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Facultad de Ciencia e Ingeniería

en Alimentos
Ingeniería en Bioquímica

Integrantes: Vascones Ricardo,


Villacis Saul
TEMA:

“ANÁLISIS DE ADN
MITOCONDRIAL EN UNA
MUESTRA DE RESTOS ÓSEOS
PRECOLOMBINOS DE NORTE
DE SANTANDER, COLOMBIA
(ÁREA CULTURAL
CHITARERA)”
Conocimientos preliminares

ADN mitocondrial • Pequeña cadena de ADN circular, heredado por la madre, se


encuentra en las mitocondrias donde sintetiza proteínas
(ADNmt) encargadas de la producción de energía.

• En genética poblacional, los haplogrupos del cromosoma Y


humano (ADN-Y) están determinados por las diferencias en
haplogrupos el ADN que permiten trazar la línea de descendencia patrilineal
humana.

región • Es una ubicación en el bucle D del ADN mitocondrial en el que


los pares de bases de nucleótidos tienen sustituciones. Los
hipervariable uno cambios o repeticiones en la región hipervariable son
(HVRI) altamente polimórficos.
Los principales
haplogrupos ADN-
Y y su relación
filogenética.
Objetivo.
• Caracterizar la composición
genética de la comunidad
precolombina Chitarera de
Norte de Santander, a partir
del análisis del ADN
mitocondrial en la región
hipervariable I (HVRI) y
establecer sus posibles
relaciones biológicas con otras
poblaciones para así contribuir
al conocimiento de sus
posibles orígenes.
Materiales y método.
Precauciones de contaminación
Población de estudio para el análisis de ADN Extracción de ADN

lavadas con
Limpieza y extracción de la etanol al 70 % por cinco
parte externa del hueso hipoclorito al 5 % por diez minutos
minutos

exposición a luz ultravioleta


70 % por cinco minutos Dos gramos de pulverizado de
por cada uno de los lados
hueso
durante 15 minutos.
Incubado a 56 °C durante 18 horas en una solución de
Purificación del ADN se empleo el kit
15 mL que contenía EDTA 0.5M, N-Lauryl-Sarcosyl al 1 %,
Qiaquick PCR Purification
y proteinasa-K (20 mg/mL).

Sobrenadante se transfiere a
Centrifuga a 4000 rpm de 1,5 mL que contienen
filtros Amicon y se centrifuga
durante cinco min. 1,250 μL de buffer PB
a 4000 rpm
Alícuotas de 720 μL se se añaden 720μL de
El ADN se eluye
centrifugan en filtros buffer PE al filtro y se
mediante la adición de
QIAquick a 14000 rpm centrifugan a 14000 rpm
buffer EB
por min por un min.

Los aislados de ADN


fueron cuantificados Para la reacción de PCR
empleando el equipo fueron empleados de 3
Qubit® 2.0 Fluorometer a 7 ng de ADN.
de Invitrogen
Análisis del ADN mitocondrial

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