ANALISIS ASAM DOMOIC PADA KERANG DENGAN

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

Restiana Widya R (K100140030)

 PENDAHULUAN
Pada akhir tahun 1987, terjadi wabah penyakit ASP yang sangat
serius yang disebabkan karena pengonsumsian kerang biru yang berasal dari
Estern Prince Edward Island, Kanada. ASP (Amnesic Shellfish Poisoning)
merupakan suatu wabah yang disebabkan karena mengalami keracunan
terhadap kerang-kerang yang dapat berakibat hilangnya memori jangka
pendek atau amnesia. Seorang agen telah mengindetifikasi kandungan dari
kerang-kerang tersebut yaitu terdapat Asam Domoic yaitu suatu asam amino
alami yang langka (Wright et al, 1989;. Quilliam dan Wright, 1989).
Dalam studi ini, kami telah meneliti TLC (KLT) sebagai metode
untuk mendeteksi adanya Asam Domoic dalam jaringan kerang. Proses
ekstraksi yang selektif dan prosedur pembersihan telah dikembangkan serta
diterapkann pada penentuan Asam Domoic di kerang
 PENELITIAN
ALAT BAHAN
o Fase diamnya : Silika o Fase gerak : Butanol :
Gel f254 Air : Asam Asetat
o Blender (3:1:1)
o Vakum o Metanol

o Tabung Volumetri o Aquadest

o Sampel : jaringan
kerang
 METODE KERJA
• Satu bagian jaringan dicampur dengan 4 bagian metanol 50
% dan dihomogenkan menggunakan blender selama 3-5
1. menit.

• Disiapkan vakum, ambil jaringan yang sudah di

homogenkan dan dimasukkan ke dalam vakum biarkan zat
cair mengalir pada tabung volumetri. Tunggu sampe
2. jaringan benar-benar kering.

• Ekstrak yang sudah kering kemudian diupakan dan

dilarutkan dalam volume kecil metanol air (75:25). Ekstrak
ini dianalisis dalam waktu satu hari dan dilihat apakah
3. asam domoic dapat terurai pada larutan asam.
 HASIL DAN PEMBAHASAN
 Analisis Asam Domoic Pada Kerang Menggunakan KLT

Dalam penelitian ini paling cocok digunakan metode

kromatografi lapis tipis dengan fase terbalik (octadecylsilica) untuk
menganalisis Asam Domoic. Selain beban dapat berkurang,
pemisahan dapat dicapai dengan normal. Pada fase terbalik
kromatografi lapis tipis dapat melengkapi pemisahan yang dicapai
oleh kromatografi cair, sehingga dapat memberikan sebuah metode
konfirmasi yang berguna untuk pengukuran kromatografi cair.
 Metode Dalam Analisis Asam Domoic Pada Kerang
Dengan KLT
Pada metode ekstraksi untuk mempercepat uji coba dilakukan proses
homogenitas jaringan 50% metanol berair yang telah dikembangkan untuk
digunakan pada uji coba kromatografi cair. Metode ini dapat memberikan
pemulihan yang baik pada Asam Domoic sampai tingkat rendah.
Dikembangkan lagi suatu metode baru yaitu metode pembersihan SAX
(Strong anion exchange). Pada metode ini mempunyai selektifitas tinggi terhadap
Asam Domoic, sehingga dapat menghilangkan beberapa gangguan dan dinilai
sangat efektif untuk jaringan kerang. Metode ini telah berhasil diterapkan untuk
untuk kerang, pisau cukur kerang, dan ikan teri yang sudah terkontaminasi dengan
Asam Domoic.
SKEMA PROSEDUR METODE EKSTRAKSI
SKEMA PROSEDUR PEMBERSIHAN SAX
 KESIMPULAN
Dapat dibuktikan bahwa Asam Domoic bisa dianalisis secara
semi-kuantitatif menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis dan
dapat terdeteksi bisa turun 10 mg pada jaringan kerang. Pada prosedur
KLT terbukti cepat dan sederhana serta tidak memerlukan peralatan
yang mahal. Ada dua metode yang digunakan pada KLT yaitu metode
ekstraksi dan metode pembersihan. Dalam metode tersebut harus
membuktikan bahwa skrining dapat berguna pada jaringan kerang.
Metode tersebut harus berguna juga untuk metode konfirmasi kimia
terhadap asam domoic pada sampel yang diuji positif seperti metode
immunoassay.
 DAFTAR PUSTAKA
Michael A. Quilliam,Krista Thomas and Jeffrey L. C. Wright.1998.
Analysis of Domoic Acid in Shellfish by Thin-layer Chromatography.
TERIMAKASIH