Departamento de Engenharia Química e

Engenharia de Alimentos

Engenharia Bioquímica

Cinética Microbiana

Paulo Duarte Filho

Maio/2006
 Hidrólise

Glicose Piruvato Produtos de Fermentação

( lactato, álcoois, ácidos, etc.)

8 ATP 6 ATP

30 ATP
Ciclo de Krebs
Respiração Anaeróbia
(CO2, SO42- , NO3-)

CO2 O2
Respiração Aeróbia

Figura 1: Esquema simplificado de processos aeróbios e anaeróbios

• Processos aeróbios: oxigênio como aceptor
final de elétrons;
• Processos anaeróbios:

• Fermentativos: Utilizam produtos da degradação

do substrato.
• Anóxicos: Utilizam compostos inorgânicos.

Rendimento Energético

Processos aeróbios > Processos anaeróbios

 Estudo Cinético

Processo obedece ao princípio de conservação da matéria

A Ca H b Oc + B O2 + D N 4HO H→ E Cα H β Oγ N δ + F C 2O+ G H2O

SubstratoFonte de Nitrogênio

Elementos minerais:
Fósforo, enxofre,
cobre, cácio, etc.

Síntese Manutenção
 Métodos para avaliação de
crescimento de microrganismos

Fisiologia do microrganismo!

Métodos Diretos

• Determinação da concentração celular

• Contagem no microscópio;
• Contagens com cultura;
• Contagem eletrônica.

Não se aplicam a
m.o. filamentosos
Figura 2: Contagem em Câmara de Neubauer
Figura 3: Contagem de Células Viáveis em placas
• Determinação da biomassa microbiana

• Matéria seca;
• Medidas óticas.

Figura 4: Separação de células por filtração

 Métodos Indiretos

• Constituintes celulares (ATP, DNA, NADH);

• Dosagem de elementos do meio de cultura
(substrato, consumo de O2 , propriedades
reológicas do meio de cultura, entre outros.
 Processo Fermentativo

Microrganismo Nutrientes

Preparo do meio
Preparo do
inóculo
Esterilização do meio

Fermentador Controles

Produto
Esterilização Recuperação
Ar do ar do produto
Resíduo

Tratamento de
efluente

Figura 5: Etapas de um processo fermentativo

Obtenção de uma curva de crescimento para
um M.O.

Figura 6: Processo para obtenção de uma curva de crescimento

 Curva de crescimento

Condições favoráveis ao microrganismo

Figura 7: Curva típica de crescimento bacteriano

 • Fase lag

• Rearranjo do sistema enzimático (síntese de enzimas);

• Traumas físicos (choque térmico, radiação, entre outros);
• Traumas químicos (produtos tóxicos, meio de cultura).

Não há variação da concentração de biomassa no

tempo, portanto:

X = cte = Xo
Xo = concentração celular no tempo t =0

• Fase intermediária

• Aumento gradativo da concentração celular

 • Fase log ou exponencial

• Células plenamente adaptadas;

• Velocidades de crescimento elevadas;
• Consumo de substrato;
• Interesse prático.

• Fase de redução de velocidade

• Diminuição da concentração de substrato limitante;

• Acúmulo de produto(s) no meio

• Fase estacionária
• Término do substrato limitante;
• Acúmulo de produtos tóxicos;
• Concentração celular constante em seu valor máximo.
 • Fase de declínio

• Redução do crescimento celular;

• Consumo de material intracelular (lise).

 Não só para a concentração celular se

dispõe de gráficos, mas também para o
consumo de substrato e formação de
produto.
 Biomassa
Concentração (g/L)

Produto

Substrato

Tempo de Cultivo (h)

Figura 8: Curvas de biomassa, substrato e produto

 Dispondo de um conjunto de dados
experimentais de X, S e P em função do
tempo tem-se:

dx ds dp
µx = ; µs = − ; µ p =
dt dt dt

Crescimento Consumo Formação

Não são os melhores parâmetros para se

avaliar o estado em que se encontram o sistema.
 Velocidades específicas:
1 dX
• Crescimento: µ=
X dt

1 dS
• Consumo de substrato: µs = −
X dt

1 dP
• Formação de produto: µp =
X dt
Distribuindo os dados da fase exponencial
em coordenadas semilogarítmicas, tem-se:

d ln( X ) 1 dX
= =µ
dt X dt
 Como essa fase tem a distribuição de uma
reta a velocidade específica de crescimento é
constante e máxima.

log X − log X 0i = µ m (t − t i )
X0i = Concentração celular no instante de início da fase
exponencial

Rearranjando a equação anterior:

µ m ( t −ti )
X = X 0i e
Ou, re-escrevendo de outra forma, tem-se:

ln X = ln X 0i + µ m t
 Assim, pode-se obter o tempo de
duplicação da biomassa, onde X=2X0i :
ln 2
Tdup =
µm
Fator de conversão de
substrato a células

X − X0
YX / S =
S0 − S

X0= Concentração celular inicial

X= Concentração celular no instante t
S0= Concentração inicial do substrato
S= Concentração residual do substrato no instante t.
 Este parâmetro é importante para a
determinação de X em cultivo de fungos
filamentosos e em processos de tratamento
de efluentes.

O fator de conversão pode ser obtido

também através de:

µ
YX / S =
µS
Coeficiente de Manutenção
µ
µ S = mS +
Y 'X / S
Velocidade específica de consumo de substrato
para manutenção da viabilidade celular
 Produtividade

XF − X0
P=
TF
X0= Biomassa inicial;

XF= Biomassa final;

TF= Tempo total de cultivo.

Exercícios
1. Candida utilis cresce em glicerol com
velocidade específica de crescimento
máxima de 0,095 h-1 . Qual o tempo
necessário para esse microrganismo
duplicar a sua massa na fase exponencial
de crescimento de um processo batelada?
 2. Qual a diferença entre respiração e
fermentação?
3. Quais os principais elementos químicos
de que é composta a célula?
4. Cite exemplos práticos de aplicação
industrial de leveduras, bactérias e mofos.
5. Quais os principais substratos utilizados
na indústria para processos fermentativos?
6. Em uma fermentação batelada a volume
constante foram obtidos os seguintes dados
experimentais:
T(h) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

X(g/L) 1 1.1 1.6 2.5 3.8 5.9 7 7.9 8.5 8.5 9.3 9.6 9.3 9.5

Pede-se:
• Identificar as diversas fases de crescimento do
microrganismo;
• O tempo que o microrganismo leva para
duplicar a sua massa na fase exponencial de
crescimento;
• A produtividade máxima em células que pode
ser obtida desse processo