FACULTAD

DE CIENCIAS

QUMICAS DEPT. DE QUMICA ANALTICA

Uno de los instrumentos principales de biologa celular es el espectrofotmetro Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica, (de un largo de onda particular) a travs de una muestra , y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra .

Esto se debe a que cada sustancia tiene un arreglo de tomos tridimensionales particular que hace cada sustancia tenga caractersticas nicas. Al ser expuestos a la luz del espectrofotmetro, algunos electrones de los tomos que forman las molculas absorben energa entrando a un estado alterado.

Al recuperar su estado las original, la enrga absorbida es emitida en forma de fotones. Esta emisin de fotones es distinta para cada sustancia , generando un patrn particular, que varia con el largo de onda usado. Dependindo del largo de onda, ser la cantidad de energa absorbida por la sustancia

Lo que genera un espectro particular. La concentracin de proporcional a la (A). Ley de Beer. A=ebc . A=absorbancia, e =coeficiente de extincin molar, b= la distancia en que viaja la luz en la muestra (nomalmente en 1 cm). La ecuacin describe una lnea recta, donde su origen es cero. Si se conoce el valor de b podemos calcular la (c )

1 se selecciona la longitud de onda de 350nm 2. se calibra a 0%deT y 100% de T 3. Se coloca la solucin y se mide la aborbancia. 4. se cambia la longitud de onda en 110 nm. 5 se vuelve a calibrar con el blanco (agua destilada a (0%T y 10% T)

6. Se mide nuevamente la absorbanccia 7 . Se toman mediciones cada 10 nm. Hasta llegar a 350 nm.

BIBLIOGRAFA HTTP://WWW.UPRM. EDUC/BIOLOGY/PROFS/VELEZ/EQUIPOS HTMA MANUAL DE PRCTICAS DE ANLISIS INSTRUMENTAL FARMACUTICO. B.U.A.P

Si en una solucin se encuentran presentes varias especies producen absorcin en una misma regin del espectro electromagntico. Es posible disear un prosedimiento siempre y cuando las seales de respuestas sean independientes entre s y que la absorbancia de la solucin sea simplemente la suma de las absorbancias individuales de las especies responsables de la misma Am=eaba+eb(b)e

Representa la absorcin de una solucin que contiene dos epecies absorbentes. Se preparan dos soluciones patrn de de las especies que producen la absorcin de la muestra Am=emb(a)r Am =ebb(b)p Am/Anp = (abbp/Anf) (b)/(b)p+(a)/(a)p

1. se elecciona la longitud de onda de 350nm. 2. se calibra a 0%T y a 100%T 3.Se coloca y se mide la absrobancia se 5. secambia la longitud de onda. 6. se vuele a calibrar 0Ty 100T 7. se mide nuevamente la absorbancia Se toman mediciones de 10 en 10 nm hasta 750nm.

EN UNA MEDIDA DE COLOR QUE CONFIEREN AL

AGUA LOS MATERIALES CONTAMINANTE PARA SU MEDICIN SE UTILIZA LA ESCALA DE HAZEN.

UNIDADES DE COLOR DE HAZEN (UPC). 150, 100, 70, 50, 40, 30,20, 10, 5, 0

Se determina mediante colorimetra ptico- visual de la coloracin amarillenta de agua frente a patrones de platino-cobalto simuldos segn Hazen. 1.1. Determinacin apararente de la coloracin del agua. Orientar el envase abierto de tal modo que los tubo se encuentren a mano izquierda. Si no se indica otra cosa. Llenar el tubo interior hasta la marca on la muestra de agua a medir. e