VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

Familia Retroviridae Subfamilia Orthoretrovirinae Gnero Lentivirus Tipos: VIH-1 y VIH-2
Virus esfrico envuelto (90130 nm) Genoma:2 hebras simples de ARN +

(9,8 kb) Protenas de Superficie gp120-gp41 // gp105-gp36 Polimerasas unidas al ARN p65/51; p31 // p68 p34 Proteinas del Core p17 -p24 // p16 - p26

Los viriones contienen 2% de cido nucleico.(2 ARN (+) y 1 ARNt (trp, pro,lys)
Genoma : 2 molculas de ARN de sentido positivo que poseen cap en el extremo 5 y una cadena polyA en su extremo 3. Su tamao vara entre 8 a 11 kb.

R: repetidos directos (18-250 nt) U5: regin no codificante. Comienza retrotranscripcin PBS: sitio de union del primer para la retrotranscripcin Leader: aprox 90-500 nt. Est en el extremo 5 de todos los ARNm

PPT: zona de polipurinas. (aprox 10 nt). Lugar de iniciacin de la sntesis de la hebra + durante la retrotranscripcin U3: Contiene los elementos promotores de la transcripcin del provirus gag: codifica proteinas del Core y la PR pol: codifica enzimas (RT, IN) env: codifica glicoproteinas de superficie

VIH-1

VIH-2

Organizacin genmica del HIV-1

Ciclo replicativo del HIV

DIVERSIDAD GENETICA DEL VIH

TIPO GRUPO SUBTIPO RECOMBINANTES
B/F, A/G, A/E, A/C, A/G/J

M
HIV-1 O N

(mayor)

A,B,C,D,E,F G,H,I,J,K,L

(outlier)

(no M, no O)

HIV-2

A,B,C,D,E,F

Alta tasa de variabilidad

Alta tasa de error en la lectura de la Retrotranscriptasa: 1 nucletido/ciclo replicativo Alta tasa de replicacin viral: 4,4 x 1010 particulas virales por dia.

Recombinacion retroviral: Formas Recombinantes Circulantes (CRFs),

Formas Recombinantes Unicas (URFs)

VIRUS HETEROCIGOTO

VIRUS RECOMBINANTE

ESTRUCTURA GENMICA DE LAS FORMAS RECOMBINANTES

CRFs

URFs

Sin Clasificar

Sin Secuenciar

Distribucin geogrfica del VIH (Tipos,Subtipos y CRFs)

A A A,D,E,O

B,A,C,D,G

A,B A,B

A,C,D,F

A,B B,D

A,B, B
C,D

,C,D
B/F,B/D

? CRF12-BF A B,F,C

VIH-1 VIH-2

HISTORIA NATURAL DE LA INFECCION POR VIH

Seroconversin Infeccin asintomtica SIDA

4-8 semanas

aprox. 10 aos

2-3 aos

CICLO DEL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

PCR DNA proviral (cualitativa) RNA viral (cualitativa)

ARN viral HIV

Carga Viral
(nde copias ARNv /ml)

(cuantitativa)

Clulas blanco:
Linfocitos T CD4, Monocitos, Macrofagos, Clulas de Langherans, Clulas dendrticas

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
Estudio de respuesta inmune humoral: IgM, IgA, IgG
Test de Tamizaje :

Enzimo inmuno anlisis (EIA)

Test rpidos Aglutinacin de partculas
Test Confirmatorios

Western Blot (WB) Ensayo en Lnea (LIA)

Deteccin directa de presencia viral

Estudio de Proteinas virales (Ag p24) Estudio de Acidos nucleicos: ADN proviral

ARN viral

Estudio de respuesta inmune humoral: IgM, IgA, IgG

Los test serolgicos se basan en la interaccin Antgeno Anticuerpo. Test de Tamizaje Son altamente sensibles para poder detectar los Ac en la muestra. Detectan anticuerpos para HIV-1 y HIV-2 (sin lograr discriminar) Detectan anticuerpos contra grupo M y O

Antgenos: Lisado total de virus, Proteinas recombinantes, Peptidos sintticos

Test Confirmatorios

Son altamente especficos para confirmar con certeza la presencia de Ac. Especficos contra HIV.
Pueden discriminar infeccin por HIV-1 o por HIV-2

EIA 4 GENERACION
Sustrato

Proteinas recombinantes
Peptidos sinteticos Ac paciente Ag viral Ac conjugado

HIV-2 env HIV-1 env

HIV-1gag

HIV-O

Muy buena especificidad Detecta bajos ttulos de Anticuerpos (seroconversin) Buena sensibilidad para Ac. anti HIV-2 y Ac. anti grupo M y O de HIV-1,

E
HIV-2

Detecta IgG e IgM

Detecta Ag virales HIV-1 (grupo M y O) HIV-2

Soporte Solido

TEST RAPIDOS

TEST CONFIRMATORIOS
Western Blot LIA
ID muestra

WB mejorado

3.+ 1+ +/gp120 gp 41 p31 p24 P17

Criterios: WB Positivo: p24,gp41,gp120/160 (p24 con al menos otra) WB Negativo: Ausencia total de Bandas

gp105 gp36

Algoritmo para el diagnstico serolgico de la infeccin por VIH

No Reactivo informar Tcnicas de Tamizaje Reactivo No Reactivo (-/-) informar 2 Tcnicas de Tamizaje
Distinta Configuracin antignica

Laboratorio Perifrico Banco de Sangre Laboratorio de Referencia

Reactivo (+/+)

Discordante (+/-)

WESTERN BLOT

INFORMAR

Positivo *

Indeterminado
Repetir serologa en 30 das

Negativo

Diagnostico Molecular de la Infeccin por HIV

Deteccin cualitativa de Acido Nucleico (ADN proviral o ARN viral) Diagnstico en nios nacidos de madres seropositivas Serologa indeterminada Hipoglobulinemia

Deteccin cuantitativa de Acido Nucleico (ARN viral)

Carga Viral ( n copias de ARN v/ml) en pacientes infectados Inicio de tratamiento Evaluacin de tratamiento Cambios de tratamiento Estudio resistencia a drogas antiretrovirales

infectado

serorrevertido
IgA en sangre: indicador de una respuesta inmunolgica especfica a la infeccin viral en el nio.

Seguimiento en el laboratorio del nio nacido de madre VIH +

48 hs 2 semanas de vida
PCR, Elisa, Western Blot

PCR -

PCR+PCR Carga Viral Poblacin Linfocitaria

1 2 meses de vida
PCR -

PCR

PCR + PCR Carga Viral Poblacin Linfocitaria PCR -

PCR + PCR Carga Viral Poblacin Linfocitaria

PCR -

>5 meses de vida

PCR

PCR

PCR PCR + PCR PCR +

PCR -

PCR +

Infeccin poco probable

nueva PCR

infectado

nueva PCR

Seguimiento en el laboratorio del nio nacido de madre VIH + Diagnostico de no infeccin: 3 PCR 2 muestras negativas en dos momentos distintos en nios >1 mes de vida, ms 1 muestra negativa en > 4 meses de vida
Diagnostico de infeccin: 3 PCR + 3 muestras positivas en dos momentos distintos y al menos una de ellas en nios > 4 meses Diagnostico de serorreversin: 2 o ms muestras con ELISA y Western Blot negativos entre los 6 y 18 meses de edad y dosificacin de inmunoglobulinas normales

En todos los casos seguir con ELISA hasta 18 meses de edad

El LABORATORIO de VIROLOGA EN LA INFECCIN POR VIH EN PEDIATRIA

Diagnostico de la Infeccin por VIH
Nios mayores de 18 meses: ELISA - Western Blot Nios menores de 18 meses: Determinacin Cualitativa ADN proviral ARN viral

Seguimiento de Nios infectados

Carga Viral : n de copias de ARN v/ ml
Inicio de tratamiento Evaluacin de tratamiento Cambios de tratamiento

Estudio de Resistencia a drogas antirretrovirales

ADULTOS Y NIOS QUE VIVIAN CON EL VIH A FINES DEL 2006

1983 inicio de la epidemia del VIH/SIDA

6.463 casos acumulados de VIH + (1983- 06/2006)

2.895 casos acumulados de SIDA (1983- 06/2006) 9.358 casos acumulados VIH/SIDA (1983-06/2006)

MECANISMO DE TRANSMISIN SIDA EN URUGUAY - 2006

4%

25%

71%
Sexual Sanguneo Perinatal

RELACION H/M EN SIDA ANUAL URUGUAY.- Aos 1991-2005.

9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 Ao 1991 Ao 1996 Ao 2001 Ao 2005 Rel.H/M

VIH Y SIDA POR GRUPOS ETARIOS URUGUAY.- Aos 1983-2005.

2500 2000 1500 Casos 1000 500 0 0-14 15-24 25-34 35-44 45-54 55y+ Grupos etarios s/d VIH SIDA

Estado de Situacin
Tendencia creciente del VIH /SIDA Prevalencia de 0,23% en el 2000 a 0,45% 2004 Pico mxima incidencia en poblacin joven, con aumento progresivo de las mujeres. JUVENILIZACIN Y FEMINIZACIN DE LA EPIDEMIA La situacin de vulnerabilidad de mujeres y adolescentes / jvenes, y de las poblaciones con prevalencia mayor a 5%:usuarios de drogas, hombres que tienen sexo con hombres (HSH), personas privadas de libertad,

Uno de los riesgos de sta epidemia es el Silencio

Rompamos el silencio y derribemos los obstculos que impiden una prevencin y atencin del VIH/SIDA eficaces.