REINOS DE LOS SERES VIVOS y

LOS GRUPOS MICROBIANOS.

LOS GRUPOS MICROBIANOS

BACTERIA HONGO PARASITO

REINO MONERA. REINO FUNGI REINO ANIMAL REINO PROTISTA NO PERTENECE A NINGUN REINO.

VIRUS

REINO ANIMAL

DEFINICIN: Seres vivos con estructuras desarrolladas y diferenciadas para: moverse, alimentarse de manera hetertrofa y reproducirse con diferenciacin de sexos.

REINO FUNGI

Definicin: Seres vivos unicelulares o pluricelulares, con mltiples posibilidades para la reproduccin mayormente de tipo asexual. Su alimentacin principalmente hetertrofa. No tienen estructuras especializadas para moverse. No tienen clorofila.

REINO MONERA

Definicin: Seres unicelulares, que poseen material gentico disperso en el citoplasma (no tiene membrana nuclear). Se dividen por fisin binaria. Son hetertrofas (la mayora de importancia mdica). Cuando se mueven lo hacen mediante flagelos. Se nutren por absorcin.

Caractersticas que se emplean para clasificar a los seres vivos.

Por el tipo de estructuras que emplean para moverse. Tipo de reproduccin. (Sexual o asexual). Tipo de alimentacin. (auttrofo o hetertrofo). Si poseen clorofila. Tipo de pared.

HISTORIA NATURAL DE LA ENFERMEDAD

La historia natural de la Enfermedad, es la secuencia de evidencias (claras o crpticas) como se manifiesta la enfermedad en el paciente. Tambin se acostumbra sealar en ella las manifestaciones de la inmunidad y las diversas formas de diagnstico.

Perodo de incubacin (en enfermedades Infecto-Contagiosas)

Tiempo que transcurre entre el momento de la infeccin y la aparicin de los primeros signos y sntomas (sndrome).

Perodo de Enfermedad

Lapso de tiempo en el que se presentan y permanecen las alteraciones fisiolgicas, histolgicas, y otras propias del dao manifiesto.

Periodo de Resolucin

Tiempo que tarda en desaparecer la enfermedad ya sea por mejora o por el deceso del paciente.

Periodo de Resolucin
Resolucin

Enfermedad

Infeccin

Tiempo

Transmisibilidad

Es un perodo en el cual la persona infectada o enferma puede contagiar a otros seres vivos. Es muy variable y segn la enfermedad puede suceder desde que la persona este infectada y no presente manifestaciones, hasta que ya no tenga datos de la enfermedad pero siga contagiando (infectando).

Inmunidad

La aparicin de los elementos de la respuesta inmune que sirven para proteger y marcar el estado (en tiempo) de la infeccin.

Diagnstico

Datos por los cuales el mdico con ayuda del Laboratorio Clnico y/o Gabinete u otros, conoce la causalidad de la enfermedad. En las enfermedades Infecto-Contagiosas el Laboratorio de Microbiologa, Inmunologa y actualmente el de Biologa Molecular son bsicos.

Diagnstico
Inmunidad Resolucin Diagnstico Enfermedad Infeccin

Diagnstico

El mdico y el microbilogo deben conocer los mtodos diagnsticos para cada etapa de una enfermedad, en especial las InfectoContagiosas.

NOMENCLATURA PARA LAS BACTERIAS

QUIM. EDUARDO AGUIRRE LANGLE

SEROTIPO O SEROVAR

Caracterstica de las bacterias que depende de sus antgenos y su identificacin depende del uso de anticuerpos especficos

QUIM. EDUARDO AGUIRRE LANGLE

BIOTIPO O BIOVAR

Caracterstica de las bacterias que depende del metabolismo y se pone en evidencia mediante las pruebas bioqumica

QUIM. EDUARDO AGUIRRE LANGLE

GENOTIPO

Caracterstica de la bacteria que se denota despus que se estudia su cido nucleico.

QUIM. EDUARDO AGUIRRE LANGLE

Niveles Taxmicos empleados en Bacteriologa Clnica.

Reino Orden Clase Familia Tribu

Gnero Especie Biotipo Resistotipo

QUIM. EDUARDO AGUIRRE LANGLE

LA PATOGENICIDAD BACTERIANA

Qum.. Eduardo Aguirre Langle

La patogenicidad bacteriana es la potencialidad que poseen las bacterias de causar dao en su husped. La virulencia es la medida de ese dao

De donde se desprende que patogenicidad y virulencia no sean trminos sinnimos

LA ADHERENCIA

El primer mecanismo es la colonizacin. Es un fenmeno donde una bacteria a travs de sus ligando encuentra su receptor coexistiendo ambos (simbiosis)

Las estructuras bacterianas que actan como ligandos pueden ser:

Pilis Fimbrias Otras estructuras de pared y/o glucoclix

CELULA

BACTERIA

Este fenmeno explica la especificidad de la infeccin

Ejemplos La tosferina es una enfermedad de vas respiratorias altas porque en ese sitio hay receptores para la bacteria El clera es una enfermedad que acontece en el intestino delgado donde el enterocito tiene receptores para la bacteria.

La infeccin en sitios de piel quemados es frecuentemente causada por PS. AERUGINOSA porque: nuestras piel intacta no presenta receptores para la bacteria; pero si en los tejidos subyacentes expuestos

La patogenicidad bacteriana puede producirse por:

ACCION DIRECTA

ACCION A DISTANCIA

AFECTANDO LA RESPUESTA INMUNE

PATOGENICIDAD POR ACCION DIRECTA

PERMANECIENDO EN EL SITIO DE INFECCION ELUDIENDO LAS BARRERAS DEFENSIVAS CAPSULA SLIME-LAYER/GLICOCALIX

Mcf

Se evita la adherencia y formacin del fagolisosoma Se evitan los mecanismos enzimticos dependientes de o2 del Mcf

ACCION DIRECTA

LIBERACION DE ENZIMAS Hialuronidasa Estreptocinasa DNAsa Elastasas Coagulasa Fosfolipasas

ACCION A DISTANCIA

TOXINAS BACTERIANAS

ENDO

Es el lpido A presente en la pared GN Es una protena intrabacteriana puede estar en GN y GP

EXO

LAS EXOTOXINAS

Actan verdaderamente como una enzima.

EXOTOXINAS MAS CONOCIDAS

BACTERIA COLERICA DIFTERICA TETANICA BOTULIMICA V. CHOLERAE C. DIPHTERIAE C. TETANI C. BOTILINUM ACCION AMPc aumentado Inhibe el FE 2 Bloquean la accin del inhibidor del acetilcolina Bloquea la liberacin acetilcolina AMPc aumentado AMPc aumentado Vasoconstriccin Ciliostasis PS. AERUGINOSA B. ANTHRACIS Inhibe el FE2

PERTUSIGENA
S1 ADciclasa DERMONECROTIC A CITOTOXINA EXOTOXINA A TOXINA DEL EDEMA TOXINA LETAL

B. PETURSSIS

MECANISMOS BACTERIANOS QUE ALTERAN LA RESPUESTA INMUNE S pyogenes

Fiche reumtica glomrulonefritis RIH

SP

Mcf

c. Presentadora de Ag

RIC ALTERADA

Carditis, corea de Sydenham, eritema nodoso poliartritis

MYCOPLASMA
Enfermedades crnicas
(reumtica inflamatoria) A travs de la activacin policlonal de LC, T y B

IL6
LCT citotxico Macrfagos y monocitos IL1 IL2

M. ARTHRITIDIS

CAMPYLOBACTER JEJUNI
Sndrome de Guillain Barr (enfermedad paraltica aguda del sistema nervioso perifrico)

Causa desconocida

Se cree en una sobre- presentacion del Ag O 19 de CJ Algunos epitopos de ganglisidos cruzan con antigenos el tejido nervioso

Toxinologa Bacteriana

Las toxinas bacterianas son el mecanismo de dao ms estudiado de estos microorganismos

Se reconocen 2 tipos de toxinas bacterianas

Endotoxinas
Exotoxinas

Bacteria Gram Negativa

Peptidoglicana
Membrana

Pared
Membrana externa

Citoplsmica

Lpido A

Carbohidrato central

Carbohidrato Especfico O

Endotoxina

Antgeno O

Tipos de pared en las bacterias

M. Citoplsmica

Peptido Glicano

Pared

Pptido Glicano

M. Externa

Las exotoxinas son protenas producidas por algunas bacterias tanto Gram positivas como Gram negativas
Ej:
Clostridium tetani (GP) produce la toxina tetnica Vibrio cholerae (GN) produce el colergeno o toxina colrica No todos las bacterias producen exotoxinas

Diferencias entre toxinas bacterianas

Sntesis Presentes en Composicin Accin Farmacolgica Exotoxinas Endotoxinas Algunas bacterias Todas los GN GN Y GP Glicoproteicas Lipdica Muy especfica Inespecfica cada una tiene Todos Tienen una actividad la misma actividad particular

Ejemplos de toxinas y enfermedades

Corynebacterium diphteriae Bacillus anthracis Clostridium tetani Vibrio cholerae Escherichia coli E.col E.coli GP GP GP GN GN GN GN T.diftrica T. antreica ntrax T. tetnica T. colrica Cotermolbil T termoestable Citofoxina Difteria

Ttanos Clera Diarrea Diarrea Diarrea Sndrome urmico hemoltico

Bordetella pertussis

GN

Pertusgeno Tosferina

TOXOIDE
Es la misma molcula de exotoxina pero que ha sido manipulada qumicamente para perder la porcin txica conservando la antigenicidad

Antitoxina
Es un anticuerpo dirigido contra una exotoxina bacteriana. Generalmente producidos en animales o tambin en forma monoclonal.

Concepto de Infeccin y enfermedad. La Historia Natural de la Enfermedad. Mecanismos de Virulencia de las Bacterias.

Interacciones en una Enfermedad Infecciosa

Husped

Patgeno

Ambiente

Enfermedad

Ejemplos:
Dengue: No se presenta en comunidades que vivan a ms de 1700 m. sobre el nivel del mar.

Tifoidea Solo el hombre es el husped susceptible.

El clera porcino no afecta al hombre

Patogenicidad:
Capacidad de un microbio de causar enfermedad

Virulencia:
Medida de la patogenicidad

Husped

Microbio

Control de Calidad en los Reactivos de Bacteriologa Clnica.

Oxidasa:
Cepas: Control positivo Control negativo mbar Refrigeracin si est impregnado en papel Congelacin si esta en solucin

Frasco: Ambiente:

Catalasa:
H2 O2 + H2 O2 Cepas: Control positivo Control negativo Frasco: mbar de vidrio Ambiente: Refrigeracin 2H2O + O2

Preparar diariamente

La Estabilidad fisicoqumica

Temperatura Humedad

del compuesto
depende de:

Luz
Radiaciones

Ejercicio
Reactivo de Oxidasa
Temperatura Ambiente, Refrigeracin Congelacin Humedad Desecador Luz Frasco mbar o en el anaquel

Radiaciones Se afectan los dobles enlaces?

Las pruebas bioqumicas imprescindibles en el Laboratorio de Bacteriologa Clnica LBC.

Catalasa, oxidasa, Crec. en Mc. Conkey, TSI (KIA), LIA, MIO, Citrato, Urea, O/F glc, Sensibilidad a optoquina y a bacitrina, Hidrlisis de hiparato, Prueba de CAMP, Comportamiento a Cefalotina y Ac. Nalidxico, Crec. en NaCl

Pruebas tiles en el LBC

O/F con manitol, O/F lactosa, ONPG, Esculina, Crec. en colorantes (Tionina, fucsina, safranina), Red. de NO3

Todo esto conlleva a poseer en cada Laboratorio, un Cepario.

Es necesario ponderar
Costo de reactivos Y Tiempo empleado En el C. Calidad Precio Beneficio

Para Laboratorios de Alta Especializacin se reserva:

La identificacin de MYCOBACTERIUM SP La identificacin de mollicutes

Para

BGNnF
B. Anaerobias Bacilos GN de crec. Lento Bacilos GP CGP (exc. Strep beta h)

Es necesario emplear mtodos miniaturizados de identificacin

Reactivos:
Cuando se preparen Cada vez que se usen Cada semana

Control de Calidad de los Colorantes usados en el LBC.

Se deben tener cepas adecuadas para observar la estructura deseada.

Se debe tener cuidado con los parmetros siguientes.

Temperatura Humedad

Luz
Radiaciones

Control de Calidad en los Medios de Cultivo

Un buen medio de cultivo debe estar hecho, para:

Recuperar los microorganismos para los que fue diseado su uso. Y en el cual deba presentarse siempre la misma morfologa colonial.

METODOS DE EVALUACION

Mtodo casero: Siembra de una cepa que crezca y evaluacin de su morfologa. Tambin debe sembrarse (en su caso) una cepa que no crezca, o que presente diferente caracterstica.

Ej: Gelosa sangre sembrar un estreptococo alfa, uno beta y un Haemophilus influenzae
Realizarlo cada ves que se preparen los medios

Mtodo Ecomtrico: Sembrar la placa de la manera siguiente:

1 5 3

Consiste en hacer crecer la bacteria y despus hacer dilucin, de sta sembrar en la forma ya sealada, incubar y observar en que parte de la placa hubo crecimiento (1, 2, 3, 4 5). El medio ms adecuado para la bacteria permitir su desarrollo an en la porcin 5 El medio no adecuado o inhibitorio no permitir el crecimiento del microbio.

La accin se repite en 6 placas 3 sembradas con cepas que s deban desarrollar y las restantes con 3 cepas que deban ser inhibidas.
El medio ideal sera: 555 000.

Este medio no existe, pero un buen medio podra ser: 333 000

Este mtodo se debe emplear cada vez que se abra un nuevo bote o lote de medio de cultivo.

Mtodo de Miles y Misra

Consiste en:

Crecer una cepa en caldo, toda la noche 16 24 hs.

Diluir:

10 -6 10 -7 10 -8

Dividir una placa del Medio a probar en 6

Verter en placa Medio no selectivo

En cada divisin colocar 20 uL del Cultivo. (Repetir el ensayo en 6 placas)

Incubar

Incubar y contar

Contar No. Total de microbios

1 6

6 + 3 + 5 + 4 + 2 + 4 = 24 6 = 4 4 multiplicado x 50 = 200 200 multiplicarlo por la dilucin (inverso recproco) = 200 millones de bacterias.

200 millones se comparan con el # total de bacterias contadas en el agar NO selectivo. Ej. No. de colonias crecidas en el agar no selectivo. 30x107 = 300 millones Comparar: 300 crecidas en medio no selectivo y 200 millones crecidas en el medio selectivo la recuperacin es: 200 x % = 66.6 % 300 Ser bueno el medio?

Realizar este mtodo cada vez que se cambie de lote del medio.

EPIDEMIOLOGIA
Etimologa Epi: Alrededor, acerca de Demos: Poblacin Logos: Tratado o estudio tericamente es la ciencia que estudia a las comunidades humanas y todo su entorno.

En salud pblica la epidemiologa estudia los factores de las comunidades que condicionan la presencia de enfermedades Deberamos decir:
Que condiciona la Salud

Indicadores de Salud en la Comunidad (entre otros)

Esperanza de vida media al nacer La razn de muerte en el binomio embarazoparto La mortalidad infantil Los casos de tuberculosis Las Tomas de agua potable. domiciliario / en la poblacin

Infeccin y Enfermedad
A menudo se confunde infeccin con enfermedad. La infeccin es solo hecho ecolgico en donde se presenta una simbiosis (Vivir juntos), de 20 ms seres vivo, y no siempre se daan

Hechos Simbiticos
Comensalismo: Uno o mas seres vivos comen de otro ser vivo sin daarlo. Parasitismo: Uno o varios seres vivos viven a expensas de otro s lo daan

En la naturaleza hay ms cosas de comensalismo que de parasitismo

La enfermedad infecto-contagiosa se inicia con:

Reconocimiento de sitio blanco por el microbio. Adherencia a ste por el microbio colonizacin del tejido Husped Manifestacin del dao en el tejido

Pruebas Bioqumicas Bsicas

Pruebas Bsicas:

1.

Medio de cultivo en el que creci y tiempo transcurrido. Morfologa Macroscpica. Morfologa Microscpica Prueba de Oxidasa

2.

3.

4.

La seleccin de las pruebas bioqumicas est en funcin del nivel de diferenciacin que necesitamos

De un gnero a otro De una especie a otra

De un gnero a una especie o viceversa

Pruebas metablicas bsicas de identificacin Bacteriana

A
Utilizacin de Nutrientes

B
Ciclo de Krebs

C
Cadena Respiratoria

A:

Utilizacin de Carbohidratos y/o aminocidos. Transporte, rompimiento, transformacin.

TSI (KIA) Kligler O/F CTA Agar de hierro y tres azcares Agar de Hierro de

Con carbohidratos Agar Cistina triptosa

B:

Pruebas de ciclo de Krebs

Citrato de Simmons

Malonato

C:

Pruebas de cadena respiratoria

Oxidasa

Catalasa Crecimiento en KCN

Pruebas siempre bsicas.

-

Crecimiento de un medio enriquecido Crecimiento en Mc Conkey Tiempo de Crecimiento Morfologa Microscpica (Tincin de Gram) Tipo de Metabolismo (TSI vs O/F) Movilidad (MIO/OF)

Tincin de Gram
GR: Reaccin de Gram (Tipo de pared = coloracin roja o azul) A: M: Arreglo (Cmo se agrupan solos, pares, tetradas, estafilos, estreptos,etc) Morfologa (Cocos, bacilos, cocobacilos,bacilos largos, cortos, extremos)

Prueba de Oxidasa

Pseudomonas aeruginosa

Escherichia coli

Prueba de Catalasa

Staphylococcus sp

Streptococcus sp

Tipo de Metabolismo

Oxidativo Fermentativo Inerte

Metabolismo Oxidativo:
En un tipo de metabolismo que tiene como aceptor final de electrones al oxgeno y por ello se lleva a cabo en condiciones aerbicas.

Metabolismo Fermentativo
Est relacionado con la fosforilacin inicial del carbohidrato y su ulterior rompimiento por una va que no tiene al oxgeno como aceptor de electrones.

Metabolismo Inerte

Se considera que este tipo de metabolismo no tiene capacidad de utilizar a los carbohidratos como nutrientes.