Latar Belakang

Elektroforesi gel merupakan salah satu teknik utama dalam

biologi molekular. Prinsip dasar teknik ini adalah bahwa DNA, RNA,
atau protein dapat dipisahkan oleh medan listrik. Dalam hal ini, molekul-
molekul tersebut dipisahkan berdasarkan laju perpindahannya oleh
gaya gerak listrik di dalam matriks gel. Laju perpindahan tersebut
bergantung pada ukuran molekul bersangkutan.

Elektroforesis gel biasanya dilakukan untuk tujuan analisis,

namun dapat pula digunakan sebagai teknik preparatif untuk
memurnikan molekul sebelum digunakan dalam metode-metode lain
seperti spektrometer massa, PCR, kloning, sekuensing DNA, atau
immuno-blotting yang merupakan metode-metode karakterisasi lebih
lanjut
 Elektroforesis memiliki prinsip kerja memanfaatkan
muatan listrik yang ada pada DNA yang bermuatan negatif. DNA
yang dialiri arus listrik dari satu kutub ke kutub yang berlawanan
muatannya, maka molekul tersebut akan bergerak dari kutub
negatif ke kutub positif (Yuwono 2005).
Hasil uji DNA yang baik dengan elektroforesis ditunjukkan
dengan pita DNA yang tebal dan tampak sedikit atau tidak ada
smear jika divisualisasikan di atas sinar UV (Sauer et al. 1998).

Tujuan Praktikum
Bertujuan untuk menentukan metode elektroforesis
dan dapat membuat gel agarose dan dapat mengetahui
prinsip elektoforesis.
 Bahan dan Metode
Bahan dan alat
Alat : - Chamberwell
- Hotplate
- Sisir Chamberwell
- Micropipet
- Kamera/ Handphone
- Gel Document
- Alat Tulis
Bahan : - Agarose
- ETBr
- Ladder
- TAE
- Master Mix
Prosedur Praktikum
- Ditimbang agar dengan konsentrasi 1,3%= 1,3X80=104/100=1,04 g
- Dimasukkan TAE dan dilarutkan agar dihotplate selama 1 jam
- Didinginkan/dikecilkan dan dimasukkan ETBr 14l selama 5 menit
- Dipanaskan kembali hingga homogen,setelah homogen masukkan
agarose ke chamberwell
- Diletakkan sisir chamberwell pada agar yang telah diletakkan di
chamberwell
- Ditunggu sampai mengeras/membeku ±1 jam
- Diatur 70 volt 450 Ma, 11 watt, 1 jam
- Ditunggu selama 1 jam dan pengaliran listrik berhenti
- Dibuka tekan wl pada geldoc lalu buka geldoc dan bersihkan meja
sampel dengan menggunakan tisu yang dibasahi alkohol
- Diletakkan agar pada meja geldoc lalu ditutup geldoc dan tekan wl
kembali
- Ditekan UV dan liat hasil pada Komputer