pengembangan Penicillium penghasil penicillin
yang tinggi
– Dapat dilakukan melalui fusi protoplas antar jasad
yang secara filogenetik berjauhan hubungannya;
sering digunakan pada rekayasa genetik khamir
(yeasts) dan jamur
– Rekayasa genetik alami
• Menumbuhkan mikroba dalam keadaan marginal
(“stressful”) dan menapis (selecting) galur mikroba baru
dengan kemampuan tumbuh yang lebih baik pada
keadaan tersebut.
• Muncul karena mutasi spontan.
Rekayasa Genetik Mikroba Terarah
untuk Kegiatan Industri
Melalui penyisipan potongan DNA yang
mengandung gen menggunakan teknologi
rekombinasi DNA untuk menghasilkan
produk protein tertentu.
DNA hasil rekombinasi dapat dipindahkan
ke dalam jasad yang lain untuk
menghasilkan sifat yang dikehendaki di
jasad tersebut.
Gen harus bisa diekspresikan.
Pengendalian Ekspresi Gen
– Melalui modifikasi pada daerah pengatur
transkripsi (transcriptional regulation),
memfusikan protein, dan menghilangkan
daerah pengatur umpan balik (feedback
regulation controls)
• Cara ini merupakan bagian dari pengendalian
jalur metabolisme untuk mengendalikan atau
meningkatkan produksi suatu bahan.
Vektor Ekspresi
Vektor yang memiliki promoter untuk
dapat melakukan transkripsi suatu gen
dalam suatu spesies yang dikehendaki.
DNA Rekombinan
• Kombinasi DNA yang berasal dari dua
organisme yang berbeda
– Bakteri dan manusia
– Bakteri dan tanaman
– Virus dan manusia
Bakteri Inang untuk Ekspresi Protein
• E. coli
– Informasi genetiknya sudah sangat dipahami
– Kemampuannya dalam fermentasi telah
sangat dipahami
– Tumbuh cepat dan tidak banyak persyaratan
– Dapat menerima berbagai vektor, mudah
ditransformasi,
– Protein intraseluler,
– Produksi protein rendah
Bakteri Inang untuk Ekspresi Protein
• Bacillus
– Informasi genetiknya sudah sangat dipahami
– Kemampuannya dalam fermentasi telah
sangat dipahami
– Tumbuh sangat cepat dan tidak banyak
persyaratan
– Produksi protein tinggi
– Sulit ditransformasi
– Protein intraseluler
– Pilihan vektor terbatas
Bakteri Inang untuk Ekspresi Protein
• Streptomyces
– Kemampuannya dalam fermentasi telah
sangat dipahami
– Informasi genetiknya sudah dipahami
– Tidak banyak persyaratan untuk tumbuh
– Produksi protein tinggi
– Protein ektraseluler
– Tumbuh lambat
– Sulit ditransformasi
– Pilihan vektor terbatas
Khamir Inang untuk Ekspresi Protein
• Saccharomyces
– Kemampuannya dalam fermentasi telah
sangat dipahami
– Informasi genetiknya sudah dipahami
– Tidak banyak persyaratan untuk tumbuh
– Tumbuh cepat
– Produksi protein tinggi
– Protein ektraseluler
– Sulit ditransformasi
– Pilihan vektor terbatas
Jamur Inang untuk Ekspresi Protein
• Trichoderma
– Tidak banyak persyaratan untuk tumbuh
– Produksi protein tinggi
– Protein ektraseluler
– Kemampuannya dalam fermentasi belum
banyak dipahami
– Sulit ditransformasi
– Tumbuh lambat
– Pilihan vektor terbatas
DNA Rekombinan
• Kombinasi DNA yang berasal dari dua
organisme yang berbeda
– Bakteri dan manusia
– Bakteri dan tanaman
– Virus dan manusia
Penggunaan Mikroba Rekombinan
control
Industri Keju:
• Industri keju memerlukan rennet, enzim protease yang
diperoleh dari lambung anak sapi yang masih
menyusu dan belum makan rumput.
• Pada tahun 1960 FAO memprediksi akan adanya
kekurangan rennet karena kebutuhan daging dunia
mendorong peternak untuk memelihara sapinya
hingga dewasa. Usaha untuk mencari enzim protease
pengganti rennet dimulai.
• Chymosin (rennet hasil rekayasa genetika) dihasilkan
pada awal tahun 1980an dari mikroba (Escherichia
coli, Kluyveromyces lactis dan Aspergillus niger) yang
direkayasa.
• Chymosin telah mengalami pengujian yang ketat
untuk menjamin keamanan penggunaannya.
Industri Keju:
• Chymosin memiliki sifat dan fungsi yang sama
dengan rennet yang diperoleh dari anak sapi. Enzim
ini dapat digunakan untuk menghasilkan keju yang
kualitasnya sama dengan keju yang dihasilkan
menggunakan rennet dari anak sapi yang lebih baik
daripada jika menggunakan rennet dari jamur atau
hewan selain sapi.
• Chymosin pertama kali digunakan untuk pembuatan
keju pada tahun 1988. Pada saat ini hampir 90%
rennet dihasilkan dari khamir terekayasa.
• Penggunaan Chymosin didukung oleh kelompok
vegetarian dan kelompok agama yang menolak
konsumsi bagian tubuh sapi.
Penggunaan Mikroba Rekombinan
(1C)
• Produksi protein komersial
– Protein pengobatan
• Insulin untuk pengobatan diabetes
• Interferon-gamma untuk pengobatan kanker
• Faktor VIII untuk pengobatan hemofili
• Erythropoetin untuk pencairan gumpalan
darah