Ada beberapa alasan utama terjadinya penyerapan latar belakang pada spektrofotometri, yaitu adanya molekul terdisosiasi dan partikel kecil yang menghamburkan cahaya secara broadband, sehingga menutupi penyerapan atom analit. Masalah ini diatasi dengan mengukur dan mengurangi penyerapan latar belakang agar diperoleh komponen penyerapan atom yang benar. Beberapa teknik koreksi meliputi pengukuran dengan dan tanpa
Ada beberapa alasan utama terjadinya penyerapan latar belakang pada spektrofotometri, yaitu adanya molekul terdisosiasi dan partikel kecil yang menghamburkan cahaya secara broadband, sehingga menutupi penyerapan atom analit. Masalah ini diatasi dengan mengukur dan mengurangi penyerapan latar belakang agar diperoleh komponen penyerapan atom yang benar. Beberapa teknik koreksi meliputi pengukuran dengan dan tanpa
Ada beberapa alasan utama terjadinya penyerapan latar belakang pada spektrofotometri, yaitu adanya molekul terdisosiasi dan partikel kecil yang menghamburkan cahaya secara broadband, sehingga menutupi penyerapan atom analit. Masalah ini diatasi dengan mengukur dan mengurangi penyerapan latar belakang agar diperoleh komponen penyerapan atom yang benar. Beberapa teknik koreksi meliputi pengukuran dengan dan tanpa
yaitu adanya molekul terdisosiasi matriks yang memiliki spektrum penyerapan broadband atau memiliki kapasitas transmisi yang besar dalam frekuensi yang luas, dan partikel padat kecil pada api yang dapat menghamburkan cahaya melalui daerah panjang gelombang yang luas.
Ketika absorpsi jenis non-spesifik ini tumpang tindih
dengan penyerapan atom, panjang gelombang dari penyerapan analit dasar terpotong. Masalah diatas diatasi dengan mengukur dan mengurangi penyerapan latar belakang dari total penyerapan, diukur untuk menentukan komponen penyerapan atom yang benar. Latar Belakang Koreksi Absorbansi Spektrofotometri
• Nol dan 100% batas transmittan diatur oleh operator
• Nilai nol tidak ada sumber cahaya • Nilai 100% kekuatan radiasi ke sensor ketika kuvet diisi pelarut murni Latar Belakang Koreksi Absorbansi Khas Prosedur FIA
• Pembawa (carrier) dan larutan reagen terus dipompa sehingga
detektor sesuai dengan reagen kosong •Absorbansi membaca sinyal sampel yang ditentukan dari tinggi dan daerah puncak Latar Belakang Koreksi Absorbansi Koreksi untuk latar belakang sampel • Menjalankan sampel 2x, sekali dalam ketiadaan dan sekali dengan reagen kromogenik •Menyuntikkan volume sampel dengan sangat besar • Deteksi multi-panjang gelombang dimana memiliki syarat : - Adsorptivitas latar belakang yaitu sama dikedua panjang gelombang - Sampel tidak mengandung senyawa berwarna selain analit • Pendekatan berbeda untuk koreksi latar belakang adalah dengan metode stopped-flow, di mana pompa sementara berhenti ketika zona sampel baru mencapai sel detektor. • Respon sinyal sebelum menghentikan aliran merupakan absorbansi latar belakang ditambah produk berwarna yang terbentuk dari titik injeksi sampai sampel mencapai sel detektor • Dalam FIA, baseline terus menerus diperoleh mewakili sinyal latar belakang